一种控制测定安络痛浸膏中甘露醇的方法技术

本发明专利技术公开了一种控制测定安络痛浸膏中甘露醇的方法。该方法以甘露醇为对照品，精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入高效液相色谱仪，测定，记录图谱，即得对照品与供试品的图谱，将得到的图谱进行处理，对供试品溶液中甘露醇进行定性和定量，进而计算得安络痛浸膏中甘露醇的含量。本发明专利技术检测方法各色谱峰分离较好，基线平稳，峰型好，重复性较好，该方法具有良好的线性关系、精密度、稳定性、回收率，能够准确检测安络痛浸膏中甘露醇成分含量，达到对安络痛浸膏进行质量控制的目的。

A method for the control of mannitol in anoalgia extract

The present invention discloses a method for controlling mannitol in anodyne extract. This method takes the mannitol as the control, precision drawing control solution and sample solution, HPLC, determination, record map, namely map control and sample, will be the map processing, the tested product mannitol solution was qualitatively and quantitatively, and then calculate the content an extract of mannitol collaterals pain. The detection method of each chromatographic peak separation is good, smooth baseline, peak type, good repeatability, the method has good linearity, precision, stability and recovery rate, be able to extract mannitol content complex pain and accurate detection, reach for the quality control of Anluo extract to pain.

