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微生物细胞的固定化方法技术

技术编号:1736389 阅读:214 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术提出一种微生物细胞的固定化方法。是采用聚乙烯醇作载体包埋微生物细胞,并使用成型剂使包埋微生物细胞成型后定型,制备出外形为规则珠状的凝胶态固定化微生物细胞。本发明专利技术的特点是载体价格便宜,成型剂可重复使用,制备工艺操作简便,稳定性高,外形规则的成品使用方便,机械强度优良。本发明专利技术可以广泛应用于医药工业和食品饮料工业,改进传统的发酵工艺。(*该技术在2005年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种。以前的微生物细胞固定化方法一般是用胶类作为载体。例如明胶、琼脂、果胶、海藻胶等。中国科学院微生物研究所等单位制备的生产6-氨基青霉素烷酸(简称6-APA)的固定化大肠杆菌细胞,就是采用琼脂作载体,结合戊二醛处理的方法,如《微生物学报》1980年20卷4期文章所述。该方法最大的缺点是所得的固定化细胞酶活性低,只有2u/克固胞。因而应用于生产时效率低,直接影响到生产6-APA的产量及质量,并且其固定化细胞的机械强度较差,降低了使用效果和寿命。近年来有人提出用聚乙烯醇(PVA)作为载体固定微生物细胞制备酒精,例如日本特许出愿公开昭57-138390、昭57-198088。但他们制备固定化微生物细胞需在模具中成形,固定化后脱模,使用时要用机械方法破碎。因而使用起来很不方便,而且破碎后不均匀、不规则的形状会影响使用效果,特别是当用于反应器中时。本专利技术的目的就是为了解决上述方法存在的缺点。用新的方法制备出固定化微生物细胞,并使之具有酶活性高、机械强度好、外形为规则珠状,适宜于在反应器中长期使用等优点。本专利技术采用聚乙烯醇作为包埋微生物细胞的载体,用成形剂成形,低温冷冻定形的方案。成形剂选用油脂类物质,以植物油或矿物油为佳。制备工艺是,首先把制备好的聚乙烯醇溶液与微生物细胞混合均匀,可用浓度在10%~20%之间的PVA溶液,微生物细胞与聚乙烯醇溶液的重量比选择在1∶1至9范围内。然后在细胞-聚乙烯醇混合物中加入成形剂,并充分搅拌,使之分散成珠状,细胞-聚乙烯醇混合物与成形剂的重量比可以是1∶0.5至2。再将已成形的包埋微生物细胞在一定温度下放置一段时间定形,一般需要在-10℃至-40℃温度条件下保留8~20小时即可。待定形后即可除去成形剂,成形剂可回收以备重复使用,最后可经后处理,例如清洁处理等,则得到形状规则的珠状凝胶态成品固定化微生物细胞。实施例用本专利技术可制备工业上用于生产6-APA的固定化大肠杆菌细胞。原料的配比浓度15%的PVA溶液 10克大肠杆菌细胞 10克菜籽油 20克制备条件温度 -20℃时间 12小时结果所得固定化细胞外形为规则珠状凝胶态,酶活性为8u/克固胞,机械强度良好。本专利技术可以应用于医药工业和食品饮料工业,改进传统的发酵工艺。本专利技术的特点是,用聚乙烯醇作载体价格便宜,成形剂可重复使用,因而成本低廉。制备工艺方法操作简便,稳定性高。制备出的固定化大肠杆菌细胞酶活达到8u/克固胞,可以生产出浓度较高的6-APA转化液,从而提高了生产效率。成品固定化微生物细胞外形为规则珠状凝胶态,使用方便,机械强度优良,长期在较高温度和压力条件下使用无破裂。特别适于工业上在柱反应器中使用。本文档来自技高网...

【技术保护点】
用聚乙烯醇(PVA)作载体包埋微生物细胞的固定化方法,其特征是使用了成形剂,所用的成形剂是油脂类物质。并用低温冷冻法定形。

【技术特征摘要】
1.用聚乙烯醇(PVA)作载体包埋微生物细胞的固定化方法,其特征是使用了成形剂,所用的成形剂是油脂类物质。并用低温冷冻法定形。2.如权利要求1所说的固定化方法,其特征是所说的油脂类物质是植物油或者矿物油。3.如权利要求1、2所说的固定化方法,其特征是把微生物细胞与制备好的聚乙烯醇溶液混合后,在细胞-聚乙烯醇混合物中加入成形剂充分搅拌,使之成形为珠状,然后在一定温度下放置一段时间使之定形,...

【专利技术属性】
技术研发人员:李有福张坐奎张叔渊
申请(专利权)人:四川大学
类型:发明
国别省市:51[中国|四川]

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