本发明专利技术涉及产生含有一种或多种过渡融合相关决定簇的融合相关分子结构（ＦＲＭＳ）。可构建高效疫苗，它为免疫系统提供所述相关融合决定簇，产生能够有效中和来自世界各地和不同系统发育病毒进化枝的广泛的初级分离株的独特抗体。本发明专利技术提供形成、分离和纯化ＦＲＭＳ的方法，以及在各种组合物和方法中使用这种ＦＲＭＳ，包括例如用作疫苗免疫原、诊断试剂和治疗药物。本发明专利技术涉及能够激发产生针对病毒病原体和病毒初级分离株的中和抗体的ＦＲＭＳ。针对所述ＦＲＭＳ的抗体可用来研究所述病毒和宿主细胞融合的分子途径以及鉴定抗体介导的对所述途径的阻断的可能位点。本发明专利技术还涉及应用本发明专利技术抗体用于抗病毒剂、血液制品添加剂、避孕药添加剂和接触后治疗或胎儿免疫的被动免疫接种。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
本专利技术由分别抗FRMS和亲和标记的病毒包膜蛋白的单克隆抗体构成，它是得到政府支持的专利技术，国立卫生研究院基金支助号为R01AI44669-01和R21 AI44312-02。因此，政府对本专利技术拥有一定权益。本申请要求对1998年8月3日提交的美国临时专利申请第60/095,105号和1999年6月29日提交的美国临时专利申请第60/141,806号的优先权，通过引用将这两个专利整体结合到本文中。1．前言本专利技术涉及令人惊奇的发现，即可构建为免疫系统提供过渡的融合相关决定簇的高效疫苗，该高效疫苗可产生能够有效中和来自世界各地和不同系统发育病毒进化枝的各种各样初级分离株的独特抗体。本专利技术涉及产生融合相关分子结构(Fusion-Related Molecular Structure,FRMS)，该分子结构含有一个或多个融合相关决定簇。本专利技术还涉及这样的发现对各种不同初级分离株的广泛而均等的中和作用表明，FRMS提供的关键决定簇是高度保守的，而且在结合和融合时紧密依赖于包膜蛋白的基本功能。本专利技术提供形成、分离和纯化FRMS的方法以及在各种组合物和方法中应用这种FRMS，包括例如用作疫苗免疫原、诊断试剂和治疗药物。本专利技术涉及能够触发抗病毒致病原和初级病毒分离株的中和抗体的FRMS。针对所述FRMS产生的抗体可用来研究关于病毒和宿主细胞融合的分子途径以及用来鉴定抗体介导的阻断对所述途径的可能作用位点。本专利技术还涉及将本专利技术抗体用作抗病毒剂、血液制品添加剂、避孕药添加剂、接触后治疗或胎儿免疫中的被动免疫。2．专利技术背景不能将本文中的文献引用解释为承认这样的文献对本专利技术而言是先有技术。病毒是在人类、动物、细菌和植物引起许多疾病的感染原，因此其在医学和工业上非常重要。概括地说，称为病毒体的游离病毒颗粒由基因组(可以为RNA或DNA)、相关蛋白或聚酰胺以及称为衣壳的蛋白质外壳组成。某些病毒体还由膜性包膜包围。衣壳和包膜结构用来保护基因组免被环境中存在的核酸酶作用，而且用来促进病毒粘附以及进入其感染并在其中复制的细胞内。2.1．病毒进入病毒必须利用宿主细胞的生物合成器才能复制。病毒利用动物细胞合成途径和可利用的底物维持并繁殖其自身的遗传信息。为了接近细胞生物器，病毒必须进入或感染细胞。在宿主细胞膜上存在的一种或多种病毒受体蛋白促进病毒进入。病毒蛋白与这些受体结合引发一系列复杂的过程，通过这些变化病毒核酸或核蛋白释放入细胞中。如果是包膜病毒，则病毒包膜与细胞膜如细胞表面膜或内膜融合有助于感染。各种各样的包膜病毒与人类和动物疾病有关。2.2．HIV一个临床上重要的包膜病毒的实例是HIV。人类免疫缺陷病毒(HIV)是称为获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的慢性退行性免疫系统疾病(Barre-Sinoussi,F.等，1983,Science 220:868-870；Gallo,R等，1984,Science 224:500-503)。HIV主要在人类CD4+T淋巴细胞群中复制，HIV感染导致缺乏这种细胞类型，最终导致免疫机能不全、机会感染、神经功能紊乱、肿瘤生长以致最终死亡。至少存在两种不同类型的HIV，包括HIV-1(Barre-Sinorssi,F.等，1983,Science 220:868-870；Gallo,R.等，1984,Science 224:500-503)和HIV-2(Clavel,F.