【技术实现步骤摘要】
一种控制测定安络痛浸膏中甘露醇的方法
本专利技术属于药物分析
，具体涉及一种控制测定安络痛浸膏中甘露醇的方法。
技术介绍
安络痛浸膏为江苏正大清江制药依照中国国家药品标准生产的生物发酵产品，主要用于通经活络，活血止痛，用于坐骨神经痛，三叉神经痛，风湿性关节炎病症的治疗。安络痛浸膏的制备方法为：采用安络小皮伞菌，接入到合适的培养基上，进行发酵。发酵产物经浓缩，乙醇回流，沉淀除杂，浓缩，包装，即得。其中产品中主要含有甘露醇等多种生物活性物质，因此，对甘露醇的含量进行控制，实现多种有效成分分离检测，对其质量控制具有重要的现实意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种控制测定安络痛浸膏中甘露醇的方法，以测定安络痛浸膏中甘露醇的含量，进而对安络痛进行质量控制。本专利技术是通过以下技术方案实现的：一种控制测定安络痛浸膏中甘露醇的方法，包括如下步骤：对照品溶液的制备：称取甘露醇对照品加水溶解，制成每1mL含甘露醇5mg的对照品溶液；供试品溶液的制备：取安络痛适量，加水溶解，过滤即得供试品溶液；色谱条件如下：色谱柱：氨基键合硅胶色谱柱；流动相：乙腈－水=85：15；流速：0.3mL/min~0.5mL/min；视差检测器，35℃~45℃；柱温：35℃~45℃；进样量：20μL；理论塔板数：以甘露醇峰计算大于等于2000；检测方法：精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入高效液相色谱仪，测定，记录图谱，即得对照品与供试品的图谱，对照甘露醇线性回归方程，对供试品溶液中甘露醇进行定性和定量，进而计算得安络痛浸膏中甘露醇的含量。所述甘露醇线性回归方程y=408825.56x–35331.53，R²=0.9986，线性良好。本专利技术进一步改进方案为：所述流动相为乙腈－水=85：15，柱温为35℃，视差检测器为35℃。本专利技术的更进一步改进方案为：所述流动相为乙腈－水=85：15，柱温为40℃，视差检测器为40℃。本专利技术的再进一步改进方案为：所述流动相为乙腈－水=85：15，柱温为45℃，视差检测器为45℃。本专利技术的有益效果为：本专利技术检测方法各色谱峰分离较好，基线平稳，峰型好，重复性较好，该方法具有良好的线性关系、精密度、稳定性、回收率，能够准确检测安络痛中甘露醇的成分含量，达到对安络痛浸膏进行质量控制的目的。附图说明：图1为实施例1色谱条件下所得的对照品谱图和供试品谱图；图2为实施例2色谱条件下所得的对照品谱图和供试品谱图；图3为实施例3色谱条件下所得的对照品谱图和供试品谱图；图4为实施例4所得色谱图；图5为甘露醇峰面积值和浓度的线性关系图。本专利技术所使用的仪器与试剂如下：1、高效液相色谱仪：岛津公司LC-10AT&RID-10A型。2、试剂：对照品甘露醇购于中国食品药品检定研究院；安络痛浸膏：正大清江制药有限公司自制。以下通过实施例形式再对本专利技术的内容做进一步详细说明，但不应就此理解为本专利技术上述主题范围内仅限于以下实施例。在不脱离本专利技术上述技术前提下，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的相应替换或变更的修改，均包括在本专利技术内。实施例1对照品溶液的制备：称取甘露醇对照品加水醇溶解，制成每1mL含甘露醇5mg的对照品溶液；供试品溶液的制备：取批号为20161010的安络痛浸膏5g，加水溶解，定容，过滤即得供试品溶液；色谱条件如下：色谱柱：氨基键合硅胶色谱柱；流动相：乙腈－水=85：15；流速：0.4mL/min；视差检测器：40℃；柱温：40℃；进样量：20μL；理论塔板数：以甘露醇峰计算大于等于2000；检测方法：精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入高效液相色谱仪，测定，记录图谱，如图1所示。根据检测结果，每克安络痛浸膏中，甘露醇不得少于100mg。实施例2对照品溶液和供试品溶液的制备同实施例1。色谱条件如下：色谱柱：氨基键合硅胶色谱柱；流动相：乙腈－水=85：15；流速：0.4mL/min；视差检测器：35℃；柱温：35℃；进样量：20μL；理论塔板数：以甘露醇峰计算大于等于2000；检测方法：精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入高效液相色谱仪，测定，记录图谱，如图2所示。根据检测结果，每克安络痛浸膏中，甘露醇不得少于100mg。实施例3对照品溶液和供试品溶液的制备同实施例1。色谱条件如下：色谱柱：氨基键合硅胶色谱柱；流动相：乙腈－水=85：15；流速：0.4mL/min；视差检测器：45℃；柱温：45℃；进样量：20μL；理论塔板数：以甘露醇峰计算大于等于2000；检测方法：精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入高效液相色谱仪，测定，记录图谱，如图3所示。根据检测结果，每克安络痛浸膏中，甘露醇不得少于100mg。实施例4：干扰试验对照品溶液的制备同实施例1。空白的制备：溶剂水；色谱条件同实施例1。检测方法：精密吸取对照品溶液、空白溶剂，注入液相色谱仪，测定，记录图谱，如图4所示。根据测量结果，空白溶剂在主峰位置无色谱峰，溶剂对含量测定无干扰。实施例5：甘露醇线性回归方程将对照品头甘露醇别配制成1mg/ml~6mg/ml的6个不同浓度的标准溶液，按照实施例1的色谱条件，各精密量取20μL注入液相色谱仪，记录色谱图，测定峰面积，以峰面积值（S）对浓度（C）进行线性回归，求得甘露醇的线性回归方程：y=408825.56x–35331.53R²=0.9986线性良好。以峰面积值S对浓度C作图，得一直线图，见图5。实施例6：进样精密度试验对照品溶液制备方法和色谱条件同实施例1，取对照品溶液，连续进样5次，记录色谱图，测定结果见表1。表1进样精密度试验结果结论：由表1可见，甘露醇RSD%为1.1%（n=5），表明进样精密度较好。实施例7：回收率试验分别取甘露醇对照溶液，各样品按照实施例1的色谱条件和检测方法测定，计算回收率，测定结果见表2。表2回收率试验结果结论：由表2可见，甘露醇平均回收率为97.3%，RSD为1.5%，表明回收率较好。实施例8：重复性试验按照实施例1的色谱条件，取批号为20161010的样品6份，分别精密称定，提取，测定结果见表3。表3重复性测定结果（n=6）结论：由表3可见，试验结果甘露醇RSD为1.5%，表明重复性较好。实施例9：色谱条件耐用性流速变化按照实施例1的实验方法，将流速变为：0.3ml/min、0.5ml/min，考察溶剂峰和甘露醇之间的峰分离度，结果见表4。表4流速变化测试结果表结论：本色谱条件下测定，可见将流速在0.3ml/min~0.5ml/min条件允许范围内变化对分离度检测没有明显影响。实施例10：色谱条件耐用检测器温度变化按照实施例1的实验方法，将检测器温度变为：35℃、45℃考察溶剂峰和甘露醇之间的峰分离度，结果见表5。表5检测器温度变化测试结果表结论：本色谱条件下测定，可见将检测器温度设置在35℃~45℃条件允许范围内变化对分离度检测没有明显影响。实施例11：色谱条件耐用性柱温变化按照实施例1的实验方法，将柱温变为：35℃、45℃，考察溶剂峰和甘露醇之间的峰分离度，结果见表6。表6柱温变化测试结果表结论：本色谱条件下测定，可见将柱温设置在35℃~45℃条件允许范围内变化对分离度检测没有明显影响。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种控制测定安络痛浸膏中甘露醇的方法，其特征在于包括如下步骤：对照品溶液的制备：称取甘露醇对照品加水溶解，制成每1mL含甘露醇5mg的对照品溶液；供试品溶液的制备：取安络痛浸膏适量，水溶解，超声，过滤即得；色谱条件如下：色谱柱：氨基键合硅胶色谱柱；流动相：乙腈－水=85：15；流速：0.3mL/min ~0.5mL/min；视差检测器：35℃~45℃；柱温：35℃~45℃；进样量：20μL；理论塔板数：以甘露醇峰计算大于等于2000；检测方法：精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入高效液相色谱仪，测定，记录图谱，即得对照品与供试品的图谱，对照甘露醇线性回归方程，对供试品溶液中甘露醇进行定性和定量，进而计算得安络痛浸膏中甘露醇的含量。

【技术特征摘要】
1.一种控制测定安络痛浸膏中甘露醇的方法，其特征在于包括如下步骤：对照品溶液的制备：称取甘露醇对照品加水溶解，制成每1mL含甘露醇5mg的对照品溶液；供试品溶液的制备：取安络痛浸膏适量，水溶解，超声，过滤即得；色谱条件如下：色谱柱：氨基键合硅胶色谱柱；流动相：乙腈－水=85：15；流速：0.3mL/min~0.5mL/min；视差检测器：35℃~45℃；柱温：35℃~45℃；进样量：20μL；理论塔板数：以甘露醇峰计算大于等于2000；检测方法：精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入高效液相色谱仪，测定，记录图谱，即得对照...

【专利技术属性】
技术研发人员：王崇益，石欢，徐琳寓，嵇利娟，张欣，
申请(专利权)人：江苏正大清江制药有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32