ＧＬＰ－１类似物融合蛋白质制造技术

本发明专利技术提供与特定ＩｇＧ４－Ｆｃ衍生物融合的特定ＧＬＰ－１类似物。这些融合蛋白质具有增加的半寿期、降低的免疫原性，并降低了效应子活性。这些融合蛋白质可用于治疗糖尿病、肥胖、肠易激综合征以及将通过降低血浆葡萄糖、抑制胃和／或肠运动和抑制胃和／或肠排空、或抑制食物摄入而受益的其他疾病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及胰高血糖素样肽类似物，该胰高血糖素样肽类似物与具有延长其体内半寿期作用的蛋白质融合。该融合蛋白质可用于治疗糖尿病及多种其他疾病或紊乱。胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物及衍生物在2型糖尿病治疗的临床试验中表现出前景。GLP-1诱导多种生物学效应，例如刺激胰岛素分泌、抑制胰高血糖素分泌、抑制胃排空、抑制胃运动或肠运动及诱导重量减轻。GLP-1的显著特征是其刺激胰岛素分泌而不伴有低血糖相关危险的能力，所述低血糖相关危险见于使用胰岛素治疗或通过增加胰岛素表达起作用的某些类型的口服治疗时。GLP-1(1-37)活性很低，并且GLP-1(7-37)OH和GLP-1(7-36)NH2这两种天然存在的截短的肽在体内被迅速清除并且具有极短的体内半寿期这一事实限制了涉及GLP-1肽的治疗的有效性。已知内源性产生的二肽基肽酶IV(DPP-IV)通过去除N末端组氨酸和丙氨酸残基而失活循环GLP-1肽，是体内短半寿期的主要原因。已经采取多种途径在保持生物学活性的同时延长GLP-1肽的清除半寿期或降低该肽从机体的清除。一条途径涉及将GLP-1肽与免疫球蛋白Fc部分融合。免疫球蛋白一般在体内具有长循环半寿期。例如，IgG分子在人体具有高达23天的半寿期。免疫球蛋白Fc部分是这种体内稳定性的部分原因。在保留GLP-1分子生物学活性的同时，GLP-1-Fc融合蛋白质具有由免疫球蛋白Fc部分提供的稳定性而保留GLP-1分子的生物活性的优点。尽管此途径对于GLP-1疗法(见WO 02/46227)是可行的，但是关于多种融合蛋白质长时期反复施用时的抗原性存在普遍的顾虑。对于GLP-1-Fc融合物疗法，这尤其是一个顾虑，因为糖尿病患者一旦经诊断为该疾病，必须一生接受治疗。此外，如果Fc部分保留不需要的效应子功能，Fc融合蛋白质疗法可能是一个顾虑。通过鉴定反复和长期施用后诱导免疫反应风险降低并且不再具有效应子功能的特定GLP-1-Fc融合蛋白质，本专利技术尝试克服与施用GLP-1-Fc融合物相关的关于潜在免疫原性和效应子活性的问题。这些特定的融合蛋白质在分子的GLP-1部分和Fc部分中具有多个位置的替换。此处所述的替换提供更大的潜能、增加的体内稳定性、效应子功能的消除以及该分子被免疫系统适应元件识别的可能性降低。本专利技术的化合物包括包含GLP-1类似物的异源融合蛋白质，其中GLP-1类似物包含的序列选自a)(SEQ ID NO1)His-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Glu-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-Gly其中Xaa8选自Gly和Val；b)(SEQ ID NO2)His-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Glu-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Gly其中Xaa8选自Gly和Val；c)(SEQ ID NO3)His-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Glu-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-Pro其中Xaa8选自Gly和Val；d)(SEQ ID NO4)His-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Glu-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro其中Xaa8选自Gly和Val；e)(SEQ ID NO5)His-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Glu-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly其中Xaa8选自Gly和Val；f)(SEQ ID NO6)His-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Glu-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly其中Xaa8选自Gly和Val；GLP-1类似物与免疫球蛋白Fc部分融合，其中免疫球蛋白Fc部分包含SEQ ID NO7的序列Ala-Glu-Ser-Lys-Tyr-Gly-Pro-Pro-Cys-Pro-Pro-Cys-Pro-Ala-Pro-Xaa16-Xaa17-Xaa18-Gly-Gly-Pro-Ser-Val-Phe-Leu-Phe-Pro-Pro-Lys-Pro-Lys-Asp-Thr-Leu-Met-Ile-Ser-Arg-Thr-Pro-Glu-Val-Thr-Cys-Val-Val-Val-Asp-Val-Ser-Gln-Glu-Asp-Pro-Glu-Val-Gln-Phe-Asn-Trp-Tyr-Val-Asp-Gly-Val-Glu-Val-His-Asn-Ala-Lys-Thr-Lys-Pro-Arg-Glu-Glu-Gln-Phe-Xaa80-Ser-Thr-Tyr-Arg-Val-Val-Ser-Val-Leu-Thr-Val-Leu-His-Gln-Asp-Trp-Leu-Asn-Gly-Lys-Glu-Tyr-Lys-Cys-Lys-Val-Ser-Asn-Lys-Gly-Leu-Pro-Ser-Ser-Ile-Glu-Lys-Thr-Ile-Ser-Lys-Ala-Lys-Gly-Gln-Pro-Arg-Glu-Pro-Gln-Val-Tyr-Thr-Leu-Pro-Pro-Ser-Gln-Glu-Glu-Met-Thr-Lys-Asn-Gln-Val-Ser-Leu-Thr-Cys-Leu-Val-Lys-Gly-Phe-Tyr-Pro-Ser-Asp-Ile-Ala-Val-Glu-Trp-Glu-Ser-Asn-Gly-Gln-Pro-Glu-Asn-Asn-Tyr-Lys-Thr-Thr-Pro-Pro-Val-Leu-Asp-Ser-Asp-Gly-Ser-Phe-Phe-Leu-Tyr-Ser-Arg-Leu-Thr-Val-Asp-Lys-Ser-Arg-Trp-Gln-Glu-Gly-Asn-Val-Phe-Ser-Cys-Ser-Val-Met-His-Glu-Ala-Leu-His-Asn-His-Tyr-Thr-Gln-Lys-Ser-Leu-Ser-Leu-Ser-Leu-Gly-Xaa230(SEQ ID NO7)其中16位的Xaa为Pro或Glu；17位的Xaa为Phe、Val、或Ala；18位的Xaa为Leu、Glu、或Ala；80位的Xaa为Asn或Ala；以及230位的Xaa为L本文档来自技高网...

