一种从脐带血中分离多能成体祖细胞的方法技术

本发明专利技术公开了一种从脐带血中分离多能成体祖细胞的方法，包括利用淋巴细胞分离液分离脐带血单个核细胞，在含有８～１５％胎牛血清的培养基中培养３天，弃去未贴壁的细胞，继而更换为含２～５％胎牛血清、人碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）、人表皮生长因子（ＥＧＦ）、人血小板衍生的生长因子（ＰＤＧＦ－ＢＢ）、ＭＣＤＢ－２０１、抗坏血酸、地塞米松和ＩＴＳ添加剂的培养基中继续贴壁培养，传代纯化分离。采用本发明专利技术的方法从脐带血中分离多能成体祖细胞，与其它方法相比，分离成功率高，所获细胞表型、细胞周期和诱导分化能力相同。因此，用此方法分离脐带血多能成体祖细胞可显著提高效率。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种从脐带血中分离多能成体祖细胞的方法，依次包括以下步骤：第一步：将体外脐带血用磷酸盐缓冲液等倍稀释，利用淋巴细胞分离液分离单个核细胞；第二步：将分离的脐带血单个核细胞在含有８～１５％胎牛血清的培养基中培养４８－７２小时，弃 去未贴壁的细胞；第三步：更换为含２～５％胎牛血清、人碱性成纤维细胞生长因子ｂＦＧＦ、人表皮生长因子ＥＧＦ、人血小板衍生的生长因子ＰＤＧＦ－ＢＢ、ＭＣＤＢ－２０１、抗坏血酸、地塞米松和１×胰岛素－转铁蛋白－亚硒酸钠ＩＴＳ添加剂的培养基 中继续贴壁培养；第四步：传代纯化分离脐带血多能成体祖细胞。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：邱录贵，李云涛，徐燕，孟恒星，于珍，韩俊领，
申请(专利权)人：中国医学科学院血液学研究所，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]