KSP抑制剂与无糖基化抗‑TWEAKR抗体的抗体‑药物缀合物(ADC)制造技术

本发明专利技术的目的是提供在以相对低的浓度给药后显示出细胞凋亡作用并因此可用于癌症治疗的物质。为了实现该目的，本发明专利技术提供了无糖基化或无糖基抗‑TWEAKR抗体与式(I)的KSP抑制剂的缀合物，其中一个或多个式(I)的化合物经由连接体L连接至抗体上。无糖基化抗体是在Fc区的CH2结构域中保守的N‑结合位点处不具有多糖的抗体。所述抗体优选是人、人源化或嵌合的单克隆抗体。更优选地，所述抗体是抗‑TWEAKR抗体，其特异性结合至TWEAKR(SEQ ID NO:169)的位置47中的氨基酸D(D47)上，特别是抗‑TWEAKR抗体TPP‑2658。

KSP no glycosylation inhibitors and anti TWEAKR antibody antibody drug conjugates (ADC)

The aim of the present invention is to provide substances that show apoptosis after a relatively low concentration of drug and thus can be used for cancer treatment. In order to realize the purpose, the invention provides no glycosylation or glycation of anti TWEAKR antibody and type (I) conjugates of KSP inhibitors, one or more type (I) compounds via the connecting body is connected to the L antibody. Non glycosylated antibody N antibody is conserved CH2 domain in the Fc binding site in the Department does not have the polysaccharide. The antibodies are preferred to be human, humanized or chimeric monoclonal antibodies. More preferably, the antibody is anti TWEAKR antibody, which specifically binds to the TWEAKR (SEQ ID NO:169 D) amino acid position 47 of the (D47), especially the anti TWEAKR antibody TPP 2658.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】KSP抑制剂与无糖基化抗-TWEAKR抗体的抗体-药物缀合物(ADC)
技术介绍
本专利技术涉及纺锤体驱动蛋白抑制剂的结合体药物缀合物(ADC)、这些ADC的活性代谢物、制备这些ADC的方法、这些ADC用于治疗和/或预防疾病的用途，以及这些ADC用于制备用于治疗和/或预防疾病的药物的用途，所述疾病特别是过度增殖性和/或血管生成性疾病，例如癌症疾病。这类治疗可以作为单一疗法或与其他药物或进一步治疗措施组合进行。癌症是最多样化组织的不受控细胞生长的后果。在许多情况下，新的细胞渗透到现有组织中(侵袭性生长)，或者它们转移到远端器官中。癌症发生在各种不同的器官中，并且通常具有组织特异性病程。因此，术语“癌症”作为通用术语描述了不同器官、组织和细胞类型的大量确定疾病。一些早期肿瘤可通过手术和放射治疗措施除去。转移的肿瘤通常只能通过化疗缓和地治疗。此处的目标是实现改善生活质量和延长寿命的最佳组合。