含有治疗性蛋白混合物的组合物及其生产方法技术

本发明专利技术公开了通过过度表达细胞因子调控因子的细胞产生人细胞因子混合物及生产方法。混合物的制备是通过在细胞因子调控因子过度表达的条件下，培养产生人细胞因子的细胞，处理细胞诱导产生细胞因子，并分离细胞产生的细胞因子混合物。用于治疗病毒感染或癌症的优选的组合物包括，人干扰素γ与干扰素α或人干扰素β的混合物，干扰素γ与干扰素α或人干扰素β的摩尔比在１∶１至１∶１００之间。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及人细胞系产生的组合物及其生产方法，该组合物包含用于治疗病毒感染，癌症，炎性疾病，其他细胞因子反应性疾病的已筛选的细胞因子混合物。参考文献Altschul，S.F.等人，J.Mol.Biol.215403-410，1990.Altschul，S.F.等人，Nucleic Acids Res.253389-3402，1997.Ausubel FM等人，现代分子生物学实践，JohnWiley & Sons，New York，N.Y.，1989.Barber，G.N.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA91，4278-4282，1994.Clemens MJ和BommerUA，Int J BiochemCell Biol，31(1)1-23，1999.Cohen，J.J.，Immunol Today 14(3)126-130，1993.Der，D.和Lau，A.S.，Proc Natl Acad Sci USA，928841-8845，(1995).Donze，0.等人，Virol 256322-329，1999.Galabru，J.和Hovanessian，A.，J.Biol.Chem.26215538-15544，1987.Hershey，J.W.B.，Ann.Rev.Biochem.60717-755，1991.Hopp等人，Biotechnology61204-1210，1988.Hovanessian，Biochimie 62775-778，1980.Huang等人，Oncogene 14405-414，1997.Inoue I等人，(Neurol Med Chir(Tokyo)31(8)484-489，1991).Jagus R.等人，IntJ Biochem Cell Biol.31(1)123-38，1999.Koromilas等人，Science 2571685，1992.Kumar，A.等人，Proc Natl Acad Sci USA 916288-6292，1994.Larrick，J.W.和Wright，S.C.，FASEB J 43215-3223，1990.Liddil，J.D.等人，Cancer Res 492722-2728，1989.Meurs，E.等人，Cell 62379-390，1990.Mulligan和Berg，1980.Orrenius，S.，J Intern Med 237529-536，1995.Patel，R.C.和Sen，G.C.EMBO J.，17，4379-4390，1998.Rubin，B.Y.等人，Cancer Res 486006-6010，1988.Sambrook J等人，分子克隆实验室手册，Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，NY，Vol.2，1989.Southern和Berg，J MolAppi Genet.1(4)327-41，1982.Srivastave，S.等人，J Biol Chem2732416-2423，1998.Stellar，H.，Science 2671445-1449，1995.Sugden等人，Mol.Cell.Biol.，5410-413，1985.Vaux，D.L.，Proc Natl Acad Sci USA 90786-789，1993.Wek RC，Trends Biochem Sci；19491-496，1994.Williams BR，Oncogene 18(45)6112-20，1999.Yeung，M.C.等人，Proc Natl Acad Sci USA 9312451-12455，1996.Yeung MC，等人，Proc Natl Acad Sci USA 96(21)11860-5，1999.
技术介绍
细胞因子用于治疗多种人类病变，包括癌症，病毒感染和炎症。一般来说，细胞因子的治疗涉及给予单一的，已分离的和通常是重组的细胞因子，如干扰素α(IFN-α)，干扰素β(IFN-β)或肿瘤坏死因子(TNF)等。尽管已经观察到一些治疗效应，但改善的程度并不理想，细胞因子通常与一种或多种其他的治疗形式结合使用。体内产生细胞因子的细胞，如单核细胞，巨噬细胞，B-细胞，树突状细胞，TH1和TH2，肥大细胞，NK细胞和骨髓基质细胞，典型地都可产生细胞因子复合体混合物。因此，单个细胞因子在单独使用时效果不理想并不奇怪。因此为了临床应用需要制备一种含有细胞因子混合物的细胞因子组合物，它类似于在体内产生的细胞因子的天然混合物。特别是需要在细胞培养系统中产生可产生和分泌高水平细胞因子的一种细胞因子混合物。专利申请系列号第09/595,338及其临时性的前置申请公开了通过在细胞因子调控因子过度表达和细胞因子诱导的条件下培养产生细胞因子的人体细胞，制备高水平细胞因子的细胞培养方法。本申请涉及通过相关方法产生的细胞因子混合物，获得改良的细胞因子组合物的方法和使用含有细胞因子混合物的组合物的方法。专利技术概述专利技术提供了含有人细胞因子混合物的组合物，其产生是通过培养能够产生细胞因子混合物的人细胞系，该细胞系的特点是过度表达细胞因子调控因子和/或抗凋亡蛋白，处理细胞系使细胞因子混合物的产量提高，收集细胞产生的细胞因子。细胞系可通过触发或触发和诱导而进行处理。过度表达细胞因子调控因子的细胞系可通过用细胞因子调控因子和/或抗凋亡蛋白编码核酸序列转化或亚克隆和筛选而产生。在一个方法中，细胞因子通过已筛选的细胞因子的共纯化进行收集。在专利技术中用于癌症治疗的一个方面中，细胞因子混合物包括两种或多种细胞因子，选自白介素-2(IL-2)，白介素-12(IL-12)，白介素-15(IL-15)，干扰素-α(IFN-α)，干扰素-β(IFN-β)，干扰素-γ(IFN-γ)，干扰素-Ω(IFN-Ω)，肿瘤坏死因子-α(TNF-α)，自然杀伤细胞增强因子(NKEF)，自然杀伤细胞刺激因子(NKSF)，TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。在本专利技术用于治疗病毒感染的另一个方面，细胞因子混合物包括两种或多种细胞因子，选自干扰素-α(IFN-alpha)，干扰素-β(IFN-β)，干扰素-γ(IFN-γ)，干扰素-Ω(IFN-Ω)，转化生长因子β(TGF-β)，白介素-8(IL-8)，白介素-12(IL-12)和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。仍在本专利技术用于治疗炎性疾患的另一个方面，细胞因子混合物包括两种或多种细胞因子，选自白介素(IL-4)，白介素-5(IL-5)，白介素-6(IL-6)，白介素-10(IL-10)，干扰素-β(IFN-β)，干扰素-γ(IFN-γ)和转化生长因子β(TGF-β)。用于治疗癌症，病毒感染或炎症的一个优选组合物包括人干扰素γ和干扰素β的混合物，干扰素γ与干扰素β的摩尔比在2∶1至1∶100之间，实例为1∶1至1∶10的比例和1∶10至1∶100的比例。也可用于治疗癌症，病毒感染或炎症的第二个优选组合物包括人干扰素γ和干扰素α的混合物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含有人细胞因子混合物的组合物，其可由下面的方法产生：（ａ）培养能够产生细胞因子混合物的人类细胞系，所述的细胞系的特征是过度表达细胞因子调控因子；（ｂ）处理过度表达细胞因子调控因子的细胞系使细胞因子混合物的产量增加；和（ｃ）收集培养的、过度表达细胞因子调控因子的细胞系产生的细胞因子。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：AS劳，WH旺，L布郎宁，N奥西那，
申请(专利权)人：基因特罗生物治疗公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]