抗肿瘤药物组合物及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种药物组合物及其应用，其所述药物组合物包含冬凌草甲素与西妥昔单抗。当用于治疗喉癌时，所述药物组合呈现明显的协同作用。本发明专利技术涉及药物组合物在体内及体外实验均证明明显抑制喉癌细胞生长，其机制为抑制EGFR信号通路激活；同时，该药物组合物可以促进活性氧产生进而诱导喉癌细胞发生凋亡及细胞周期阻滞。本发明专利技术药物组合在治疗喉癌的应用中具有抗肿瘤效果明显且毒副作用小的优点。

Antitumor drug composition and its application

【技术实现步骤摘要】
抗肿瘤药物组合物及其应用
本专利技术涉及一种抗肿瘤药物组合物及其应用，具体涉及西妥昔单抗和冬凌草甲素的组合物及其抗喉癌的应用，属于医药

技术介绍
头颈部肿瘤是全球范围内的第6大常见肿瘤。其中，喉癌(laryngealcancer)是头颈部常见的恶性肿瘤，在我国该病约占全身肿瘤的1％～5％，我国每年10万肿瘤患者中就有1.5～3.4新增喉癌病例。喉癌病理分型以鳞状细胞癌为主。近年来，随着工业污染的加重，喉癌的发病率有明显的上升趋势(CancerTreatmentReviews,2006,32:504-515；ClinicalOtolaryngology&AlliedSciences,2001,26:442-446)。由于早期喉癌症状及体征不明显，多不引起注意，60％以上喉癌患者诊断时已是局部晚期(ExperimentalCellResearch,2014,321(2):133-141；HumanGeneTherapy,2009,20:1565-1575)，其癌病变范围广泛，单纯手术治疗常切除全喉、下咽或食道，明显降低了患者的生活及生存质量。基于器官保护和生存方面的考虑，协同放化疗已成为喉癌患者的重要治疗手段(中国口腔颌面外科杂志,2009,7(4):290-295)。目前，5-氟尿嘧啶(5-FU)和顺铂是临床常用于治疗喉癌的化疗药物，然而这两种化疗药物对机体组织可造成相当大的副作用，如骨髓抑制、肝脏损害等。常规的联合用药方案可增加疗效，但同时也带来了更多的副作用，可造成大范围组织的纤维化、瘢痕和水肿，引起吞咽困难，呼气喉部阻滞等副作用。传统的化疗方法的副作用已达到了毒性极限(JournalofClinicalOncology,2006,24(17):2603-2605)，因此，探索寻找高效，低毒的对抗喉癌的新型药物和治疗方法一直是医药学研究的热点。近年来，随着对肿瘤细胞信号转导途径研究的不断深入，针对细胞受体、信号转导、细胞周期和血管生成等的分子靶向治疗，已成为肿瘤治疗的新的方向。其中表皮生长因子受体(Epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR)是最为主要的靶点。研究报道80％-100％的头颈部鳞状细胞癌中存在EGFR基因过表达(Drugs,2000,60(Suppl1):15-23；CancerResearch,1994,4:3153-3159)。我们课题组运用荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization，FISH)的方法检测出人喉鳞状细胞癌HEp-2细胞以及11例喉癌组织标本中存在EGFR基因扩增(ActaGeneticaSinica,2004,31:109-113；ChineseJournalMedicalGenetics,2000,17:278-280)。ChrysovergisA等发现55例喉癌组织标本中有48例(87.2％)EGFR过表达(MedicalOncology,2011,28(3):871-7)。可见，过度激活的EGFR可能是导致人喉鳞状细胞癌发生、发展的原因之一。大量临床研究表明，针对EGFR的分子靶向治疗在头颈部恶性肿瘤治疗中能够降低头颈部恶性肿瘤的远期复发率，能够替代某些化疗药物并降低化疗毒性药物的使用量(JournalofClinicalOncology,2004,22(1):77-85)。鉴于人喉鳞状细胞癌中EGFR基因过表达，EGFR成为喉癌最为突出的候选治疗靶点。EGFR是一种广泛分布于人体各组织细胞膜上的多功能糖蛋白，是HER/ErbB家族的四个成员之一。当EGFR与受体表皮生长因子(Epidermalgrowthfactor，EGF)或转化生长因子-α(Transforminggrowthfactorα，TGF-α)结合后，引起受体的二聚化作用，形成同型或异型二聚体。