结合体蛋白(binderprotein)与一个或多个活性化合物分子的缀合物是已知的，特别是为抗体药物缀合物(ADC)(其中针对肿瘤相关抗原的内化抗体经连接体共价连接至细胞毒性剂上)的形式。在将ADC引入肿瘤细胞中且随后该缀合物解离之后，所述细胞毒性剂本身或由其形成的细胞毒性代谢物在肿瘤细胞内被释放，并且可在其中直接地和选择性地展现其作用。以这种方式，与传统化疗相比，对正常组织的损伤保持在明显较窄的范围内[参见，例如，J.M.Lambert，Curr.Opin.Pharmacol.5，543-549(2005)；A.M.Wu和P.D.Senter，Nat.Biotechnol.23，1137-1146(2005)；P.D.Senter，Curr.Opin.Chem.Biol.13，235-244(2009)；L.Ducry和B.Stump，BioconjugateChem.21，5-13(2010)]。因此，WO2012/171020描述了其中多个毒簇分子经聚合物连接体连接至抗体上的ADC。作为可能的毒簇，WO2012/171020尤其提到了以下物质：SB743921、SB715992(Ispinesib)、MK-0371、AZD8477、AZ3146和ARRY-520。最后提到的物质是纺锤体驱动蛋白抑制剂。纺锤体驱动蛋白(KSP，也称为Eg5、HsEg5、KNSL1或KIF11)是双极有丝分裂纺锤体发挥作用所必要的驱动蛋白样马达蛋白(motorprotein)。KSP的抑制导致有丝分裂阻滞，并且在相对较长的时间内导致细胞凋亡(Tao等人，CancerCell2005年7月8日(1)，39-59)。在发现第一种可渗透细胞的KSP抑制剂(Monastrol)之后，KSP抑制剂本身已成为一类新型化疗药物(Mayer等人，Science286：971-974，1999)，并且是许多专利申请的主题(例如WO2006/044825；WO2006/002236；WO2005/051922；WO2006/060737；WO03/060064；WO03/040979；及WO03/049527)。但是，由于KSP仅在有丝分裂期的相对短的时间内展现其作用，因此KSP抑制剂在此期间必须以足够高的浓度存在。WO2014/151030公开了包含某些KSP抑制剂的ADC。
技术实现思路
针对该
技术介绍
，本专利技术的一个目的是提供在以相对低的浓度给药后展现细胞凋亡作用并因此有益于癌症治疗的物质。为了实现该目的，本专利技术提供了无糖基化或无糖基抗-TWEAKR抗体与以下式(I)的化合物的缀合物，其中一个或多个式(I)的化合物经连接体L连接至抗体上。无糖基化抗体为这样的抗体：其在Fc区的CH2结构域中保守的N-结合位点处不具有任何多糖。所述抗体优选为人、人源化或嵌合单克隆抗体。特别优选特异性结合到TWEAKR(SEQIDNO:169)的47位中的氨基酸D(D47)上的抗-TWEAKR抗体，特别是抗-TWEAKR抗体TPP-2658。式(I)及其盐、溶剂合物和溶剂合物的盐：其中R1代表H、–L-#1、-MOD或-(CH2)0-3Z，其中Z代表-H、-NHY3、-OY3、-SY3、卤素、-CO-NY1Y2或-CO-OY3，其中Y1和Y2彼此独立地代表H、NH2、-(CH2CH2O)0-3-(CH2)0-3Z‘(例如-(CH2)0-3Z‘)或-CH(CH2W)Z‘，且Y3代表H或-(CH2)0-3Z‘，其中Z‘代表H、NH2、SO3H、COOH、-NH-CO-CH2-CH2-CH(NH2)COOH或-(CO-NH-CHY4)1-3COOH，其中W代表H或OH，其中Y4代表任选地被-NHCONH2取代的直链或支链的C1-6烷基，或代表任选地被-NH2取代的芳基或苄基；R2代表H、-MOD、-CO-CHY4-NHY5或-(CH2)0-3Z，其中Z代表-H、卤素、-OY3、-SY3、NHY3、-CO-NY1Y2或-CO-OY3，其中Y1