文王一支笔提取物及其在制备抗癌药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供一种文王一支笔提取物，该提取物为文王一支笔经水提取后再经醇沉处理所得到的醇溶物部位的提取物或文王一支笔经水提取后再经醇沉处理得到的上清液经醋酸乙酯萃取后得到醋酸乙酯部位的提取物或文王一支笔经水提取后再经醇沉处理得到的沉淀物经醇洗涤干燥后得到水提醇沉部位的提取物，本发明专利技术将其应用于制备治疗卵巢癌的药物上。实验表明在体外均能剂量依赖性抑制卵巢癌A2780及SKOV3细胞的生长；在体内均能明显抑制A2780裸鼠移植瘤的生长，具有较好的效果。

A pen Wang extract and its application in anti-cancer medicine preparation

The invention provides a Wenwang pen extract, the extract as a pen Wang was extracted by water and precipitated by ethanol after treatment by alcohol soluble part of the extracts or a pen Wang with water extraction followed by ethanol precipitation obtained by ethyl acetate extraction by ethyl acetate fraction extract or a king pen with water extraction followed by ethanol precipitation treatment obtained precipitate by alcohol washing and drying to obtain the extract of water extraction and alcohol precipitation of parts, the invention will be applied to the preparation of the drug for the treatment of ovarian cancer. The results showed that both in vitro and in vitro could inhibit the growth of ovarian cancer A2780 and SKOV3 cells in vivo, and all of them could significantly inhibit the growth of transplanted A2780 tumor in nude mice, and had a good effect.

