本发明专利技术公开了岩藻黄素与阿霉素组合物在制备治疗人肝癌制剂中的应用。本发明专利技术也公开了一种微胶囊剂的制备方法。有益效果为：岩藻黄素与阿霉素具有高度协同作用，能够显著抑制肝癌细胞的增殖，降低阿霉素用药浓度、减少阿霉素副反应，且岩藻黄素和阿霉素具有确定分子质量，在量化投料方面具有明显的优势，有利于制备现代剂型；所制备的胶囊剂呈类球形，粒径分布窄，对活性组分的包封率高，突释效应弱，在静脉注射时能够稳定平缓地释放，且释放周期长。
Application of fucioflavin and doxorubicin in preparation of human liver cancer preparation
The invention discloses the application of the fucixin and adriamycin composition in the preparation of human liver cancer preparation. The invention also discloses a preparation method of microcapsule. The beneficial effect of fucoxanthin and adriamycin has highly synergistic effect, can significantly inhibit the proliferation of hepatoma cells, reduce doxorubicin concentration, reduce doxorubicin medication side effects, and fucoxanthin and doxorubicin with certain molecular weight, has obvious advantages in terms of quantitative feeding, is conducive to the preparation of modern dosage forms; prepared capsules prepared spherical, narrow diameter distribution, the encapsulation rate of active components is high, the burst effect is weak, can gently release in intravenous injection, and the release cycle is long.
【技术实现步骤摘要】
岩藻黄素与阿霉素组合物在制备治疗人肝癌制剂中的应用
本专利技术属于药学领域，尤其是涉及岩藻黄素与阿霉素组合物在制备治疗人肝癌制剂中的应用。
技术介绍
肝癌被称为“癌中之王”，是一种发生于肝脏的恶性肿瘤，具有潜伏期较长、恶性程度高、侵袭性强和易转移等特点。我国每年新增肝癌病例为35～40万，在肿瘤发病排名中排第5，死亡排名中排第2。作为世界最常见的恶性肿瘤之一，临床常用手术、化疗及放疗等方法治疗肝癌。由于肝癌发展较快，被确诊时多已处于中晚期阶段，采用手术治疗的方法意义不大且疗效也不容乐观，因此药物治疗常代替手术作为主要治疗手段之一。
技术实现思路
本专利技术的目的在于将具有一定配比的岩藻黄素与阿霉素组合物用于制备治疗人肝癌制剂中的用途，该配比下的岩藻黄素与阿霉素在抑制肝癌细胞增殖时的联合指数小于0.6，具有高度协同作用，显著抑制了肝癌细胞的增殖，促使肝癌细胞凋亡，且该制剂中阿霉素和岩藻黄素的包封率高，突释效应弱，释药平缓稳定。本专利技术针对
技术介绍
中提到的问题，采取的技术方案为：岩藻黄素与阿霉素组合物在制备治疗人肝癌制剂中的应用，其中，所用组合物中岩藻黄素与阿霉素物质的量比为25～62.5:0.08。岩藻黄素与阿霉素具有高度协同作用，能够显著抑制肝癌细胞的增殖，降低阿霉素用药浓度、减少阿霉素副反应，且岩藻黄素和阿霉素具有确定分子质量，在量化投料方面具有明显的优势，有利于制备现代剂型。作为优选，治疗人肝癌制剂为微胶囊剂，该微胶囊剂的制备方法为：取95～100份三嵌段共聚物PLA-PEG-PLA，向其中加入二氯甲烷与乙酸乙酯的混合液，其中，二氯甲烷与乙酸乙酯的体积比为0.9～1:1.2，搅拌溶解，再加入25～125份阿霉素、0.08～0.16份岩藻黄素以及200～230份超纯水，将所得混合液在25～30W下超声15～20s，接着向混合液中加入稳定剂，搅拌10～15min，最后除去有机溶剂得治疗肝癌微胶囊剂。所制备的胶囊剂呈类球形，粒径分布窄，对活性组分的包封率高，突释效应弱，在静脉注射时能够稳定平缓地释放，且释放周期长，大大提高了胶囊剂对肝癌细胞的增殖。作为优选，稳定剂为质量分数为0.1％的明胶水溶液，加入量为10～12份。明胶的表面张力为0.054N/m，能够促进具有一定亲水性的三嵌段共聚物形成球形胶囊，且明胶可生物降解，对环境的危害小。与现有技术相比，本专利技术的优点在于：本专利技术将岩藻黄素与阿霉素同时用于抗癌制剂的制备，得到的抗癌制剂对肝癌细胞增殖的抑制率明显高于单一成分所制备得到的抗癌制剂；岩藻黄素与阿霉素具有高度协同作用，降低阿霉素用药浓度、减少阿霉素副反应，能够显著抑制肝癌细胞的增殖，降低肝癌细胞线粒体膜电位，促使肝癌细胞凋亡，且岩藻黄素和阿霉素具有确定分子质量，在量化投料方面具有明显的优势，有利于制备现代剂型，具有较好的市场前景；所制备的胶囊剂呈类球形，粒径分布窄，对活性组分的包封率高，突释效应弱，在静脉注射时能够稳定平缓地释放，且释放周期长。