和Y2彼此独立地代表H、NH2或-(CH2)0-3Z‘，且Y3代表H或-(CH2)0-3Z‘，其中Z‘代表H、SO3H、NH2或COOH；其中Y4代表任选地被-NHCONH2取代的直链或支链的C1-6-烷基，或代表任选地被-NH2取代的芳基或苄基，且Y5代表H或-CO-CHY6-NH2，其中Y6代表直链或支链的C1-6-烷基；R4代表H、-L-#1、-SGlys-(CO)0-1-R4’、-CO-CHY4-NHY5或-(CH2)0-3Z，其中SGlys代表可被溶酶体酶裂解的基团，特别是由二肽或三肽组成的基团，R4′代表可被以下基团单取代或多取代的C1-10-烷基、C5-10-芳基或C6-10-芳烷基、C5-10-杂烷基、C1-10-烷基-O-C6-10-芳基、C5-10-杂环烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂芳基烷氧基、C1-10-烷氧基、C6-10-芳氧基或C6-10-芳烷氧基、C5-10-杂芳烷氧基、C1-10-烷基-O-C6-10-芳氧基、C5-10-杂环烷氧基：-NH2、-NH-烷基、-N(烷基)2、NH-CO-烷基、N(烷基)-CO-烷基、-SO3H、-SO2NH2、-SO2-N(烷基)2、-COOH、-CONH2、-CON(烷基)2或-OH，代表-H或基团-Ox-(CH2CH2O)y-R4″(其中x代表0或1且n代表1至10的数，且R4″代表-H、-烷基(优选C1-12-烷基)、-CH2-COOH、-CH2-CH2-COOH或-CH2-CH2-NH2)，其中在裂解后，存在伯胺基团(相当于R4＝H)；其中Z代表-H、卤素、-OY3、-SY3、NHY3、-CO-NY1Y2或-CO-OY3，其中Y1和Y2彼此独立地代表H、NH2或-(CH2)0-3Z‘，且Y3代表H或-(CH2)0-3Z‘，其中Z‘代表H、SO3H、NH2或COOH；其中Y4代表任选地被-NHCONH2取代的直链或支链的C1-6-烷基，或代表任选地被-NH2取代的芳基或苄基，且Y5代表H或-CO-CHY6-NH2，其中Y6代表直链或支链的C1-6-烷基；或者R2与R4一起(形成吡咯烷环)代表-CH2-CHR11-或-CHR11-CH2-，其中R11代表H、NH2、SO3H、COO本文档来自技高网...

【技术保护点】
抗体与一种或多种下式的药物分子的缀合物：

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.12.15 EP 14197999.7;2015.06.15 EP 15172051.31.抗体与一种或多种下式的药物分子的缀合物：其中BINDER代表无糖基化抗-TWEAKR抗体，L代表连接体，n代表1至50、优选1.2至20且特别优选2至8的数；且KSP代表下式(I)的化合物及其盐、溶剂合物和溶剂合物的盐：式(I)：其中R1代表H、-L-#1、-MOD或-(CH2)0-3Z，其中Z代表-H、-NHY3、-OY3、-SY3、卤素、-CO-NY1Y2或-CO-OY3，其中Y1和Y2彼此独立地代表H、NH2、-(CH2CH2O)0-3-(CH2)0-3Z‘(例如-(CH2)0-3Z‘)或-CH(CH2W)Z‘，且Y3代表H或-(CH2)0-3Z‘，其中Z‘代表H、NH2、SO3H、COOH、-NH-CO-CH2-CH2-CH(NH2)COOH或-(CO-NH-CHY4)1-3COOH，其中W代表H或OH，其中Y4代表任选地被-NHCONH2取代的直链的或支链的C1-6烷基，或代表任选地被-NH2取代的芳基或苄基；R2代表H、-MOD、-CO-CHY4-NHY5或-(CH2)0-3Z，其中Z代表-H、卤素、-OY3、-SY3、NHY3、-CO-NY1Y2或-CO-OY3，其中Y1和Y2彼此独立地代表H、NH2或-(CH2)0-3Z‘，且Y3代表H或-(CH2)0-3Z‘，其中Z‘代表H、SO3H