血清质谱分析方法、基于金钯的基质及其制备方法、应用技术

一种血清质谱分析方法、基于金钯的基质及其制备方法、应用，属于质谱检测领域。基于金钯的基质包括纳米颗粒的聚集体，纳米颗粒中含有金元素和钯元素，纳米颗粒的尺寸在100nm以下，在聚集体中纳米颗粒的粒度具有单分散性。基质能有效去除传统有机基质的背景噪声干扰，大大提升小分子物质的解吸离子化效果。在此基础上提出的一种对血清体系中小分子代谢物分析的新方法，过程中无需进行样品预处理，并且能将血清样品量降至数十微升级别，从而实现了小分子代谢物的快速、高敏检测。

Analysis of serum mass spectrometry, matrix based on gold palladium, preparation method and Application

A method for analysis of serum mass spectrometry, a matrix based on gold palladium, a preparation method and an application, belongs to the field of mass spectrometry. Gold and palladium based substrates include nanoparticles aggregates. Nanoparticles contain gold and palladium. The size of nanoparticles is below 100nm, and the size of nanoparticles is monodisperse in aggregates. The matrix can effectively remove the background noise interference from the traditional organic matrix, and greatly improve the effect of the desorption and ionization of small molecules. A new method for the analysis of small molecular metabolites in serum system is proposed based on this. No sample pretreatment is needed, and the amount of serum samples can be reduced to tens of micro rise levels, so as to achieve rapid and Gao Min detection of small molecular metabolites.

