用于荧光原位杂交的变性杂交盒及其使用方法技术

本发明专利技术提供一种用于荧光原位杂交技术的变性杂交盒及其使用方法，属于生物技术领域。该变性杂交盒包括盒盖和盒体，盒体内设置可拆卸的玻片限位架，所述玻片限位架包括一个横向限位板及若干个与横向限位板呈十字交叉的竖向限位板。该变性杂交盒的使用方法包括湿条放置、玻片放置、变性和杂交。该变性杂交盒的结构简单、操作方便，可替代目前昂贵的荧光原位杂交仪，方便快捷地实现FISH实验中的变性和杂交操作，同时还能实现大量样本的批量检测，极大地降低了FISH检测的成本。

Denatured hybrid box for fluorescence in situ hybridization and its use

The present invention provides a denatured hybrid box for fluorescence in situ hybridization and a method for using it, which belongs to the field of biological technology. The denatured hybridization box comprises a box lid and a box body, and a detachable slide limiting rack is arranged inside the box body. The glass slide limit rack comprises a transverse limit plate and a plurality of vertical limit plates crossed with the transverse limit plates. The use of the denatured hybrid box includes the placement of wet strips, the placement of slides, denaturation and hybridization. The modified hybrid box has the advantages of simple structure and convenient operation. It can replace the current expensive fluorescence in situ hybridization instrument. It can realize the denaturation and hybridization operation in FISH experiment conveniently and quickly. At the same time, it can also achieve mass detection of a large number of samples and greatly reduce the cost of FISH detection.

【技术实现步骤摘要】
用于荧光原位杂交的变性杂交盒及其使用方法
本专利技术涉及一种变性杂交盒及其使用方法,尤其指一种用于荧光原位杂交技术的变性杂交盒及其使用方法，属于生物

