叠加式通气培养铁皮石斛胚状体及其干粉工艺制造技术

本发明专利技术公开了利用叠加式工厂化生产铁皮石斛胚状体及其干粉的工艺流程和技术。该发明专利技术克服了高等植物组织培养走出实验室向工厂化生产转化中，易污染，种子成本高，生产速度慢的难关；用该工艺流程使铁皮石斛“比生物生长速率”达到８．４～９．２毫克／克.天。用该工艺生产出的铁皮石斛胚状体干粉，铁皮石斛多糖含量达到１６％以上，且多糖含量稳定，遗传稳定性可靠，生物活性高。生产周期短（十天收获一次）。年产干品达到吨位水平。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
适合工厂化生产铁皮石斛胚状体的筛选程序。该工艺包括下列：Ａ．起始胚状体的诱导：将采集的原生植株茎段经灭菌后，在超净台上，切取带节的切段，每段含一个节。节上下保留０．５公分，以便减少污染利于成功。每个１５０毫升三角瓶中 装５０毫升的固体培养基，每瓶插一段。４０～５０天后形成起始胚状体。Ｂ．起始胚状体的扩增：将黄豆粒大小的胚状体“球”，小心地剥离外植体，移到增值培养基上，每瓶放三个点呈等边三角形，以利于形成条件培养基，达到快速增值的目的。 Ｃ．适合工厂化生产要求的胚状体筛选：将固体培养基上扩增获得胚状体，按５％（ｗ／ｗ）接种量，接种到液体培养基中，放在回转式，９０转／分。摇床上进行悬浮培养，保持室内自然光照，２９℃±１；每七天继代一次；经３～４次继代后，不间断地进 行挑选那些保持圆球状、生长密集、浅绿色的胚状体“球”。淘汰那些长成丛芽状或芽簇壮的培养物，使培养物一直保持在形态上的一致性和年轻态，以利于提高“比生物生长速率”满足于工厂化生产。这样的培养物最终能保证“固液比”和鲜品的得干率（１０％以上），最终获得较好的生产率。Ｄ．叠加式通气悬浮培养铁皮石斛胚状体的工艺流程。该工艺流程专门针对高等植物在实验室水平规模转向工厂化规模转化而设计的。高等植物工厂化悬浮培养中污染关，种子成本大，培养周期长，三大难关。该工艺的特点是，采 用小容量，一对一接种，分级连续培养种子，分级收集终端成品，最大培养容器体积为１至１００升；每个独立培养单位含１０至１００个培养容器。在培养温室内（２０Ｃ－３２Ｃ）设２０－２００个培养单位。按此叠加式培养方式，日产量为１公斤至２０００公斤。　　经该工艺流程生产的铁皮石斛多糖，无论在任何一级收获的成品，其多糖含量都达到１６％以上，与原生植株含量相似或相等，且成品质量相对稳定。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：曹兴华，
申请(专利权)人：曹兴华，马兴凯，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]