【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种神经干细胞三维立体培养体外扩增的方法，它包括：选择具有三维立体环境的多孔微载体；对微载体进行预处理，其特征在于：它还包括以下步骤：（１）将含有４０－６０ｎｇ／ｍｌ的碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）、４０－６０ｎｇ／ｍｌ表皮细胞 生长因子（ＥＧＦ）和Ｂ２７的ＤＭＥＭ／Ｆ１２神经干细胞无血清培养液包被上述的微载体，使促进细胞分裂的碱性成纤维细胞生长因子和表皮细胞生长因子均匀地渗透于微载体内；（２）将上述处理好的微载体放入细胞培养瓶内，加入上述神经干细胞无血清培 养液，然后在培养瓶加入１×１０↑［５］－１×１０↑［６］个神经干细胞，混合均匀后，再充入含有５％浓度的二氧化碳气体，并在３７℃左右的恒温下进行培养，根据细胞的增殖情况，每５－７天更换神经干细胞无血清培养液；（３）将长满神经干细胞的微 载体从培养瓶中取出，放入含有０．０５％胰蛋白酶的Ｄ－ｈａｎｋ’ｓ缓冲液中，在室温下消化１０－３０分钟，去除微载体，漂洗细胞，得到神经干细胞。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：蔡哲，潘琳，张岚，舒峻，房青，
申请(专利权)人：中日友好医院，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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