大肠杆菌-分枝杆菌穿梭载体质粒及其在制备病原微生物疫苗中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种适宜分泌表达病原微生物抗原的大肠杆菌－分枝杆菌穿梭载体质粒以及其在制备病原微生物疫苗中的应用。本发明专利技术所述的大肠杆菌－分枝杆菌穿梭载体质粒，是以大肠杆菌－分枝杆菌穿梭载体质粒ｐＢＣＧ－２０００为基础构建的；插入经改造的序列为ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．１的结核分枝杆菌热休克蛋白６０启动子调控序列；插入人工合成的序列为ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．２的Ｔ４转录终止序列；插入经改造的序列为ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．３的卡介苗抗原基因８５ｂ的信号肽序列；添加序列为ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．４的人工合成序列。本发明专利技术所述的大肠杆菌－分枝杆菌穿梭载体质粒，可应用于抗弓形虫、抗ＳＡＲＳ冠状病毒以及抗结核杆菌的重组疫苗研究。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种适宜分泌表达病原微生物抗原的大肠杆菌－分枝杆菌穿梭载体质粒，其特征在于：是以大肠杆菌－分枝杆菌穿梭载体质粒ｐＢＣＧ－２０００为基础构建的；　在ｐＢＣＧ－２０００的多克隆位点的ＳａｃｌⅠ和ＸｂａⅠ酶切位点之间插入经改造的序列为ＳＥＱ 　ＩＤ　ＮＯ．１的结核分枝杆菌热休克蛋白６０启动子调控序列；　在ｐＢＣＧ－２０００的多克隆位点的ＫｐｎⅠ酶切位点插入人工合成的序列为ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．２的Ｔ４转录终止序列；　在ｐＢＣＧ－２０００的多克隆位点的ＸｂａⅠ和 ＢａｍＨⅠ酶切位点之间插入经改造的序列为ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．３的卡介苗抗原基因８５ｂ的信号肽序列；　在Ｔ４转录终止序列前添加序列为ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．４的人工合成序列，引入多酶切位点。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：吴少庭，秦莉，甘燕，袁仕善，刘洪波，王芳，李俊华，
申请(专利权)人：深圳市疾病预防控制中心，吴少庭，
类型：发明
国别省市：94[中国|深圳]