紫花苜蓿解旋酶基因及其克隆与应用制造技术

技术编号:1737601 阅读:225 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及紫花苜蓿解旋酶基因的克隆、重组及耐逆功能分析与应用,属于分子生物学和生物技术领域。从紫花苜蓿中提取总RNA,然后将1微克总RNA反转录成cDNA。根据已公布的EST序列设计一对特异引物,进行常规聚合酶链式反应(PCR),PCR产物连接到pGEM-T Easy载体上,转化大肠杆菌DH5α,进行序列测定。然后构建表达载体pBI221和PBI121分别转化洋葱表皮和模式植物拟南芥。洋葱表皮亚细胞定位表明该基因所编码的蛋白质定位在细胞核内。表达MH1基因的转基因拟南芥植株具有较高的耐旱、耐盐和抗氧化胁迫能力。因此,该基因转化苜蓿等双子叶作物,将会改善其耐逆能力,提高其产量和品质,从而可以在淡水资源严重匮乏的西部地区以及盐碱地较多的滨海地区大面积推广种植,具有巨大的经济效益和社会效益。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种紫花苜蓿解旋酶基因MH1,其特征在于它具有下述所示的序列: 1 CTCGTCTCTC AACCAAACCT TCTTCCTTTT CATCTCGGCG GCGATGGCGA CAGCTTCTGT 60 61  GGTTCCGGCG AATCGCCGAC GAACGGTTAC GGCCAACGAG GACATGGATT TTGAAACAAC 120 121 CGAAGGCGTG AAAGCAATCG GAAGCTTCGA  AGAGATGGGG ATAAAAGACG ATTTGCTTCG 180 181 TGGAATCTAC AATTACGGAT TTGAGAAACC GTCTGCGATT CAACAGCGTG CGGTTGCGCC  240 241 GATTATTCAG GGAAGAGATG TTATTGCTCA GGCGCAATCT GGTACTGGAA AGACTTCGAT 300 301 GATTGCTTTG ACGGTTTGTC  AGGTTGTTGA TACATCCGTC AGAGAGGTGC AAGCTTTAAT 360 361 TGTGTCTCCG ACAAGAGAAC TGGCCTCACA GACTGAGAAA GTTATATTGG  CAATTGGGGA 420 421 TTATATCAAT ATACAAGCCC ATGCTTGCAT TGGAGGGAAA AGTGTGGGAG AAGACATTAG 480 481 AAAACTTGAG  CATGGAGTTC ATGTCGTGTC TGGAACTCCT GGCCGAGTCT GTGACATGAT 540 541 AAAGAGGAGA ACATTGCGCA CCAGGGCCAT CAAGTTACTA  GTTCTGGATG AATCTGATGA 600 601 AATGTTGAGC AGAGGGTTTA AAGATCAGAT TTATGATGTG TACAGATATC TCCCACCGGA 660 661  TCTTCAGGTT TGCCTGATTT CTGCTACGCT ACCTCATGAA ATTCTGGAGA TGACAAAC...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张宪省高新起罗琰
申请(专利权)人:山东农业大学
类型:发明
国别省市:37[中国|山东]

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