溶菌酶生产方法技术

一种以柞蚕蛹为原料生产溶菌酶的生产方法。柞蚕蛹含有丰富的溶菌酶，经人工诱导后提高酶活力１０倍以上。收集蛹血、加热、直接用ＤＥＡＥ—纤维素及甲壳质包裹纤维素柱层析，洗脱后真空浓缩，透析，真空干燥而得到产品，酶的回收率高。有关纤维素可再生使用，本方法的工艺可与蚕蛹综合利用的其他工艺（如提取蛹蛋白等）相衔接。（*该技术在2009年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

【技术保护点】
溶菌酶的生产方法：其特征在于以削茧后完好的蚕蛹为原料，于蚕蛹中注射大肠杆菌Ｅ.ＣｏｌｉＫ↓〔１２〕Ｄ↓〔３１〕或ＨＢ↓〔１０１〕，剂量为１０↑〔８〕菌／ｍｌ，５０μｌ／头，在２５℃下放置７２小时以上，或将蚕蛹置５０～５５℃热空气箱内３０～６０分钟，在２５℃下放置４８～７２小时，或将蚕蛹浸入流水中，用频率２０～２２仟赫兹，功率１５０瓦超声波处理５～１０分钟，于２５℃放置７２－９６小时，将人工诱导后的蚕蛹刺破收集蛹血，蛹血中加入０．０２～０．０５％苯基硫脲，在水浴中快速搅拌加热至６０℃，速冷至室温，离心除蛋白，上清液即溶菌酶组分，用０．１Ｍ磷酸盐调整至ｐＨ８．０，将溶菌酶组分注入经用碱性溶液充分饱和后的ＤＥＡＦ－－纤维素柱内作层析分离，离子交换完成后，用０．１Ｍ，ｐＨ８．０磷酸盐缓冲液洗脱溶菌酶组分并注入经用０．１Ｍ，ｐＨ８．０磷酸盐缓冲液充分饱和后，再用无离子水洗至微碱性（ｐＨ７．２）的甲壳质包裹纤维素柱内作亲和层析，用０．１Ｍ，ｐＨ２～２．５乙酸盐缓冲洗脱溶菌酶组分，洗脱后的溶菌酶组分真空浓缩、干燥。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：黄自然，陈夙珍，姚汝华，吕建秋，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]