一种白细胞减少症治疗药物及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种白细胞减少症治疗药物及其制备方法，是以细菌多糖为原料制成的，属于外用给药制剂。由两部分组成：（１）细菌多糖冻干粉：菌粉经酶解、提取、冷冻干燥得细菌多糖。此制备方法保持较高的生物活性；（２）促进剂：由甘氨胆钠、无菌水组成。临床用（１）、（２）合并。本发明专利技术是治疗肿瘤患者因放射、化学疗法引起的白细胞减少症的外用药，可增加机体的免疫功能，具有成本低、剂量小、活性高、使用方便的特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，是以细菌多糖为原料制成的，属于外用给药制剂。
技术介绍
目前，全世界肿瘤、癌症、血液系统疾病患者发病率逐年上升，在其治疗过程中必须应用放射、化学疗法，抑制骨髓造血系统，损伤骨髓造血细胞，引起各种血细胞减少，导致造血功能障碍。其主要原因是放射、化学疗法对骨髓细胞的毒性作用。多数抗癌药对肿瘤细胞杀伤的选择性差，放疗、化疗时间长、剂量大，对骨髓细胞的毒性作用强，而引起造血功能障碍，使粒系、红系、巨系、淋系等血细胞减少(其中粒系减少量最为严重)。所以使用一些生血药物和生物工程类-细胞因子(例rhGM-CSF基因重组巨噬细胞粒细胞集落刺激因子、EPO促红细胞生成素等)，此类注射剂的副作用使患者发热，产生热原反应。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有生物工程类药物对白细胞减少症产生发热、热原反应等缺陷。提供一种通过滴鼻或喷雾等外用给药，无毒副作用，治疗指数高的白细胞减少症治疗药物。本专利技术的另一目的是提供白细胞减少症治疗药物的制备方法。为实现上述目的，本专利技术的技术方案是该白细胞减少症治疗药物是由下述重量配比的原料制成细菌多糖 0.05--0.4份低分子量右旋糖酐 8--12份甘氨胆酸钠 3--7份 无菌水 300--700份；制备本专利技术药物的配方优选重量配比范围是细菌多糖 0.1--0.2份 低分子量右旋糖酐 6--10份甘氨胆酸钠 4--6份无菌水 400--600份；制备本专利技术药物的配方最佳配比是细菌多糖0.1份、低分子量右旋糖酐10份、甘氨胆酸钠5份、无菌水500份；所述的药物制剂是滴鼻剂或喷雾剂。一种白细胞减少症治疗药物的制备方法，依次按下列步骤(1)制备细菌多糖①粘质赛氏杆菌菌种接种于普通肉汤培养基中，温度控制在28--30℃，24--30小时；②挑选单菌落于普通琼脂培养基中培养，温度为28--30℃，24--30小时；③接种于摇瓶培养液中，置于恒温震荡培养箱内，振荡次数80--130次/分钟，20--25小时；④摇瓶培养液接种于发酵罐培养液中，温度为28--30℃，40--48小时；⑤发酵液离心，湿菌体加入其5--8倍4℃丙酮，制成丙酮干粉；⑥丙酮干粉加入溶菌酶水溶液，温度30--38℃，30分钟；⑦离心，上清液加入固体0.2M三氯醋酸；⑧三氯醋酸提取液加入其10倍量的浓度为95％乙醇，产生沉淀物为细菌多糖，去离子水透析后，冷冻干燥；(2)制取细菌多糖药剂①取细菌多糖冻干粉0.05--0.4重量份，低分子量右旋糖酐8--12重量份，于配液瓶内，加入无菌水300--700重量份，搅拌使其溶解，除菌，分装瓶，冷冻干燥；②促进剂甘氨胆酸钠3--7重量份于配液瓶内，加入无菌水300--700重量份，搅拌使其溶解，调节pH至6.7--7.2之间，除菌，分装开滴管中，密封；所述摇瓶培养液及发酵罐培养液的组成为蛋白冻5g/L、酵母膏3g/L、牛肉膏15g/L、氯化钠3.5g/L、葡萄糖1g/L、磷酸氢二钾3.68g/L、磷酸二氢钾1.32g/L，pH7.0--7.2。本专利技术白细胞减少症治疗药物是采用滴鼻剂或喷雾剂，是外用给药，无毒副作用，不仅能排除放射、化学疗法导致骨髓细胞造血功能障碍，还能刺激巨噬细胞产生细胞因子(TNF、IL-1、IL-6、IL-8、IFNγ)使骨髓造血细胞分化，迅速恢复造血功能，促进白细胞再生，综合提高人体免疫力。