杜鹃兰人工种子制作方法技术

本发明专利技术属于植物人工种子生产技术领域，主要提供了紧缺难繁药用植物杜鹃兰的人工种子制作关键技术。具体涉及杜鹃兰原球茎的诱导增殖及原球茎悬浮系的建立，杜鹃兰人工种子的人工种皮包埋基质、人工胚乳及人工种子萌发基质的制备，杜鹃兰人工种子的贮藏及播种技术，为杜鹃兰规模化人工栽培提供了新的途径。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种杜鹃兰人工种子制作方法，其特征在于用杜鹃兰假鳞茎诱导产生的原球茎作为繁殖体制作人工种子，具体步骤为：（１）原球茎的诱导：将幼嫩、健壮的野生杜鹃兰假鳞茎经流水冲洗去泥土后，放入烧杯，加几滴洗洁净用水震荡１５～２０ｍｉｎ，此间用毛笔 刷洗假鳞茎表面，再用流水冲洗６～１２ｈ。在超净台上，先用７５％乙醇对假鳞茎表面消毒０．５～１ｍｉｎ，无菌水冲洗３～５次，再用０．１％ＨｇＣｌ↓［２］溶液浸泡１０～１５ｍｉｎ，最后用无菌水冲洗３～５次，置无菌滤纸上用无菌刀片将其切成带１～２个不定芽眼的小块，接种于１５０ｍｌ容量的装有４０ｍｌ培养基的三角瓶中，培养基预先在１２１℃下高压灭菌１５～２０ｍｉｎ；原球茎诱导培养基组成为：ＭＳ＋１．０～３．０ｍｇ.ｌ↑［－１］ＢＡ＋０．３～０．８ｍｇ.ｌ↑［－１］２，４－Ｄ＋２５．０～３５．０ｇ.ｌ↑［－１］蔗糖＋１０．０～１５．０ｍｇ.ｌ↑［－１］内生真菌提取物＋０．３～０．６ｇ.ｌ↑［－１］ＰＶＰ＋６．０～１０．０ｇ.ｌ↑［－１］琼脂，ｐＨ５．８～６．０；２５±１℃恒温培养，每日光照１２ｈ，光照强度为５５μｍｏｌ.ｍ↑［－２］.ｓ↑［－１］；（２）原球茎的增殖：将从杜鹃兰假鳞茎诱导出的原球茎接种于原球茎增殖培养基上，增殖培养基的组成及培养条件均与原球茎诱导相同；（３）原球茎悬浮系的建立及人工种子繁殖体的获得：将增殖后的原球茎按５～７ｇ／瓶 鲜重的接种量接种于盛有５０ｍｌ液体培养基的２５０ｍｌ三角瓶中，培养基组成为１／２ＭＳ＋１．０～３．０ｍｇ.ｌ↑［－１］ＢＡ＋０．５～０．８ｍｇ.ｌ↑［－１］２，４－Ｄ＋２５．０～３０．０ｇ.ｌ↑［－１］蔗糖＋１０．０～１５．０ｍｇ.ｌ↑［－１］内生真菌提取物，ｐＨ５．８～６．０；２５±１℃，漫射光下，摇床转速为６０ｒ.ｍｉｎ↑［－１］的条件下培养，每１０ｄ更换培养基１次，培养３５ｄ后，悬浮系中的原球茎可用作杜鹃兰人工种子的繁殖体；（４）人工种子的制作与贮藏：（ ａ）杜鹃兰人工种子的种皮基质为：３．０～５．０％海藻酸钠＋１．０～３．０％壳聚糖＋１．５～３．０％ＣａＣｌ↓［２］；（ｂ）杜鹃兰人工种子的胚乳成分为：０．２～０．４ｍｇ.ｌ↑［－１］ＮＡＡ＋０．１～０．２ｍｇ.ｌ↑［－１］ＧＡ↓［３ ］＋０．４～０．６ｍｇ.ｌ↑［－１］ＢＡ＋０．３～０．５ｍｇ.ｌ↑［－１］青霉素＋０．３～０．５％多菌灵粉剂＋０．２～０．３％苯甲酸钠＋１．０～...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张明生，吴树敬，张大栋，杨永华，王红，孙登云，缪律，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]