新的多磷酸AMP磷酸转移酶制造技术

本发明专利技术涉及到下述的新的多磷酸ＡＭＰ磷酸转移酶（Ｐｏｌｙｐｈｏｓｐｈａｔｅ：ＡＭＰ　　Ｐｈｏｓｐｈｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ：ＰＡＰ）、编码该酶的基因以及他们的利用。（Ａ）作用：催化下述两个反应。ＮＭＰ（ｄＮＭＰ）＋ＰｏｌｙＰ↓［（ｎ）］→ＮＤＰ（ｄＮＤＰ）＋ＰｏｌｙＰ↓［（ｎ－１）］（式中，ＮＭＰ为核苷一磷酸、ＮＤＰ为核苷二磷酸、ｄＮＭＰ为脱氧核苷一磷酸、ｄＮＤＰ为脱氧核苷二磷酸，ｎ表示多磷酸的聚合度、为１００以下的整数）。（Ｂ）底物特异性：对ＡＭＰ、ＧＭＰ、ＩＭＰ、ｄＡＭＰ、ｄＧＭＰ特异，也可作用于ＣＭＰ、ＵＭＰ、ｄＣＭＰ、ＴＭＰ。（Ｃ）分子量：约５５～５６Ｋｄ（千道尔顿）。（Ｄ）比活：每１ｍｇ酶蛋白７０单位以上。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种具有下述理化性质的多磷酸ＡＭＰ磷酸转移酶　，　（Ａ）作用：催化下述两个反应，　ＮＭＰ＋ＰｏｌｙＰ↓［（ｎ）］→ＮＤＰ＋ＰｏｌｙＰ↓［（ｎ－１）］ｄＮＭＰ＋ＰｏｌｙＰ↓［（ｎ）］→ｄＮＤＰ＋ＰｏｌｙＰ↓［（ｎ－１）］　 　式中，ＮＭＰ为核苷一磷酸、ＮＤＰ为核苷二磷酸、ｄＮＭＰ为脱氧核苷一磷酸、ｄＮＤＰ为脱氧核苷二磷酸，ｎ表示多磷酸的聚合度、为１００以下的整数，（Ｂ）底物特异性：对ＡＭＰ、ＧＭＰ、ＩＭＰ、ｄＡＭＰ、ｄＧＭＰ特异，也可作用于ＣＭＰ、ＵＭ Ｐ、ｄＣＭＰ、ＴＭＰ，（Ｃ）分子量：约５５～５６Ｋｄ（千道尔顿），（Ｄ）比活：每１ｍｇ酶蛋白７０单位以上，而所谓１个单位表示于３７℃下在１分钟生成１μｍｏｌｅ的ＡＤＰ的活性，在以下条件下测定，〈测定条件〉 向含有２０ｍＭ氯化镁、１０ｍＭＡＭＰ以及多磷酸（以无机磷酸计量３０ｍＭ）的５０ｍＭＴｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液（ｐＨ７．８）中添加酶标准品后，通过于３７℃下保温进行反应，于１００℃、热处理１分钟使反应停止，使用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ ）对反应液中的ＡＤＰ进行定量。...

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：柴肇一，野口利忠，
申请(专利权)人：雅玛山酱油株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]