本专利技术选择菌种活性高，治疗指数高，无毒副作用，而且是鼻腔给药，通过临床观察和动物模型实验，治疗肿瘤患者因放射、化学疗法损伤骨髓造血系统，引起的白细胞减少症，疗效确切，给药24小时后，白细胞数可升高0.5--1.0倍。本专利技术具有以下优点1、使用剂量低，生物活性高。隔日给药一次，每次100μg；2、通过鼻粘膜吸收给药，达到全身性用药目的。使其给药途径简单、方便、疗程短、见效快、无毒副作用；3、治疗肿瘤患者因放射、化学疗法损伤骨髓造血干细胞引起的白细胞减少症及造血功能障碍，疗效确切，给药24小时后，白细胞数即或升高0.5--1.0倍。本专利技术药物临床观察结果如下细菌多糖滴鼻剂组患者的白细胞数与基因重组巨噬细胞粒细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)皮下注射组比较p＞0.05，无显著性差别，细菌多糖滴鼻剂组白细胞数升高原水平30％以上的78例，白细胞数升高原水平30％以下的6例，白细胞数维持原水平的10例，白细胞数升高原水平50％以上的62例，显效率为65.6％。见表1。本专利技术药物动物实验如下1、该药物滴鼻剂治疗家兔白细胞减少症的实验研究结果说明该药物滴鼻剂使白细胞升高倍数与剂量呈量效关系，结果见表2。2、该药物滴鼻剂恢复小鼠造血功能的作用证明该药物滴鼻剂可恢复小鼠造血功能，中、高剂量组外周血白细胞数、骨髓中粒细胞％、粒系红系比值、淋巴细胞％及骨髓有核细胞计数接近正常对照组。环磷酰胺模型组中外周血中白细胞数明显减少，骨髓细胞中粒细胞％、红细胞％、粒系∶红系比值、淋巴％及骨髓有核细胞计数均明显低于正常对照组，结果见表3。表1细菌多糖滴鼻剂白细胞减少症治疗的临床观察结果 白细胞数(WBC×109x±s)给药前(h)给药后(h)n 24 2448 72对照组rhGM-CSF 100μg/d96 3.72±0.45 4.71±0.756.36±1.56 5.82±0.84滴鼻剂组 100μg/d 94 3.66±0.39 4.35±0.806.04±1.44 5.25±0.93细菌多糖滴鼻剂组与rhGM-CSF皮下注射组比较，p＞0.05治疗白细胞减少症的临床效果无差别表2细菌多糖滴鼻剂治疗家兔白细胞家减少症的实验研究(白细胞数×109/L x±s)n＝7组别 给药剂量 给药次数/Kg 原水平造型后给药1给药2给药3 给药4 给药5对照组 生理盐水 8.12 8.05 8.15 8.19 8.03 8.09 8.11模型组 CY150mg 7.42 4.35 4.37 4.41 4.44 4.47 4.51对照药组 rhGM-CSF3μg6.85 4.22 4.31 5.26 6.37(0.5) 6.71 *7.02(0.6)滴鼻剂 25μg 7.13 4.51 4.75 4.97 5.09(0.1) 5.23 *5.56(0.2)滴鼻剂 *50μg6.75 4.18 5.12 5.88 6.42(0.5) 6.75 *7.38(0.7)滴鼻剂 *100μg 7.02 4.49 5.73 7.41 9.15(1.0) 9.49 *9.94(1.2)*滴鼻剂中、高剂量组外周血白细胞数与对照组比较P＞0.05说明滴鼻剂可治疗环磷酰胺引起的白细胞减少症。环磷酰胺模型组外周血中白细胞数明显减少，与正常对照组比较P＜0.05。( )内为白细胞数升高的倍数。表3细菌多糖滴鼻剂恢复小鼠造血功能的作用(x±s n＝10)给药剂量白细胞数 骨髓细胞/Kg ×109/L粒细胞％红细胞％粒系∶红系淋巴％骨髓有核细胞计数×109/L对照组生理盐水7.1±1.4580±13 29±5 2.75∶1 29±9 31.0±12.0□□组cy 150mg 1.9±0.1348±9 0 0.48本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种白细胞减少症治疗药物，该药物是由下述重量配比的原料制成：细菌多糖０．０５－０．４份低分子量右旋糖酐８－１２份甘氨胆酸钠３－７份无菌水３００－７００份。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李延平，刘义，
申请(专利权)人：广东医学院，
类型：发明
国别省市：44[中国|广东]