二聚化的受体发生交联磷酸化，即一个受体使另外一个受体上特定酪氨酸残基磷酸化，激活胞内区的酪氨酸激酶亚区，从而激发下一级信号传导。EGFR下游信号转导通路主要有：Ras/MAPK通路、PI3K/Akt通路、PLC-γ通路、Jak/STAT通路(BiochimicaetBiophysicaActa,2006,1766(1):120-139)。EGFR通过这些通路调节细胞增殖和分化，增加肿瘤细胞的侵袭力、促进血管生成及抑制肿瘤细胞的凋亡(EMBOJournal,2000,19:623-630)。西妥昔单抗(cetuximab,商品名为Erbitux；C225)是目前唯一经Ⅲ期临床试验证实对局部晚期头颈部鳞癌有明显疗效的抗EGFR靶向药物。西妥昔单抗是一种抗EGFR的人鼠嵌合单克隆抗体，特异性结合于EGFR的细胞外段，能有效阻断配体EGF、TGF-α与EGFR的结合，抑制受体磷酸化，从而阻断下行信号通道，发挥抗肿瘤作用。但是现有的临床试验证实单独使用EGFR抑制剂时抗肿瘤作用非常有限，单药的有效率低于15％(EuropeanArchivesOto-Rhino-Laryngology,2008,265(Suppl1):S3-S12)。目前的研究主要集中在将其与传统治疗方法或与其他的抗肿瘤药物相结合的策略上，即，可以以西妥昔单抗抗肿瘤资料为基准，采用两种、三种药物联合用药的方式治疗头颈部鳞状细胞癌(ClinicalCancerResearch,2004,10(19):6487-6501)。近年来，植物来源的天然抗肿瘤药物通常对正常的人源细胞无毒或低毒性，可通过与不同的药物联用放大较弱的死亡信号，降低肿瘤细胞的抵抗阀，确保肿瘤细胞发生有效的细胞死亡(中国生物制品学杂志,2011,24(9):1112-1115)。一些机制已知的植物提取药物常常被用于抗肿瘤的联合作用研究(JournalofCellularPhysiology,2010,222(2):433-443；CancerResearch,2009,69(23):8910-8917)。冬凌草甲素(Oridonin)是从唇形科香茶菜属(Rabdosia)植物中分离出的一种贝壳杉烯二萜类天然有机化合物。大量资料证明，冬凌草甲素对人结肠癌SW1116细胞、人胰腺癌PaCa细胞及人胃癌SNU-5细胞等多种肿瘤均具有明显的抑制作用(BMCCancer,2010,10:610；InternationalJournalofOncology2012,41:949-958；TumorBiology,2014,35:9139-9146)，其对实体瘤的治疗作用目前已广泛地应用于临床,常用于食道癌、肝癌等多种实体瘤的治疗,并且均取得了明显的临床疗效(癌症,1984,8(1):50；肿瘤防治研究,1984,11(2):86)。前期工作中我们首次发现冬凌草甲素可以抑制人喉鳞状细胞癌HEp-2细胞增殖，作用机制可能为抑制EGFR信号通路激活。当冬凌草甲素与AG1478(EGFR特异性抑制剂)联用后进一步抑制EGFR活化，并且协同增加HEp-2细胞凋亡(CancerLetters,2010,294:147-158)，提示，将冬凌草甲素与EGFR临床靶向治疗药物——西妥昔单抗联合可能是一种有效的治疗喉癌的方本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗肿瘤药物组合物，其特征在于，所述组合物含有冬凌草甲素及西妥昔单抗。

【技术特征摘要】
1.一种抗肿瘤药物组合物，其特征在于，所述组合物含有冬凌草甲素及西妥昔单抗。2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述冬凌草甲素的提取工艺是以冬凌草药材为原料，通过乙醇溶液回流提取；所得到的提取物，用石油醚脱脂，然后等体积乙酸乙酯萃取；将所得萃取物经过硅胶柱色谱分离，用二氯甲烷与甲醇梯度洗脱，得到冬凌草甲素粗品，经重结晶得到冬凌草甲素。3.根据权利要求1的抗肿瘤药物组合物，其特征在于，所述冬凌草甲素和所述西妥昔单抗分别包括其药学可接受的盐，和药学上可接受的赋形剂或载体。4.根据权利要求1所述的抗肿瘤药物组合物的应用，其特征在于，所述的肿瘤为人喉鳞状细胞癌。5.根据权利要求1所述的抗肿瘤药物组合物，其特征在于：...

【专利技术属性】
技术研发人员：康宁，曹世杰，邱峰，高秀梅，张强，
申请(专利权)人：天津中医药大学，
类型：发明
国别省市：天津,12