两种基于pBV220载体的新型载体制造技术

本发明专利技术包括两种基于ｐＢＶ２２０的原核高效表达载体，采用ＰＲＰＬ启动子，一个是在表达产物的氨基端携带有６组氨酸，便于对表达产物的快速纯化；另一个是在ｐＢＶ２２０载体上克隆入四环素抗性基因，通过建立外源基因的５′端随机序列库，依靠四环素抗性筛选出高表达菌株。本发明专利技术对目的产物的快速纯化和解决表达产物低的问题有重要的意义。（*该技术在2016年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种基于原核高效ｐＢＶ２２０载体的能够快速纯化产物的载体，其特征在于两段人工合成的寡核苷酸序列分别为：（１）　５′ＡＡＴ　ＴＡＡ　ＡＴＧ　ＣＡＴ　ＣＡＴ　ＣＡＣ　ＣＡＴ　ＣＡＴ　ＣＡＣ　ＧＡＡＴＴＣ　ＴＣＧ　ＡＧ　３′（２）　５′ＧＡＴ　ＣＣＴ　ＣＧＡ　ＧＡＡ　ＴＴＣ　ＧＴＧ　ＡＴＧ　ＡＴＧ　ＧＴＧ　ＡＴＧＡＴＧ　ＣＡＴ　ＴＴ　３′（３）密码子和碱基选择、质粒组建过程见附图１。２．一种基于原核高效ｐＢＶ２２０载体的筛选高表达克隆的载体，其特征在于：（１）在ｐＢＶ２２０载体克隆入四环素抗性基因；（２）建立简并序列基因库的方法；（３）目的基因与四环素基因之间的序列特征。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李福胜，张智清，侯云德，贡惠宇，
申请(专利权)人：中国预防医学科学院病毒学研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]