技术介绍
荧光原位杂交（FluorescenceinsituhybridizationFISH）是一门新兴的分子细胞遗传学技术。FISH的原理是：根据核酸碱基互补配对原理，用半抗原标记DNA或者RNA探针与经过变性的单链核酸序列互补配对，通过带有荧光基团的抗体去识别半抗原进行检测，或者用荧光基团对探针进行直接标记并与目标序列结合，最后利用荧光显微镜直接观察目标序列在细胞核、染色体或切片组织中的分布情况。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进化研究待许多领域。FISH技术主要包括以下几个步骤：（1）样本玻片的制备；（2）样本玻片的预处理；（3）探针与样本的变性和杂交；（4）玻片洗涤；（5）结果观察。在FISH检测的整个过程中，探针与样本的变性和杂交是实验最关键的步骤，对检测结果的成功与否起了决定性的作用。为了完成FISH的杂交试验，很多实验室通常选择荧光原位杂交仪。一般的原位杂交仪包括变性/杂交、杂交和固定温度等几个操作模式，价格为5～10万元人民币。这些杂交仪在进行FISH试验时，使用成本很高。而且一台荧光原位杂交仪最大能检测12个样本，当样本量过多时需要配置更多的荧光原位杂交仪或调整实验步骤，极大地增加了实验室的负担。
技术实现思路
针对上述问题，本专利技术的目的是提供一种用于荧光原位杂交的变性杂交盒及其使用方法，替代目前昂贵的荧光原位杂交仪，方便快捷地实现FISH实验中的变性和杂交操作，同时还能实现大量样本的批量检测，极大地降低了FISH检测的成本。为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：一种用于荧光原位杂交的变性杂交盒，包括盒盖和盒体，盒体内设置可拆卸的玻片限位架，所述玻片限位架包括一个横向限位板及若干个与横向限位板呈十字交叉的竖向限位板。作为优选，横向限位板与竖向限位板通过凹槽形成可拆卸式连接。如此，根据玻片的宽度和个数，可以自由调整竖向限位板的间距和个数，以实现玻片的位置限定，防止玻片在盒体内滑动，同时对不同的玻片进行隔离，避免样品间污染。更进一步地，竖向限位板的边缘距离盒体内壁的最短距离为0.5-1.5cm。即竖向限位板的边缘并没有像横向限位板那样，与盒体内壁接触，而是有0.5-1.5cm的距离，方便玻片的取放。作为优选，在盒盖内表面的四周设置若干个湿条固定夹。湿条固定夹可以通过固定不同数量和规格大小的湿条，以实现玻片在变性和杂交过程中的不同湿度要求。为实现更大的湿度范围，以及为玻片提供更均匀的湿度环境，在盒体内部的四周设置湿条限位卡槽。作为优选，在盒盖外部上表面的四周设置凹陷围槽，盒体外部的下表面的四周设置与凹陷围槽相互配合的凸起围槽。凹陷围槽与凸起围槽相互配合，使得两个及以上的变性杂交盒形成稳固重叠。方便同时转移多个杂交变性盒。作为优选，盒体的外部两侧设置把手，方便操作人员取放变性杂交盒。作为优选，盒盖外部上表面的中央设置把手，方便盒盖的打开与关闭。为了方便多个变性杂交盒重叠，在盒盖上设置一个可以收纳把手的凹槽。作为优选，在盒体内部的底面设置温度感应器，对盒体底部的温度进行计量，以保证与盒体底部接触的玻片的杂交变性温度。一种上面所述的变性杂交盒的使用方法，包括以下步骤：（1）湿条放置：根据实验的湿度要求，用盒盖内的湿条固定夹和盒体内的湿条限位卡槽固定相应数量的湿条；（2）玻片放置：将封片完成的玻片放置在变性杂交盒盒体内部的底面，并通过玻片限位架对玻片进行位置限定和隔离；（3）变性：将放置有玻片的变性杂交盒转移到恒温加热装置中进行变性；（4）杂交：将变性完成的变性杂交盒转移到恒温加热装置中进行杂交；杂交完成后，将玻片从变性杂交盒中取出，即完成荧光原位杂交实验的变性杂交过程。作为优选，步骤（3）中所述的恒温加热装置为水浴锅，所述的变性温度为70-80℃，变性时间为3-10分钟。作为优选，步骤（4）中所述的恒温加热装置为恒温培养箱，所述的杂交温度为37-48℃，杂交时间为12-16h。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：（1）本专利技术提供的用于荧光原位杂交的变性杂交盒，在盒体内设置可拆卸的玻片限位架，对玻片进行位置限定，避免样品间污染。同时，在完成变性和杂交实验后，可以将玻片限位架取出，方便盒体内部的清洗，避免因清洗不彻底而造成检测批次间样品污染的情况。（2）本专利技术的横向限位板与竖向限位板通过凹槽形成可拆卸式连接。由于不同规格的玻片具有不同的宽度，横向限位板的上边缘有若干个凹槽，可以通过调整竖向限位板插入横向限位板上边缘凹槽的位置来实现与玻片宽度的一致性；此外，对于一些小规模试验，玻片样本较少，可以适当减少竖向限位板的个数，减少竖向限位板清洗的工作量，同时延长其使用寿命。（3）在本专利技术中，在盒盖内表面的四周设置若干个湿条固定夹，可以通过固定不同数量和规格大小的湿条，以实现玻片在变性和杂交过程中的不同湿度要求。为实现更大的湿度范围，以及为玻片提供更均匀的湿度环境，在盒体内部的四周设置湿条限位卡槽。（4）一般的荧光原位杂交仪最大能检测12个样本。本专利技术提供的变性杂交盒，每个杂交盒里就可以同时放置12个样本。并且本专利技术还在盒盖和盒体上设置相互配合的凹凸围槽，可以实现两个及以上的变性杂交盒形成稳固重叠，方便同时转移多个杂交变性盒，即可以同时实现更多样本的FISH检测，极大地提高了工作效率。（5）FISH实验的杂交变性温度变化一般为：常温→75℃→42℃。目前常用的荧光原位杂交仪，为了实现不同温度的转换，含有风扇和加热装置，但仍需要较长时间的升温和降温过程。而本实验新型提供的变性杂交盒，能够根据实验需求，将其快速转移到目的温度的恒温加热装置（如水浴锅、培养箱等）中，迅速实现实验所需要的温度。（6）本专利技术提供的用于荧光原位杂交的变性杂交盒，结构简单，价格低廉，使用方法简单，与实验室常规的恒温加热装置（如水浴锅、培养箱等）联合使用，替代昂贵的荧光原位杂交仪，便捷地完成FISH的变性和杂交操作，极大地降低了FISH检测的成本，并且还能同时处理更多的样本，极大地提高了工作效率。附图说明图1为变性杂交盒的盒体内部俯视图；图2为变性杂交盒的盒体结构示意图；图3为变性杂交盒的盒盖内表面示意图a；图4为变性杂交盒的盒盖内表面示意图b；图5为变性杂交盒的盒盖内表面示意图c；图6为变性杂交盒的盒盖外部上表面的结构示意图；其中，1为盒盖；2为盒体；3为玻片限位架；11为湿条固定夹；12为凹陷围槽；13为盒盖把手；21为湿条限位卡槽；22为凸起围槽；23为盒体把手；31为横向限位板；311为横向限位板凹槽；32为竖向限位板；321为竖向限位板凹槽；湿条4。具体实施方式本专利技术结合附图和具体实施例作进一步说明。应该理解，这些实施例仅用于说明目的，而不用于限制本专利技术范围。实施例1一种用于荧光原位杂交的变性杂交盒，包括盒盖和盒体。如图1所示，盒体2内设置可拆卸的玻片限位架3，玻片限位架3包括一个横向限位板31及若干个与横向限位板31呈十字交叉的竖向限位板32。图1中竖向限位板32的个数为4个本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于荧光原位杂交的变性杂交盒，包括盒盖和盒体，其特征在于，所述盒体内设置可拆卸的玻片限位架，所述玻片限位架包括一个横向限位板及若干个与横向限位板呈十字交叉的竖向限位板，所述横向限位板与竖向限位板通过凹槽形成可拆卸式连接；所述盒盖内表面的四周设置若干个湿条固定夹。

【技术特征摘要】
1.一种用于荧光原位杂交的变性杂交盒，包括盒盖和盒体，其特征在于，所述盒体内设置可拆卸的玻片限位架，所述玻片限位架包括一个横向限位板及若干个与横向限位板呈十字交叉的竖向限位板，所述横向限位板与竖向限位板通过凹槽形成可拆卸式连接；所述盒盖内表面的四周设置若干个湿条固定夹。2.根据权利要求1所述的变性杂交盒，其特征在于，所述竖向限位板的边缘距离盒体内壁的最短距离为0.5-1.5cm。3.根据权利要求1或2所述的变性杂交盒，其特征在于，所述盒体内部的四周设置湿条限位卡槽。4.根据权利要求1-3任一项所述的变性杂交盒，其特征在于，所述盒盖外部上表面的四周设置凹陷围槽，所述盒体外部下表面的四周设置与凹陷围槽相互配合的凸起围槽；所述盒体的外部两侧设置把手。5.根据权利要求1-4任一项所述的变性杂交盒，其特征在于，所述盒盖外部上表面的中央设置把手。6.根据权利要求1-5任一项所述的变性杂交盒，其特征在于，所述盒体内...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈建，万华靖，亓宇，王玲，
申请(专利权)人：成都新基因格生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51