【技术实现步骤摘要】
文王一支笔提取物及其在制备抗癌药物中的应用
本专利技术提供一种文王一支笔的多种提取物，并将该提取物应用于治疗卵巢癌的疾病的药物上。
技术介绍
一直以来，恶性肿瘤是一类严重威胁人类健康的常见病、多发病。据2015年CA期刊在《2012全球癌症统计》的统计数据，2012年全球约有1.41千万新发癌症病例，820万患者死于癌症。卵巢癌是危害广大妇女健康最常见的恶性肿瘤之一，其发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌，但因卵巢癌致死者，却占各类妇科肿瘤的首位，对妇女生命造成严重威胁。卵巢癌早期症状不典型，早期诊断较困难；另外，卵巢癌具有很强的侵润和转移能力，因此卵巢癌患者生存率很低，5年存活率约为50％。卵巢癌的传统治疗方法以手术、化疗为主，但患者生存率仍不理想。卵巢癌仍然是全球女性死亡的一个主要疾病。因此，进一步研究和开发相应的新的卵巢癌治疗药物，具有重要的理论和现实意义。近年来，随着自然科学的发展，卵巢癌等恶性肿瘤的临床与基础研究取得了可喜的成就，形成了手术治疗、放化疗、分子靶向治疗、中医药治疗等多种治疗方式。其中，中医药治疗体系中以中草药治疗卵巢癌的疗效受到越来越多的专家学者和临床医学的肯定。中草药种类繁多，功效各异，如扶正培本药、祛邪攻毒药等，这类中草药在卵巢癌的治疗过程中意义重大。目前国内外有文献报道了灵芝粉、莪术油、鸦胆子油乳、蝎毒多肽、银莲花素、威灵仙多糖等中草药及其有效组分，可分别通过不同的作用机制来发挥抑制卵巢癌细胞增殖并诱导其凋亡等抗作用。中药复方制剂如艾迪注射液、康艾注射液等，以及中药联合化学药物用于应用于卵巢癌的治疗手段，也在临床上得到了极大的推广和应用。然而，迄今为止，中草药尚未在国内外成为治疗卵巢癌等恶性肿瘤的首选药物，现有临床中草药的抗癌疗效有待进一步提高，发现、筛选和研发中草药抗癌药物是目前治疗卵巢癌等恶性肿瘤的一项重要研究任务。我国药用植物资源丰富，尚有很大部分的中药和民间草药亟待研究，从这些植物中寻找高效低毒的抗癌药物是近几来研究的热点之一。文王一支笔又称鹿仙草、鸡心七，回春草，不老草，顶天柱等，属蛇菰科蛇菰属草本寄生植物；主要分布于亚洲、大洋洲的热带、亚热带地区；在我国主要分布于云南、四川、广东、江西、湖南、湖北及贵州等省区。该植物全株入药，是土家族、少数民族民间著名中草药，有清热解毒、止血、镇痛及消炎之功效，民间用以治疗外伤出血、胃病、痔疮及月经不调等疾病，疗效奇佳。我们在长期挖掘传统中医药的宝库中发现一些具有较好防治卵巢癌等恶性肿的中草药，本专利技术是其中之一，主要内容是发现文王一支笔的醇溶物(Frs)、水提醇沉部位(Frp)以及醋酸乙酯部位(Fre)在体内外均对卵巢癌有良好的抑制作用。
技术实现思路
文王一支笔系湖北土家族民间对蛇菰科蛇菰属药用植物筒鞘蛇菰BalanophoraInvolucrata及其他近似种，数种草本寄生植物来源的民间草药的称呼，因其外形像一支支毛笔而得名，被列为土家族四大名药之一。据《中国植物志》记载，蛇菰科植物均为一年生或多年生肉质草本，无正常根，靠根茎上的吸盘寄生于寄主植物的根上。本科植物共计18属约120种，分布于全世界热带至亚热带，我国产2属20种。其中蛇菰属Balanophora以花柱1枚；胚珠悬垂，倒生，花序无盾状鳞片；花茎有鳞苞片；根茎内含大量的蜡质物(蛇菰素)为特征，我国产19种，包括日本蛇菰B.japonica，印度蛇菰B.indica，粗穂蛇菰B.dioica，思茅蛇菰B.simaoensis，隐轴蛇菰B.cryptocaudex，长枝蛇菰B.elongata，彩丽蛇菰B.splendida，杯茎蛇菰B.subcupularis，海南蛇菰B.kainantensis，多蕊蛇菰B.polyandra，皱球蛇菰B.rugosa，疏花蛇菰B.laxiflora，穂花蛇菰B.spicata，筒鞘蛇菰B.involucrata，川藏蛇菰B.fargesii，红冬蛇菰B.harlandii，宜昌蛇菰B.henryi，红烛蛇菰B.mutinoides和鸟黐蛇菰B.tobiracola。《中华本草》中记载，粗穂蛇菰B.dioica的全草作鹿心草，红冬蛇菰B.harlandii的全草作葛蕈，筒鞘蛇菰B.involucrata的全草作寄生黄，疏花蛇菰B.laxiflora的全草作鹿仙草，红烛蛇菰B.mutinoides的全草作深山不出头，多蕊蛇菰B.polyandra的全草作通天蜡烛，穂花蛇菰B.spicata全草作穂花蛇菰。根据我们对蛇菰属药用植物在湖北、四川、云南、广西等地的调查，认为它们作为药材的外观性状均相似，虽然各地对其习称有别，但民间应用相近。国内外相关研究的文献报道进一步指出，已有研究的各种蛇菰属药用植物之间的主要成分差异不大，均以松柏苷、甲基松柏苷等苯丙素类，蛇菰素A、蛇菰素B等三萜及甾类化学成分为主。为此，我们推定作为文王一支笔药材来源的蛇菰属各近似种之间具有类似的药理活性。本专利技术研究所采用的文王一支笔药物采集于湖北省十堰市大庙乡，经鉴定为筒鞘蛇菰BalanophoraInvolucrata的全草。采挖后除去泥土、杂质，切片后阴干。针对上述技术问题，本专利技术提供一种文王一支笔的不同种的提取物，具体如下：文王一支笔提取物，该提取物为文王一支笔经水提取后再经醇沉处理所得到的醇溶物部位的提取物(Frs)。文王一支笔提取物，该提取物为文王一支笔经水提取后再经醇沉处理得到的上清液经醋酸乙酯萃取后得到醋酸乙酯部位的提取物(Fre)。文王一支笔提取物，该提取物为文王一支笔经水提取后再经醇沉处理得到的沉淀物经醇洗涤干燥后得到水提醇沉部位的提取物(Frp)。具体药物提取与制备取文王一支笔药材，切碎或碾碎后，用水作为溶剂，加热回流提取，提取次数为1～3次，每次0.5～3小时，每次溶剂用量为药材重量的6～15倍，滤过，提取液加收溶剂，浓缩后过滤并定容。此时药液在室温下的相对密度为1.05～1.15。取上述药液，于40～70℃保温和搅拌条件下，逐步加入80％～95％乙醇或工业酒精，使药液体系最终含醇浓度为30％～70％。随后于常温或低温(4～10℃)条件下静置12～36小时，分离上清液与沉淀物。取出部分上清液，经减压回收乙醇后，浓缩干燥，得到醇溶物(Frs)。取剩余的上清液，经减压回收乙醇后，加温水使之分散，并以醋酸乙酯进行萃取，萃取次数为1～4次，合并各次的醋酸乙酯萃取层，经减压回收溶剂后，浓缩干燥，得到醋酸乙酯部位(Fre)。取出水提醇沉中的沉淀物，以80％～95％乙醇或工业酒精洗涤数次后，尽量去除乙醇，干燥后得到水提醇沉部位(Frp)。本专利技术将所述的文王一支笔醇溶物部位的提取物在制备治疗卵巢癌的药物上的应用。或将所述的文王一支笔醋酸乙酯部位的提取物在制备治疗卵巢癌的药物上的应用。或将所述的文王一支笔水提醇沉部位的提取物在制备治疗卵巢癌的药物上的应用。本专利技术所述的文王一支笔醇溶物部位的提取物、文王一支笔醋酸乙酯部位的提取物或文王一支笔水提醇沉部位的提取物的使用质量分数为0.1-10％。文王一支笔各提取物，尤其是从水提取物中制备得到的醇溶物(Frs)、水提醇沉部位(Frp)及醋酸乙酯部位(Fre)在体外均能剂量依赖性抑制卵巢癌A2780及SKOV3细胞的生长本文档来自技高网...

【技术保护点】
文王一支笔提取物，该提取物为文王一支笔经水提取后再经醇沉处理所得到的醇溶物部位的提取物。

【技术特征摘要】
1.文王一支笔提取物，该提取物为文王一支笔经水提取后再经醇沉处理所得到的醇溶物部位的提取物。2.文王一支笔提取物，该提取物为文王一支笔经水提取后再经醇沉处理得到的上清液经醋酸乙酯萃取后得到醋酸乙酯部位的提取物。3.文王一支笔提取物，该提取物为文王一支笔经水提取后再经醇沉处理得到的沉淀物经醇洗涤干燥后得到水提醇沉部位的提取物。4.权利要求1-3任一项所述的文王一支笔提取物，所述的醇提取为乙醇或甲醇提取，所述的乙醇或甲醇的为体积分数为80-95%的乙醇或甲醇。5.权利要求3所述的文王一支笔...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁成福，何毓敏，刘正泰，
申请(专利权)人：三峡大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42