附图说明图1为本专利技术岩藻黄素、阿霉素单独及联合处理人肝癌HepG2细胞48h后凋亡相关基因蛋白的表达示意图。附图标记说明：A：阴性对照组；B：25μmol/L岩藻黄素（FUC）；C：0.08μmol/L阿霉素（ADR）；D：25μmol/L岩藻黄素（FUC）+0.08μmol/L阿霉素（ADR）。具体实施方式下面通过附图和实施例对本专利技术做进一步说明：实施例1：岩藻黄素与阿霉素组合物对癌细胞的抑制实验，包括以下步骤：（一）使用含10%胎牛血清（FBS），青霉素（100U/mL）/链霉素（100μg/mL）双抗的PRMI-1640培养基接种人肝癌HepG2细胞，置37℃、5%CO2、饱和湿度的恒温培养箱培养，2-3d进行传代，用于试验的HepG2细胞均处于对数生长阶段；（二）MTT法测定人肝癌HepG2细胞的增殖：①将人肝癌HepG2细胞经胰蛋白酶消化、离心收集后，制成细胞悬液，调整浓度为5´104个/mL，以100μL/孔该细胞悬液的剂量加至96孔细胞培养板中，置37℃、5%CO2恒温培养箱培养24h；②以岩藻黄素（FUC）组、阿霉素（ADR）组、岩藻黄素与阿霉素（FUC+ADR）联合用药组，进行加药处理，置恒温培养箱常规条件培养72h，；③取出96孔板，吸弃药液，以20μL/孔MTT（5g/L）的剂量处理细胞，置恒温培养箱继续培养4h，小心弃去上清液，以150μL/孔DMSO的剂量处理细胞，置脱色摇床上低速震荡10min后，酶标仪检测每孔细胞的吸光光度值（OD490），并计算其生长抑制率（IR），公式如下：IR=(1-TOD/COD)×100%其中，TOD为经调零的给药组的OD值；COD为对照组的OD均值。试验设调零孔（较试验孔无细胞与药物），每个药物浓度组设5个复孔（较试验孔无药物，但有溶解药物的溶媒）。岩藻黄素与阿霉素联合作用CI值的分析：根据中效方程，可计算岩藻黄素、阿霉素单独及联合用药时它们的中效浓度Dm，再计算处于各种效应时需要的药物浓度D，可算出两药联合指数CI，公式如下：CI=D1/Dx1+D2/Dx2+(αD1D2)/(Dx1Dx2)D1，D2为两药合用生长抑制率达某一效应时各自的作用剂量；Dx1，Dx2为两药单用生长抑制率达某一效应时各自的作用剂量；α=0表示两药相互排斥；α=1表示两药互不排斥。实验结果如下表所示：由表可知，岩藻黄素联合阿霉素对人肝癌HepG2细胞的抑制作用强于单用组，12.5μmol/L岩藻黄素+0.016μmol/L阿霉素联合处理72h，CI值为0.456，具有高度协同作用（0.4≤CI<0.6：高度协同作用）；25μmol/L岩藻黄素与0.08μmol/L阿霉素联合处理72h，CI值为0.393，具有强协同作用（0.2≤CI<0.4）；（三）JC-1染色法测定人肝癌HepG2细胞线粒体膜电位的变化：①人肝癌HepG2细胞，经消化离心调整细胞浓度至5×104个/mL，接种于25mL培养瓶，置37℃、5%CO2恒温培养箱培养24h；②分别以25μmol/L岩藻黄素、0.08μmol/L阿霉素、25μmol/L岩藻黄素+0.08μmol/L阿霉素联合作用培养细胞48h，并设置空白对照；③PBS缓冲液漂洗细胞2遍，离心收集，调整浓度≤1´106个/mL；④JC-1染液的配置：100μL10×培养缓冲液（IncubationBuffer）与900μL灭菌去离子水混匀成1×IncubationBuffer，预热至37℃，在500μL1×IncubationBuffer中加入1μLJC-1，涡旋混匀；⑤500μLJC-1染液悬浮细胞，置恒温培养箱常规条件培养15-20min；⑥离心机2000rpm离心5min后收集细胞，用1×IncubationBuffer漂洗2遍，在流式细胞仪下观察经1×IncubationBuffer悬浮均匀的细胞，计算细胞MMP下降的细胞比例。结果显示：阴性对照组细胞MMP下降比例为0.7%；细胞经25μmol/L岩藻黄素作用后MMP下降比例为4.6%；细胞经0.08μmol/L阿霉素作用后MMP下降比例为1.8%，细胞经25μmol/L岩藻黄素+0.08μmol/L阿霉素联合作用后本文档来自技高网...
【技术保护点】
岩藻黄素与阿霉素组合物在制备治疗人肝癌制剂中的应用，其特征在于物质的量比为25～62.5:0.08的岩藻黄素与阿霉素同时用于制备治疗人肝癌制剂中的用途。
【技术特征摘要】
1.岩藻黄素与阿霉素组合物在制备治疗人肝癌制剂中的应用，其特征在于物质的量比为25～62.5:0.08的岩藻黄素与阿霉素同时用于制备治疗人肝癌制剂中的用途。2.根据权利要求1所述的岩藻黄素与阿霉素组合物在制备治疗人肝癌制剂中的应用，其特征在于：所述制剂的制备方法为：取95～100份三嵌段共聚物PLA-PEG-PLA，向其中加入二氯甲烷与乙酸乙酯的混合液，搅拌溶解，再加入25～125份阿霉素、0.08～0.16份岩藻黄素以及200～230份超纯水，将所得混合液超声，接着向混合液中加入稳定剂，搅拌10～15min，最后除去有机溶剂得制剂。3...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵玉勤，
申请(专利权)人：浙江海洋大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。