本发明专利技术涉及一种鞘氨醇单胞菌以及微生物多糖的制备方法，特别是指一种鞘氨醇单胞菌以及采用该菌种生产微生物多糖－三赞胶的方法。它包括将鞘氨醇单胞菌ＣＧＭＣＣＮｏ．１６５０接种到含有碳源的培养液中，添加必要的氮源及营养物质；调节培养液的ｐＨ，进行通气搅拌发酵；将发酵完成后的发酵液用中性盐调节等电点、沉降萃取、脱水后即得微生物多糖－三赞胶等工艺步骤。本发明专利技术解决了现有技术中以有机溶剂作为萃取剂存在的易挥发、安全系数低且成本高，且现有黄原胶产品的水溶液粘度等技术指标均较差的缺点，具有成本低，操作安全，所制备的微生物多糖－三赞胶在粘度、剪切性能值等指标上均达到ＧＢ１３８８６－９２的标准并显著优于现有黄原胶产品等优点，且外观呈纯白色，应用范围广等优点。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种鞘氨醇单胞菌以及微生物多糖的制备方法。
技术介绍
目前以黄原胶为代表产品的微生物多糖，制备过程中是以黄单孢菌属中的维管束黄单孢菌、秋海棠黄单孢菌、野油菜黄单孢菌等菌种为发酵菌种，在提取过程中采用有机溶剂-乙醇作为萃取剂或采取酸提取做为主要提取方法而获得，采用上述菌种的发酵方法制成的成品微生物多糖——黄原胶产品色泽呈黄色或淡黄色，且该产品的水溶液粘度(800cp)、剪切性能值(6.3)及抗温性能均较差，由于其水溶液粘度及剪切性能值等主要技术指标偏低，导致该产品在推广应用过程中存在很大困难。而在发酵后的提取过程中采用有机溶剂和酸作为提取剂，存在着易挥发、使用时安全系数低、成本高等问题，给工业化生产带来很大的安全隐患等问题。
技术实现思路
本专利技术的目的之一在于公开了一种能够发酵生产微生物多糖——三赞胶的鞘氨醇单胞菌，即鞘氨醇单胞菌CGMCCNo.1650。 本专利技术的目的之二是公开了一种以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖三赞胶的方法，以获得水溶液粘度、剪切性能值及抗温性能等主要技术指标上均优于现有黄原胶的微生物多糖三赞胶。同时，在发酵后的提取过程中采用中性盐作为调节等电点的主要手段，使制备过程操作安全、生产成本低。 本专利技术的整体技术构思是本专利技术的中使用的微生物是本专利技术中用于生产生产微生物多糖三赞胶的菌种——鞘氨醇单胞菌Sphingomonas sp.即为具有生产微生物多糖——三赞胶能力的菌种，该菌种已于2006年3月14日提交中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCCNo.1650。 该菌种的DNA序列测定结果为 TGCAGTCGAACGAGACCTTCGGGTCTAGTGGCGCACGGGTGCGTAACGCGTGGGAATCTGCCCTTGGGTTCGGAATAACTCAGAGAAATTTGAGCTAATACCGGATGATGTCGAGAGACCAAAGATTTATCGCCCAGGGATGAGCCCGCGTAGGATTAGCTAGTTGGTGAGGTAAAGGCTCACCAAGGCGACGATCCTTAGCTGGTCTGAGAGGATGATCAGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATAATGGACAATGGGCGCAAGCCTGATCCAGCAATGCCGCGTGAGTGATGAAGGCCCTAGGGTTGTAAAGCTCTTTTACCCGGGATGATAATGACAGTACCGGGAGAATAAGCCCCGGCTAACTCCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGGAGGGGGCTAGCGTTGTTCGGAATTACTGGGCGTAAAGCGCACGTAGGCGGCTTTGTAAGTTAGAGGTGAAAGCCTGGAGCTCAACTTCAGAATAGCCTTTAAGACTGCATCGCTTGAATCCAGGAGAGGTGAGTGGAATTCCGAGTGTAGAGGTGAAATTCGTAGATATTCGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTCACTGGACTGGTATTGACGCTGAGGTGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGATAACTAGCTGTCCGGGCACTTGGTGCTTGGGTGGCGCAGCTAACGCATTAAGTTATCCGCCTGGGGAGTACGGTCGCAAGATTAAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCTGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGCAGAACCTTACCAGCGTTTGACATGGCTAGTATGGGTCTCAGAGATGGGGTCCTTCAGTTCGGCTGGCTAGCACACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTCGCCTTTAGTTACCATCATTTGGTTGGGTACTCTAAAGGAACCGCCGGTGATAAGCCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAGTCCTCATGGCCCTTACGCGCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGCAACTACAGTGGGCTGCGAACTCGCGAGGGTGAGCTAATCTCCAAAAGTTGTCTCAGTTCGGATTGTTCTCTGCAACTCGAGAGCATGAAGGCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCAGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGGGAGTTGGTTTCACCCGAAGGCAGTGCGCTAACCGCAAGGAGGCAGCTGACCACGGTGATCAGCGTCGG上述菌种具有如下表中所描述的细胞形态和理化特性本专利技术中利用鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖——三赞胶的方法，包括如下工艺步骤 A、将鞘氨醇单胞菌CGMCCNo.1650接种到含有碳源的培养液中，添加必要的氮源及营养物质；B、调节培养液的pH，进行通气搅拌发酵；C、将发酵完成后的发酵液用可溶性中性盐调节等电点、沉降萃取、脱水后即得微生物多糖三赞胶。 