一种人卵母细胞的贮存方法技术

技术编号:1738613 阅读:296 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
一种人卵母细胞的贮存方法,其特征在于:先把人卵母细胞放在含有蔗糖(Sucrose)和1,2丙二醇(PROH)的冷冻保护液里进行预处理,再进行程序化的缓慢降温冷冻,然后贮存于液氮中;在需要使用时,使该人卵母细胞快速升温复苏,再将已解冻复苏的该人卵母细胞放入序贯培养液中,置入37±0.2℃、5%~6%CO↓[2]浓度的孵箱内进行培养,以供体外受精。该方法能够提高人卵母细胞冻存后的存活率,操作简便,所需医用仪器和溶液简单、价廉,成本低、复苏率高,有利于解决人类不孕问题和计划生育国策的贯彻执行。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种人卵母细胞的贮存方法,先把人卵母细胞放在含有蔗糖(Sucrose)和1,2丙二醇(PROH)的冷冻保护液里进行冷冻预处理,再进行程序化的缓慢降温冷冻,然后在液氮中进行低温贮存;在需要使用时,使该人卵母细胞快速升温解冻并使其复苏;再将已解冻复苏的该人卵母细胞放入序贯培养液中,置入37±0.2℃、5%~6%二氧化碳浓度的孵箱内进行复苏后培养,以供体外受精;其特征在于所述方法包括下列具体操作步骤:A、冷冻预处理:取卵之后,先经2-3小时的孵育,去除人卵母细胞周围卵丘组织 ,再将该人卵母细胞放在冷冻保护液里进行冷冻处理;B、程序降温冷冻和低温贮存:将预处理后的人卵母细胞装入麦管中,放入程序冷冻仪中,进行程序化缓慢降温冷冻;当温度达到设定的低温值时,并稳定10-20分钟之后,将该人卵母细胞移入液氮中低温 贮存,以供复苏备用;C、快速升温解冻:从液氮中取出贮存有该人卵母细胞的麦管,先后放在室温空气中和30±3℃的水中,使之迅速升温;再将麦管擦干、剪开,取出该人卵母细胞,再顺序地放入不同的解冻复苏处理液中复苏;D、复苏后培养:将 已解冻复苏的该人卵母细胞放入序贯培养液中,置入37±0.2℃、5%~6%CO↓[2]浓度孵箱内进行培养,以供体外受精。...

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员:李晓红
申请(专利权)人:北京大学第一医院
类型:发明
国别省市:11[中国|北京]

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