一种液体培养获得针叶树种胚状体的方法及其培养基技术

技术编号:1719075 阅读:337 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种液体培养获得针叶树种胚状体及其培养基。本发明专利技术所提供的针叶树种胚状体液体培养基,包括诱导培养基、增殖培养基和成熟培养基。应用上述液体培养基,液体培养获得针叶树种胚状体的方法,包括如下步骤:诱导培养、增殖培养和成熟培养,得到所述胚状体。本发明专利技术通过对各个阶段培养基组分的优化,提高了胚性愈伤组织诱导频率,早期原胚质量大大改善,本方法比现有培养系统中每克胚性愈伤组织上发生5~25个子叶胚,畸形胚占到70%以上,且体细胞胚生根率0~7%等状况提高了几十倍,真正突破了针叶树体细胞胚规模化发生难关。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种针叶树种胚状体液体培养基,包括诱导培养基、增殖培养基和成熟培养基,其中,所述诱导培养基含有下述组分,pH为5.4-6.2:KNO↓[3]1836-2836mg/L,NH↓[4]NO↓[3]243-360mg/L, KH↓[2]PO↓[4]70-130mg/L,CaCl↓[2].2H↓[2]O300-450mg/L,MgSO↓[4].7H↓[2]O130-250mg/L,H↓[3]BO↓[3]2-11mg /L,ZnSO↓[4].7H↓[2]O3-7mg/L, MnSO↓[4].H↓[2]O6.5-10.5mg/L,Na↓[2]MoO↓[4].2H↓[2]O0.11-0.21mg/L,KI0.2 8-0.63mg/L,CuSO↓[4].5H↓[2]O0.01-0.035mg/L,CoCl↓[2]0.01-0.035mg/L,FeSO↓[4].7H↓[2]O13-21mg/L,Na↓[2]. EDTA.H↓[2]O15-27mg/L,肌醇50-1500mg/L,维生素B↓[1]0.4-0.6mg/L,谷氨酰胺400-700mg/L,蔗糖20,000-55,000mg/L,   2,4-二氯苯氧乙酸0.3-2.7mg/L,酸水解酪蛋白350-1050mg/L,6-苄氨基嘌呤0.05-3.1mg/L,激动素0.05-2.6mg/L,琼脂2,500-7,000mg/ L;所述增殖培养基含有下述组分,pH为5.4-6.2:KNO↓[3]1836-2836mg/L,NH↓[4]NO↓[3]243-360mg/L,KH↓[2]PO↓[4]70-130mg/L,  CaCl↓[2].2H↓[2]O300-450mg/L,MgSO↓[4].7H↓[2]O130-250mg/L,H↓[3]BO↓[3]2-11mg/L,ZnSO↓[4].7H↓[2]O3-7mg/ L,MnSO↓[4].H↓[2]O6.5-10.5mg/L,Na↓[2]MoO↓[4].2H↓[2]O0.11-0.21mg/...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:齐力旺张守攻韩素英王建华
申请(专利权)人:中国林业科学研究院林业研究所
类型:发明
国别省市:11[中国|北京]

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