步骤C包括a、将发酵完成后的发酵液调节等电点，调PH值为4.5-5.5，并搅拌均匀；b、在a步骤中制得的发酵液中加入可溶性中性盐进行沉降萃取得到纤维状的微生物多糖；c、将b步骤中制得的生物多糖进行脱水，并用强碱弱酸盐或二价碱调节其PH值为6.5-7.5后干燥、粉碎制成微生物多糖三赞胶。强碱弱酸盐优选碳酸钠、碳酸钾，二价碱优选选用氢氧化镁、氢氧化钙。其中的脱水设备选用螺旋挤压脱水机，脱水过程中螺旋挤压脱水机的转速为10-15转/分钟。 步骤a中调节发酵液的PH值选用乙酸；步骤b中所述的可溶性中性盐为硫酸盐、硝酸盐、氯化物中的一种的水溶液，其中优选氯化钠、硝酸钠、硫酸钠。 步骤A、B中所述的培养液中的碳源选自葡萄糖或蔗糖中的一种或其混合物。培养液中包括下列重量份的组分葡萄糖20-30 蔗糖10-20 硝酸钠2.5-4 硫酸镁0.5-1磷酸二氢钾1.5-2.5 碳酸钙1-1.5 水941-965培养液的pH为7.0-7.2。 发酵条件为通风量0.2-0.5vvm，搅拌转速120-160转/分钟，培养温度35-40℃，发酵周期为60-70小时。 步骤B的发酵过程中采用裴林氏法检测还原糖≤0.02％，采用甲醛法检测氨基氮≤0.02％时为发酵终点。 将鞘氨醇单胞菌CGMCCNo.1650经过扩大培养后，按照种子液培养液为7％-10％的接种量接种于培养液中。 扩大培养包括 (1)将鞘氨醇单胞菌CGMCCNo.1650接种于试管中的斜面培养基表面制成斜面菌种；(2)将斜面菌种经扩大培养后制成种子液；(3)将制成的种子液按种子液培养液为7％-10％的接种量接入发酵罐中的培养液，进行发酵。 步骤(1)中制备斜面菌种的工艺条件是温度36-38℃、培养时间为6本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种鞘氨醇单胞菌ＣＧＭＣＣＮｏ．１６５０。
【技术特征摘要】
1.一种鞘氨醇单胞菌CGMCCNo.1650。2.一种以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖——三赞胶的方法，其特征在于该方法包括如下工艺步骤A、将鞘氨醇单胞菌CGMCCNo.1650接种到含有碳源的培养液中，添加必要的氮源及营养物质；B、调节培养液的pH，进行通气搅拌发酵；C、将发酵完成后的发酵液用可溶性中性盐调节等电点、沉降萃取、脱水后即得微生物多糖三赞胶。3.根据权利要求2所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖——三赞胶的方法，其特征在于所述的培养液中的碳源选自葡萄糖或蔗糖中的一种或其混合物。4.根据权利要求2或3所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖——三赞胶的方法，其特征在于所述的培养液中包括下列重量份的组分葡萄糖20-30 蔗糖10-20 硝酸钠2.5-4 硫酸镁0.5-1磷酸二氢钾1.5-2.5 碳酸钙1-1.5 水941-9655.根据权利要求2所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖——三赞胶的方法，其特征在于所述的培养液的pH为7.0-7.2。6.根据权利要求2所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖——三赞胶的方法，其特征在于所述的将鞘氨醇单胞菌CGMCCNo.1650经过扩大培养后，按照种子液培养液为7％-10％的接种量接种于培养液中。7.根据权利要求2所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖——三赞胶的方法，其特征在于所述的发酵条件为通风量0.2-0.5vvm，搅拌转速120-160转/分钟，培养温度35-40℃，发酵周期为60-70小时。8.根据权利要求6所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖——三赞胶的方法，其特征在于所述的扩大培养包括(1)将鞘氨醇单胞菌CGMCCNo.1650接种于试管中的斜面培养基表面制成斜面菌种；(2)将斜面菌种经扩大培养后制成种子液；(3)将制成的种子液按种子液培养液为7％-10％的接种量接入发酵罐中的培养液，进行发酵。9.根据权利要求2所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖——三赞胶的方法，其特征在于所述的步骤C包括a、将发酵完成后的发酵液调节等电点，调PH值为4.5-5.5，并搅拌均匀；b、在a步骤中制得的发酵液中加入可溶性中性盐进行沉降萃取得到纤维状的微生物多糖；c、将b步骤中制得的生物多糖进行脱水，并用强碱弱酸盐或二价碱调节其PH值为6.5-7.5后干燥、粉碎制成微生物多糖三赞胶。10.根据权利要求8所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖——三赞胶的方法，其特征在于所述的步骤(1)中制备斜面菌种的工艺条件是温度36-38℃、培养时间为...
【专利技术属性】
技术研发人员：张国沛，
申请(专利权)人：张国沛，
类型：发明
国别省市：13[中国|河北]
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