【技术实现步骤摘要】
血清质谱分析方法、基于金钯的基质及其制备方法、应用
本专利技术涉及质谱检测领域，具体而言，涉及一种血清质谱分析方法、基于金钯的基质及其制备方法、应用。
技术介绍
基质辅助激光解吸电离质谱作为一种新型的软电离生物样品分析方式，能够对不同分子量级别的物质进行分析。它代表了一种简单，快速，精准的方式，能够同时对多种生物分子进行检测。这种方法的有效性不仅在理论上，也在实际应用中得到了印证。仪器核心部分主要包括基质辅助激光解吸电离离子源和质量分析器。在基质辅助激光解吸电离离子源中，当激光照射在基质和分析物形成的共结晶上时，基质将吸收绝大多数的激光能量，然后将能量传递给分析物。在此过程中将会有质子转移到分析物或者有质子从分析物中脱离出来以促使分析物形成带电离子，完成电离过程。在检测器中，实验通过测定带电离子的质荷比(m/z)确定待测物质的分子量，并据此用来鉴定不同的物质。基质辅助激光解吸电离质谱所具有的独特优势使其广泛应用于细胞组学，蛋白组学，基因组学的研究当中。但是，基质辅助激光解吸电离质谱也有局限：用基质辅助激光解吸电离质谱进行小分子(m/z<1000)的分析通常会受到限制。基于上述问题，一种新型的可以用于生物体系检测，且具有一定的抗干扰和一定的耐盐性的基质材料亟待开发。
技术实现思路
有鉴于现有技术的上述缺陷，本专利技术提供了一种血清质谱分析方法、基于金钯的基质及其制备方法、应用，以解决现有基质辅助激光解吸电离质谱检测方法的检测生物样品中的小分子检测难度大的问题。本专利技术是这样实现的：根据本专利技术的第一方面，提供了一种基于金钯的基质。基于金钯的基质包括纳米颗粒的聚集体，纳米颗粒为六边形结构，纳米颗粒中含有金元素和钯元素，纳米颗粒的尺寸在100nm以下，在聚集体中纳米颗粒的粒度具有单分散性。本专利技术的第二方面，提供了一种制备前述的基于金钯的基质的方法。基于金钯的基质的制备方法包括：提供含有氯金酸以及氯钯酸的水溶液。使水溶液进行水热反应以形成聚集体，聚集体由含有金、钯的纳米颗粒的构成。将聚集体分散在分散液中。根据本专利技术的第三方面，提供了一种基于金钯的基质在血清质谱分析中的应用。根据本专利技术的第四方面，提供了一种血清质谱分析方法，包括：将溶液状态的血清检测样品点样在质谱分析仪器的靶板上，干燥后将金钯的基质点样在靶板上并干燥。开机检测，对检测获得的质谱数据进行分析。上述方案的有益效果：1.可以一定程度上排除其他生物分子的干扰，克服传统基质的缺陷，快速、高通量、高灵敏度地检测血清中小分子代谢物。2.基质成本低，可以大批量制作：基质易于合成，可以大批量制作。3.基质重现性好，高耐盐性：样品点与点之间的重复性良好，且基质在高盐的情况下依旧能高效地离子化目标分析物。4.血清检测预处理简单，易于操作：只需要通过一定比例的稀释，不需要其他的预处理过程，极大地简化了检测过程。5.用量极少：选择合适的稀释比例情况下，只需要极少的样本用于检测，极大促进了生物样品库微型化的进展。6.整个过程快速高效：整个检测过程，只需要几分钟就可以得到最后的检测结果。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，以下将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。图1为本专利技术实施例1中制备得到的基于金钯的基质中的纳米颗粒的聚集体的表征图片。图2为以本专利技术实施例2中采用基于金钯的基质检测葡萄糖标准品得到的质谱图；图3为采用本专利技术实施例3制备的基于金钯的基质检测检测血清的流程示意图；图4为本专利技术实施例3中检测血清的质谱图。具体实施方式下面将结合实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限制本专利技术的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。以下针对本专利技术实施例的血清质谱分析方法、基于金钯的基质及其制备方法、应用进行具体说明：基质辅助激光解吸电离质谱是一种能够简单、快速、精准地对多种生物分子进行检测的方法。但是，其也存在一定的局限性，对某些物质存在检测干扰大，结果准确性不够的问题。例如，专利技术人发现，现有的基质辅助激光解吸电离质谱分析多采用传统的有机基质，如α-氰基-4-羟基肉桂酸，CHCA；2，5-二羟基苯甲酸，DHB等，而上述的传统有机基质容易与分析物(被检测物质/待检测物质)形成的共结晶并不均匀，导致在低质量范围内也会出现大量的背景基质质谱信号，严重干扰小分子的测定。此外，对于简单的标准样品体系，基质辅助激光解吸电离质谱的检测限尚可达到10-15～10-18，但在如血清等生物样品中，还含有大量蛋白质、盐类等干扰物，极大影响了待测样品离子化效率。另外，传统的基质容易在小分子量端(m/z<1000)产生背景噪声，对于小分子的检测带来极大的干扰。且在实际的生物体系当中，生物样品通常十分复杂。各种生物大分子的存在，以及不同的酸碱度、含盐量都会对小分子的检测带来阻碍。基于现有技术的不足，专利技术人提出了一种新的基质，采用所述新的基质来进行基质辅助激光解吸电离质谱分析，可以有效地降低背景噪声干扰。本专利技术中提出的基质是基于金元素和钯元素的。前述基于金钯的基质包括纳米颗粒的聚集体。其中，纳米颗粒含有金元素和钯元素。金元素和钯元素均可以是以单质的形式存在于纳米颗粒中，即基质中含有金单质和钯单质的混合物。在一些示例中，金元素、钯元素分别以化合物的形式存在于纳米颗粒中。较佳地，金元素和钯元素以形成合金的形式存在于纳米颗粒中。本专利技术中，纳米颗粒为六边形结构，且其尺寸在100nm以下。在本专利技术的另一些示例中，纳米颗粒的尺寸可以被适当地缩小，例如，其尺寸为90nm以下，或80nm以下，或70nm以下，或60nm以下，或10～50nm。在基质的聚集体中，各个纳米颗粒的粒度应当均一，以使聚集体具有单分散性。换言之，本专利技术中，聚集体中的各个纳米颗粒的成分单一(完全相同和分析学上的可接受的相近或类似)，且各个纳米颗粒的粒度分布很窄(即粒径绝大部分相等)。例如，各个六边形的纳米颗粒具有大致相同的边长，且均包含金钯二元合金。较佳地，基质被进行适当的设计，从而使纳米颗粒具有紫外吸收特性。以上的基于金钯的基质可以通过以下方法被制备：步骤S101，提供含有十六烷基三甲基氯化铵、十六烷基三甲基溴化铵、柠檬酸三钠、氯金酸以及氯钯酸的水溶液。如前所述，本专利技术提出的基质是基于金元素和钯元素的，因此，所述的水溶液是作为金源和钯源被制作和提供的。作为一种可选的示例，金和钯是以氯金酸溶液和氯钯酸溶液的形式在水溶液中存在的。进一步地，为提高水溶液的稳定和分散性，其中还可以被添加适当的分散剂、稳定剂、表面活性剂等等。在本专利技术的较佳示例中，含金和钯的水溶液是通过分别将十六烷基三甲基氯化铵、十六烷基三甲基溴化铵、柠檬酸三钠、氯金酸以及氯钯酸分别用水溶解，再混合而成。氯金酸可以通过采用硝酸、盐酸的混合酸(王水)溶解金单质后，再将溶液蒸发即可，蒸发温度应当适当，以避免氯金酸在高温下发生分解。或者，将三氯化金溶解在盐酸中以产生氯金酸。氯钯酸可以通过王水溶钯，蒸发溶液即可。步骤S102，使前述的水溶液进行水热反应以形成聚集体，且聚集体由本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于金钯的基质，其特征在于，所述基于金钯的基质包括纳米颗粒的聚集体，所述纳米颗粒为六边形结构，所述纳米颗粒中含有金元素和钯元素，所述纳米颗粒的尺寸在100nm以下，在所述聚集体中所述纳米颗粒的粒度具有单分散性。

【技术特征摘要】
1.一种基于金钯的基质，其特征在于，所述基于金钯的基质包括纳米颗粒的聚集体，所述纳米颗粒为六边形结构，所述纳米颗粒中含有金元素和钯元素，所述纳米颗粒的尺寸在100nm以下，在所述聚集体中所述纳米颗粒的粒度具有单分散性。2.根据权利要求1所述的基于金钯的基质，其特征在于，所述纳米合金颗粒的尺寸范围为10～50nm，优选地，所述纳米颗粒具有紫外吸收特性，更优选地，所述纳米颗粒中的金、钯以合金和/或混合物的形式存在。3.一种基于金钯的基质的制备方法，其特征在于，包括：提供含有氯金酸以及氯钯酸的水溶液；使所述水溶液进行水热反应以形成聚集体，所述聚集体由含有金、钯的纳米颗粒的构成；将所述聚集体分散在分散液中。4.根据权利要求3所述的基于金钯的基质的制备方法，其特征在于，所述水溶液是通过将十六烷基三甲基氯化铵、十六烷基三甲基溴化铵、柠檬酸三钠、氯金酸以及氯钯酸分别用水溶解，再混合而成。5.根据权利要求3所述的基于金钯的基质的制备方法，其特征在于，所述水热反应...

【专利技术属性】
技术研发人员：万馨泽，刘彬，
申请(专利权)人：亿纳谱浙江生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33