【技术保护点】
异源融合蛋白质，其包含ＧＬＰ－１类似物，其中ＧＬＰ－１类似物包含选自如下的序列：ａ）（ＳＥＱＩＤＮＯ：１）Ｈｉｓ－Ｘａａ↓［８］－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－Ｐｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｖａｌ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｌｅｕ－Ｇｌｕ－Ｇｌｕ－Ｇｌｎ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ｌｙｓ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｉｌｅ－Ａｌａ－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ其中Ｘａａ↓［８］选自Ｇｌｙ和Ｖａｌ；ｂ）（ＳＥＱＩＤＮＯ：２）Ｈｉｓ－Ｘａａ↓［８］－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－Ｐｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｖａｌ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｌｅｕ－Ｇｌｕ－Ｇｌｕ－Ｇｌｎ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ｌｙｓ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｉｌｅ－Ａｌａ－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ｌｙｓ－Ａｓｎ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ其中Ｘａａ↓［８］选自Ｇｌｙ和Ｖａｌ；ｃ）（ＳＥＱＩＤＮＯ：３）Ｈｉｓ－Ｘａａ↓［８］－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－Ｐｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｖａｌ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｌｅｕ－Ｇｌｕ－Ｇｌｕ－Ｇｌｎ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ｌｙｓ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｉｌｅ－Ａｌａ－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐｒｏ其中Ｘａａ↓［８］选自Ｇｌｙ和Ｖａｌ；ｄ）（ＳＥＱＩＤＮＯ：４）Ｈｉｓ－Ｘａａ↓［８］－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－Ｐｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｖａｌ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｌｅｕ－Ｇｌｕ－Ｇｌｕ－Ｇｌｎ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ｌｙｓ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｉｌｅ－Ａｌａ－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ｌｙｓ－Ａｓｎ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐｒｏ其中Ｘａａ↓［８］选自Ｇｌｙ和Ｖａｌ；ｅ）（ＳＥＱＩＤＮＯ：５）Ｈｉｓ－Ｘａａ↓［８］－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－Ｐｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｖａｌ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｌｅｕ－Ｇｌｕ－Ｇｌｕ－Ｇｌｎ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ｌｙｓ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｉｌｅ－Ａｌａ－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ其中Ｘａａ↓［８］选自Ｇｌｙ和Ｖａｌ；ｆ）（ＳＥＱＩＤＮＯ：６）Ｈｉｓ－Ｘａａ↓［８］－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－Ｐｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｖａｌ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｌｅｕ－Ｇｌｕ－Ｇｌｕ－Ｇｌｎ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ｌｙｓ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｉｌｅ－Ａｌａ－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ｌｙｓ－Ａｓｎ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ其中Ｘａａ↓［８］选自Ｇｌｙ和Ｖａｌ；ＧＬＰ－１类似物与包含ＳＥＱＩＤＮＯ：７序列的免疫球蛋白Ｆｃ部分融合Ａｌａ...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：W格莱斯纳，RL小米利肯，AM维克，
申请(专利权)人：伊莱利利公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]