、NH2或COOH；其中Y4代表任选地被-NHCONH2取代的直链或支链的C1-6烷基，或代表任选地被-NH2取代的芳基或苄基，且Y5代表H或-CO-CHY6-NH2，其中Y6代表直链或支链的C1-6-烷基；R4代表H、-L-#1、-SGlys-(CO)0-1-R4’、-CO-CHY4-NHY5或-(CH2)0-3Z，其中SGlys代表可被溶酶体酶裂解的基团，特别是包含二肽或三肽的基团；R4’代表可被以下基团单取代或多取代的C1-10-烷基、C5-10-芳基或C6-10-芳烷基、C5-10-杂烷基、C1-10-烷基-O-C6-10-芳基、C5-10-杂环烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂芳基烷氧基、C1-10-烷氧基、C6-10-芳氧基或C6-10-芳烷氧基、C5-10-杂芳烷氧基、C1-10-烷基-O-C6-10-芳氧基、C5-10-杂环烷氧基基团：-NH2、-NH-烷基、-N(烷基)2、NH-CO-烷基、N(烷基)-CO-烷基、-SO3H、-SO2NH2、-SO2-N(烷基)2、-COOH、-CONH2、-CON(烷基)2或-OH，代表-H或基团-Ox-(CH2CH2O)y-R4″，(其中x代表0或1且n代表1至10的数，且R4”代表-H、-烷基(优选C1-12-烷基)、-CH2-COOH、-CH2-CH2-COOH或-CH2-CH2-NH2)；其中Z代表-H、卤素、-OY3、-SY3、NHY3、-CO-NY1Y2或-CO-OY3，其中Y1和Y2彼此独立地代表H、NH2或-(CH2)0-3Z‘，且Y3代表H或-(CH2)0-3Z‘，其中Z‘代表H、SO3H、NH2或COOH；其中Y4代表任选地被-NHCONH2取代的直链或支链的C1-6烷基，或代表任选地被-NH2取代的芳基或苄基，且Y5代表H或-CO-CHY6-NH2，其中Y6代表直链或支链的C1-6-烷基；或R2与R4一起(形成吡咯烷环)代表-CH2-CHR11-或-CHR11-CH2-，其中R11代表H、NH2、SO3H、COOH、SH、卤素(特别是F或Cl)、C1-4-烷基、C1-4-卤代烷基、C1-4-烷氧基、羟基取代的C1-4-烷基、COO(C1-4-烷基)或OH；A代表CO、SO、SO2、SO2NH或CNNH；R3代表-L-#1、-MOD或任选取代的烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂烷基、杂环烷基，优选-L-#1或可被以下基团取代的C1-10-烷基、C6-10-芳基或C6-10-芳烷基、C5-10-杂烷基、C1-10-烷基-O-C6-10-芳基或C5-10-杂环烷基：1-3个-OH基团、1-3个卤素原子、1-3个卤代烷基(各自具有1-3个卤素原子)、1-3-个O-烷基基团、1-3个-SH基团、1-3个-S-烷基、1-3个-O-CO-烷基、1-3个-O-CO-NH-烷基、1-3个-NH-CO-烷基、1-3个-NH-CO-NH-烷基、1-3个-S(O)n-烷基、1-3个-SO2-NH-烷基、1-3个-NH-烷基、1-3个-N(烷基)2基团、1-3个-NH2基团或1-3个-(CH2)0-3Z基团，其中Z代表-H、卤素、-OY3、-SY3、-NHY3、-CO-NY1Y2或-CO-OY3，其中Y1和Y2彼此独立地代表H、NH2或-(CH2)0-3Z‘且Y3代表H、-(CH2)0-3-CH(NHCOCH3)Z‘、-(CH2)0-3-CH(NH2)Z‘或-(CH2)0-3Z‘，其中Z‘代表H、SO3H、NH2或COOH(其中“烷基”优选代表C1-10-烷基)；R5代表H、NH2、NO2、卤素(特别是F、C1、Br)、-CN、CF3、-OCF3、-CH2F、-CH2F、SH或-(CH2)0-3Z，其中Z代表-H、-OY3、-SY3、卤素、NHY3、-CO-NY1Y2或-CO-OY3，其中Y1和Y2彼