本发明专利技术提供一种人体初乳提取物高纯度乳铁蛋白(Lf)的提取工艺及其制品,所述提取工艺包括以下工艺步骤:收集健康产妇多余初乳;离心除去杂质、脂肪;凝乳,除去酪蛋白;收集凝乳后的上清液(乳清蛋白);300PS膜处理;真空浓缩;冷冻干燥,获得纯度为98%的乳铁蛋白提取物。一种高纯度乳铁蛋白制品,包括乳铁蛋白和添加剂。所述Lf提取物采用上述方法制成;所述添加剂为免疫球蛋白、氨基酸、中草药、生物制剂、各类乳品之一或其组合;所述产品形态可以为片剂、胶囊及口服液。其质量百分比分别为,Lf提取物15~80%,添加剂15~80%。本发明专利技术的最终产品的添加剂科学合理,针对性强。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于运用生物工程技术从人体母乳初乳中,分离提取乳铁蛋白Lf的
特别涉及一种人体初乳提取物乳铁蛋白Lf的提取工艺及其制品。
技术介绍
1、乳铁蛋白的基本结构乳铁蛋白是哺乳动物(人、牛、马、羊)初乳形成阶段、泌乳期、涸乳期乳房腺体分泌物中主要的糖蛋白之一。它是一种具有多种生物学功能的蛋白质,它不仅参与铁的转运,而且还具有抗微生物、抗氧化、抗肿瘤、强力止痛和调节免疫系统的功能,被认为是一种新型的抗菌杀毒、抗癌去痛药物和极具开发潜力的食品和饲料添加剂。乳铁蛋白因其晶体呈红色又称“红蛋白”,是一种铁结合性糖蛋白,相对分子质量77000±2000,其主体呈无柄银杏叶并列状结构,铁离子结合在两叶的切入部分(Fe离子间隔2.8~4.3μm)椭圆形叶的大小为5.5μm×3.5μm×3.5μm。1分子乳铁蛋白中含有2个铁结合部位,15~16个甘露糖,5~6个半乳糖,10~11个乙酰葡萄糖胺和1个唾液酸,其中中性糖含量8.5%,氨基糖含量2.7%。人乳Lf多肽链由703个氨基酸残基组成,其上附有两条碳水化合物侧链,碳水化合物含量约7%。且人乳Lf中谷氨酸(Glu)、天冬门氨酸(Asp)、亮氨酸(Lue)和丙氨酸(Ala)含量较高,所含唯一含硫氨基酸为半胱氨酸(Cys),终端有一个丙氨酸(Ala)残基。人乳铁蛋白每分子有两个糖基和两种分子形态,其主要差别在于它们所含的糖类不同。分子中有2个金属结合位点,每个位点可结合一个Fe3+和一个HCO3-或CO3-2。根据乳铁蛋白结合Fe3+的多寡,可将之分为缺铁型乳铁蛋白、铁半饱和型乳铁蛋白和铁饱和型乳铁蛋白三种形式。不同形式的乳铁蛋白具有不同抗变性能力。2、乳铁蛋白的功能及作用机理A、乳铁蛋白的结合功能乳铁蛋白可以与许多物质结合的属性是其多种生物学功能的基础。每分子饱和乳铁蛋白中含有两个Fe3+离子。乳铁蛋白不仅能结合Fe3+,而且对许多过渡金属如Cu2+、Ca2+、Al3+都有结合作用。乳铁蛋白对铁的结合,避免了人体内OH+有害物质的生成。乳铁蛋白可通过催化自由基的形成参与吞噬细胞的杀死作用。研究显示铁离子是除乳酸菌以外的几乎所有细菌生长所必需的物质,而乳铁蛋白恰恰能通过与需铁菌的亲铁基团竞争铁,夺取细菌生长所需的Fe3+,从而使细菌的生长受到抑制。此外,乳铁蛋白还可以与许多蛋白质和DNA结合,如酪蛋白、白蛋白、免疫球蛋白A和溶菌酶以及β-乳球蛋白。乳铁蛋白还能与细胞结合,许多细胞如肠细胞、淋巴细胞、血小板和乳房上皮癌细胞及许多微生物细胞外膜中都含有人乳铁蛋白受体。B、乳铁蛋白的抗菌抑毒功能肝细胞病毒(HCV)是一种有囊膜的单链RNA病毒,它可引起慢性肝炎、肝硬化及肝癌。乳铁蛋白可通过结合在肝病毒C的囊膜蛋白上而阻止病毒与靶细胞结合;轮状病毒的基因组是包裹在3层衣壳内的10段不同的RNA片段,乳铁蛋白能阻止病毒吸附于靶细胞上从而防止感染。乳铁蛋白对爱滋病毒(HIV)也有较强的抑制作用。几乎所有的研究都表明乳铁蛋白阻止病毒感染细胞不是在感染后阻止病毒复制,而是直接结合于各类病毒粒子上而阻止其感染靶细胞。乳铁蛋白的另一杀菌方式是通过一种称为乳铁蛋白抗菌肽的多肽来实现的。乳铁蛋白经酸性蛋自酶降解的产物,其抗菌活性要比乳铁蛋白高出20倍,从该降解物中可分离出比乳铁蛋白的抗菌活性高400倍的多肽,这种多肽被称为乳铁多肽素(Lfcin)。此外,乳铁蛋白还能破坏G-菌的外膜,改变胞膜的通透性而导致脂多糖(LPS)的释放,而起到杀菌的作用。C、乳铁蛋白的免疫调节功能乳铁蛋白可以促进中性白细胞或巨噬细胞的杀菌和吞噬作用,对Nk细胞的活性和淋巴细胞、中性白细胞的繁殖具有调节作用。