等，1986,Science 233:343-346；Guyader,M.等，1987,Nature 326:662-669)。另外，在每种HIV类型的群体中存在明显的遗传异质性。HIV是逆转录病毒科的慢病毒类成员(Teich,N.等，1984,RNATumor Viruses,Weiss,R.等编辑，CSH-Press，第949-956页)。逆转录病毒是小包膜病毒，它含有单链RNA基因组而且通过病毒编码的逆转录酶即依赖RNA的DNA聚合酶产生的DNA中间体复制(Varmus,H.,1988,Science 240:1427-1439)。HIV病毒颗粒含有病毒核心(部分由衣壳蛋白组成)和病毒RNA基因组和早期复制过程需要的酶。肉豆蔻化gag蛋白围绕病毒核心构成外壳，它又由得自感染细胞膜的脂质膜包膜包裹。HIV包膜表面糖蛋白以单一160kD前体蛋白合成，前体蛋白在病毒出芽期间被细胞蛋白酶裂解为两种糖蛋白gp41和gp120。gp41是跨膜糖蛋白，gp120是胞外糖蛋白，它可能以三聚型或多聚型与gp41非共价结合(Hammarskjold,M.等，1989,Biochem.Biophys.Acta 989:269-280)。HIV靶向CD4+细胞，因为CD4细胞膜蛋白(CD4)起HIV-1病毒的细胞受体的作用(Dalgleish,A.等，1984,Nature 312:763-767；Klatzmann等，1984,Nature 312:767-768；Maddon等，1986,Cell47:333-348)。病毒进入细胞取决于gp120结合细胞CD4受体分子(McDougal,J.S.等，1986,Science 231:382-385；Maddon,P.J.等，1986,Cell 47:333-348)，这可以解释HIV的CD4+细胞趋向性。病毒包膜蛋白和细胞受体相互作用时，包膜蛋白-CD4复合物发生构象变化，促进随后与宿主细胞共同受体相互作用形成三分子复合物。三分子复合物进一步发生构象变化使得汇合的细胞膜和病毒包膜融合，从而释放病毒遗传物质入细胞中。2.3．病毒治疗策略2.3.1．药物治疗尽管对有效治疗药物的设计进行了巨大的努力，但是目前仍然没有针对AIDS的治愈性抗逆转录病毒药物。对于开发这样的药物的努力集中在HIV生活周期的几个阶段(Mitsuya,H.等，1991,FASEB J.5:2369-2381)。已经提出了许多干扰HIV生活周期的病毒靶，因为普遍的观点认为干扰宿主细胞蛋白具有有害的副作用。例如病毒编码的逆转录酶已成为药物开发的一个焦点。已经开发了许多针对逆转录酶的药物，包括2’,3’-双脱氧核苷类似物如AZT、ddI、ddC和d4T，已证明这些药物是抗HIV有效的药物(Mitsuya,H.等，1991,Science249:1533-1544)。对HIV-1的新治疗方案证实，针对逆转录酶(RT)的抗HIV化合物(如叠氮胸苷(AZT)、拉米夫啶(3TC)、双脱氧肌苷(ddI)、双脱氧胞苷(ddC))与HIV-1蛋白酶抑制剂联合使用对降低病毒负荷量的作用(降低2-3个对数)远远高于单独使用AZT的治疗(约降低1个对数)。例如最近联合使用AZT、ddI、3TC和ritonavir获得更好的结果(Perelson,A.S.等，1996,Science 15:1582-1586)。但是，长期联合使用这些化学药物可产生毒性尤其是骨髓毒性。长期细胞毒性疗法也可能通过杀伤细胞活性(Blazevic,V.等，1995,AIDS Res.Hum.Retroviruses 11:1335-1342)和释放抑制因子(值得注意的是趋化因子Rantes、MIP-1α和MIP-1β(Cocchi,F.等，1995,Scien本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种分离的分子结构，它含有因为（ａ）包膜病毒的包膜蛋白，和（ｂ）一种或多种细胞膜蛋白结合形成的表位，所述包膜蛋白和细胞膜蛋白在合适的条件下必须并足以融合所述病毒包膜与含有所述细胞膜蛋白的细胞膜。
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员：JH农博格，
申请(专利权)人：蒙他拿州大学，
类型：发明
国别省市：US[美国]
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