The invention provides a gastric cancer stem cell culture medium, which is composed of basic medium and additives, the medium for the DME/F12, additives and in the basic culture medium was added respectively: B27 50 diluted 150 times, 100 times dilution, Glutamax ITS 2mM, non essential amino acids 0.1mM, 20 40ng/ml, epidermal growth factor basic fibroblast growth factor 10 20ng/ml, beta mercaptoethanol 0.1mM, glucose 3mg/ml, 1mM, 1mg/ml of sodium bicarbonate, sodium pyruvate acetyl cysteine 1mM and heparin 4ug/ml. The invention also provides a method for isolation of cell culture medium and the use of a gastric cancer stem, the invention provides a method of culture medium and separation, can effective separation of cultured gastric cancer stem cells from gastric cancer cell lines, the mechanism of comprehensive study of gastric cancer invasion and metastasis and to lay a solid theoretical foundation.
【技术实现步骤摘要】
一种胃癌干细胞培养基及胃癌干细胞分离培养方法
本专利技术属于细胞培养
,具体涉及一种胃癌干细胞培养基及胃癌干细胞分离培养方法。
技术介绍
肿瘤干细胞(cancerstemcells)是肿瘤基础研究领域的热点和难点问题。现代研究认为,肿瘤干细胞是肿瘤中具有自我更新特性和分化为不同肿瘤细胞能力的一种细胞,被认为参与了肿瘤的发生、维持和进展等诸多过程。人们最初在急性髓系白血病中获得了肿瘤干细胞存在的证据,随着研究不断扩展,人们发现肿瘤干细胞存在于多种实体肿瘤中,如胃癌、结肠癌、前列腺癌等。存在于胃癌中的肿瘤干细胞即胃癌干细胞(胃癌肿瘤干细胞,gastriccancerstemcell,GCSC),随着干细胞和肿瘤研究的深入,GCSC已成为胃癌基础研究的热点,近年来研究报道GCSC可从胃癌细胞株、原发胃癌组织及患者外周血中被分离,涉及的胃癌细胞株有胃癌细胞株SNU-5(见王佳佳等,人胃癌CD90+干细胞可能影响胃癌的转移和患者的预后,中国肿瘤生物治疗杂志,2013,20:230-236)和胃癌细胞系SGC7901(吴丽霞等,胃癌细胞的无血清悬浮培养与初步鉴定,世界华人消化杂志,2014,1531-1536)等。为了全面分析探索胃癌的发生发展,有必要扩展GCSC的来源细胞系,从更多的胃癌细胞系中分离出GCSC。
技术实现思路
针对上述问题,本专利技术的目的在于提供一种可有效分离培养胃癌干细胞的培养基及分离培养方法。本专利技术提供了一种胃癌干细胞培养基,它由基础培养基及添加物组成,其中,基础培养基为DME/F12,添加物及在基础培养基中的添加量分别为:B2750-1 ...
【技术保护点】
一种胃癌干细胞培养基,其特征在于:它由基础培养基及添加物组成,其中,基础培养基为DME/F12,添加物及在基础培养基中的添加量分别为:B27 50‑150倍稀释、ITS 100倍稀释、Glutamax 2mM、非必需氨基酸0.1mM、表皮细胞生长因子20‑40ng/ml、碱性成纤维细胞生长因子10‑20ng/ml、β巯基乙醇0.1mM、葡萄糖3mg/ml、丙酮酸钠1mM、碳酸氢钠1mg/ml、乙酰半胱氨酸1mM、肝素4ug/ml。
【技术特征摘要】
1.一种胃癌干细胞培养基,其特征在于:它由基础培养基及添加物组成,其中,基础培养基为DME/F12,添加物及在基础培养基中的添加量分别为:B2750-150倍稀释、ITS100倍稀释、Glutamax2mM、非必需氨基酸0.1mM、表皮细胞生长因子20-40ng/ml、碱性成纤维细胞生长因子10-20ng/ml、β巯基乙醇0.1mM、葡萄糖3mg/ml、丙酮酸钠1mM、碳酸氢钠1mg/ml、乙酰半胱氨酸1mM、肝素4ug/ml。2.根据权利要求1所述的培养基,其特征在于:添加物及在基础培养基中的添加量分别为:B2750倍稀释、ITS100倍稀释、Glutamax2mM、非必需氨基酸0.1mM、表皮细胞生长因子20ng/ml、碱性成纤维细胞生长因子10ng/ml、β巯基乙醇0.1mM、葡萄糖3mg/ml、丙酮酸钠1mM、碳酸氢钠1mg/ml、乙酰半胱氨酸1mM、肝素4ug/ml。3.根据权利要求1所...
【专利技术属性】
技术研发人员:胡建昆,陈小龙,杨昆,莫显明,
申请(专利权)人:四川大学华西医院,
类型:发明
国别省市:四川,51
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。