【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种含有多拷贝表达盒的重组酵母表达质粒的快速构建方法,设酵母表达载体为V,含外源插入目的基因的表达盒为C,则含单拷贝表达盒的重组酵母表达质粒为V-C,其构建过程是:首先尽量靠近表达盒两侧边缘处选取一对同尾酶E2、E3,然后在载体非表 达盒部分选取一个在重组酵母表达质粒中仅具有唯一识别序列的限制性内切酶E1;再用E1+E2和E1+E3两组限制性内切酶分别对重组酵母表达质粒V-C进行限制性内切酶双酶切消化反应,分别回收含有表达盒C的DNA片段,将两种回收的DNA片段进行连接,形成的阳性重组质粒即是含二拷贝表达盒重组酵母表达质粒V-2C。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:马鹤雯,张立树,连继勤,张永亮,张玉静,
申请(专利权)人:马鹤雯,
类型:发明
国别省市:82[中国|长春]
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