D、乳铁蛋白的的抗氧化功能一些生物还原剂如抗坏血酸的Fe2+或Fe3+盐是脂质氧化诱导剂,乳铁蛋白通过清除环境铁离子,能够控制铁催化的自由基形成反应,抑制铁离子参与的脂质氧化。E、乳铁蛋白的其它功能此外,随着生物工程技术的飞速发展,最近发现乳铁蛋白还具有抗肿瘤细胞的功能。它还具有超强的止痛和镇痛功能。因此,乳铁蛋白是用于开发功能性食品的重要活性物质。具有极高的医用和营养价值,将在生物医疗、营养补充、食品添加等领域有着广阔的应用前景。3、乳铁蛋白的制备及其制品众所周知,乳铁蛋白存在于几乎所有哺乳动物的乳汁中,尤以人初乳含量最高,人乳中的乳铁蛋白含量约为牛初乳的十倍,约占总蛋白的20%。具有很高的提纯利用价值。而其它哺乳动物乳汁的含量就更低了,不具备工业化提纯的可能。尽管哺乳动物乳铁蛋白氨基酸具有相当的同源性,但不同来源的乳铁蛋白在氨基酸序列上还是存在一定的差异,在生物利用的效果上也有很大的差别。目前,从人体初乳中提取分离同源性、高纯度乳铁蛋白的技术,尚未见有报道。
技术实现思路
本专利技术提供一种人体初乳提取物-乳铁蛋白(Lf)提取工艺,其最终目的是为了获得人体初乳乳铁蛋白(Lf)提取物。本专利技术的再一目的在于提供一种乳铁蛋白(Lf)制品。为了达到上述目的,本专利技术采用如下技术方案1、收集健康产妇1~15天内多余初乳,在收集过程中可以采用PH值、比重、感官等检查方法以控制原料质量。2、离心,为了更好地达到除去杂质和脂肪的目的,所述离心步骤可以分为两步,首先在8~12℃下,以600~800r/min的速度离心10分钟左右,以除去杂质;然后在30~40℃下,以2500~3000r/min的速度离心10分钟左右,以除去杂质和脂肪;3、巴氏灭菌,在63.5℃下,经过30min以杀灭微生物和病毒;4、凝乳,可以采用在36℃下以酶发凝乳,也可采用微生物法或离子交换法去除酪蛋白;5、将凝乳后的凝块破碎,可采用在4℃下,以7000r/min的速度离心20分钟左右的方法收集乳清;6、超滤过膜处理,采用孔径300PS、1000PS膜处理以收集乳清透过液;7、真空浓缩;8、冷冻干燥,获得乳铁蛋白(Lf)冻干粉剂。通过本专利技术方法能够获得人体初乳提取物乳铁蛋白(Lf)。所述的一种乳铁蛋白(Lf)制品。包括通过上述方法获得的乳铁蛋白Lf提取物和添加剂,其质量百分比分别为乳铁蛋白Lf提取物15~80%,添加剂15~80%,其中所述添加剂可以是免疫球蛋白、氨基酸、中草药、生物制剂、各类乳品之一或其组合。所述添加剂中,各组分的质量百分比可以是各类乳品0~5%,免疫球蛋白5~80%,氨基酸0~15%,中草药0~15%,生物制剂0~15%。所述的免疫球蛋白可以是IgA、IgG。可以是血清型,也可以是分泌型。所述的氨基酸可以是牛黄酸、十八种人体必需氨基酸之一或其组合。所述的中草药可以是人参、黄芪、芦荟、枸杞子。可以是原药也可以是提取物。所述的生物制剂可以是各类生长因子、双岐或乳酸杆菌、抗生素、抗病毒药物。所述的各类乳品可以是牛初乳粉剂、动植物蛋白粉剂。本专利技术的最终产品的添加剂组方科学合理,针对性强。如免疫球蛋白IgA、IgG,经研究表明与乳铁蛋白协同作用抑菌杀毒效果明显高于单方使用;氨基酸与乳铁蛋白结合运用对提高人体免疫力,增强力量,改善神经传导和视觉功能有重要作用;中草药人参、黄芪、芦荟、枸杞子的原药,特别是从中提取的活性成分与乳铁蛋白组方运用,能显著提高人体自然杀伤细胞(NK)细胞及补体的活性,增强中性白细胞或小吞噬细胞对病毒的吞噬能力及杀灭本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种人体初乳提取无乳铁蛋白Lf的提取工艺,包括以下工艺步骤: 收集健康产妇多余初乳; 离心去杂质、脂肪; 巴氏灭菌; 凝乳,去除酪蛋白; 收集凝乳后的上清液; 超滤过膜处理; 真空浓缩; 冷冻干燥。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:蒋来高,
申请(专利权)人:蒋来高,
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]
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