此独立地代表H、NH2或-(CH2)0-3Z‘，且Y3代表H或-(CH2)0-3Z‘，其中Z‘代表H、SO3H、NH2或COOH；R6和R7彼此独立地代表H、氰基、(任选氟化的)C1-10-烷基、(任选氟化的)C2-10-烯基、(任选氟化的)C2-10-炔基、羟基、NO2、NH2、COOH或卤素(特别是F、Cl、Br)，R8代表(任选氟化的)C1-10-烷基、(任选氟化的)C2-10-烯基、(任选氟化的)C2-10-炔基、(任选氟化的)C4-10-环烷基或-(CH2)0-2-(HZ2)，其中HZ2代表具有最多达两个选自N、O和S的杂原子的4至7元杂环，其中这些基团各自可被-OH、CO2H或NH2取代；R9代表H、F、CH3、CF3、CH2F或CHF2；其中取代基R1、R3和R4之一代表-L-#1，L代表连接体且#1代表与抗体连接的键，其中-MOD代表-(NR10)n-(G1)o-G2-H，其中R10代表H或C1-C3-烷基；G1代表-NHCO-、-CONH-或(其中，如果G1代表-NHCO-或则R10不代表NH2)；n代表0或1；o代表0或1；且G2代表直链和/或支链的烃基，所述烃基具有1至10个碳原子且可被一个或多个下述基团间隔一次或多次：-O-、-S-、-SO-、SO2、-NRy-、-NRyCO-、CONRy-、-NRyNRy-、-SO2NRyNRy-、-CONRyNRy-(其中Ry代表H、苯基、C1-C10-烷基、C2-C10-烯基或C2-C10-炔基，它们各自可被-NHCONH2、-COOH、-OH、-NH2、NH-CNNH2、磺酰胺、砜、亚砜或磺酸取代)、-CO-、-CRx＝N-O-(其中Rx代表H、C1-C3-烷基或苯基)，其中包括任意侧链的烃链可被-NHCONH2、-COOH、-OH、-NH2、NH-CNNH2、磺酰胺、砜、亚砜或磺酸取代，其中基团-MOD优选具有至少一个基团-COOH。2.权利要求1的缀合物，其中A代表CO(羰基)。3.权利要求1或2的缀合物，其中R1代表H、-L-#1、-COOH、-CONHNH2、-(CH2)1-3NH2、-CONZ“(CH2)1-3NH2或-CONZ“CH2COOH，其中Z“代表H或NH2。4.前述权利要求的一项或多项的缀合物，其中R2和R4代表H或R2与R4一起(形成吡咯烷环)代表-CHR11-CH2-或-CH2-CHR11-，其中R11代表H、COOH、F、Me、CH2F、OMe、CH2OH、COO(C1-4-烷基)或OH。5.前述权利要求的一项或多项的缀合物，其中R3代表-L-#1或可被卤素(特别是F)或任选氟化的C1-3-烷基单取代或多取代的苯基，或代表可任选地被下述基团取代的任选氟化的C1-10-烷基：-OY4、-SY4、-O-CO-Y4、-O-CO-NH-Y4、NH-CO-Y4、-NH-CO-NH-Y4、S(O)n-Y4(其中n代表0、1或2)、-SO2-NH-Y4、NH-Y4或N(Y4)2，其中Y4代表H、苯基(任选地被卤素(特别是F)或任选氟化的C1-3-烷基单取代或多取代)或烷基(其中所述烷基可被-OH、-COOH和/或-NHCO-C1-3-烷基取代，且其中烷基优选代表C1-3-烷基)。6.权利要求5的缀合物，其中所述缀合物具有下式(IIj)：其中R3代表-L#1；A代表CO；且R6、R7、R8和R9具有与权利要求1中的式(I)中相同的含义。7.权利要求1至5的一项或多项的缀合物，其中所述取代基R1代表-L#1。8.权利要求7的缀合物，其中缀合物具有式(IIk)：其中R1代表-L#1；A代表CO且R3代表-CH2OH；R3、R6、R7、R8和R9具有与权利要求1中的式(I)中相同的含义。9.前述权利要求的一项或多项的缀合物，其中R5代表H或F。10.前述权利要求的一项或多项的缀合物，其中R6和R7彼此独立地代表H、(任选氟化的)C1-3-烷基、(任选氟化的)C2-4-烯基、(任选氟化的)C2-4-炔基、羟基或卤素。11.前述权利要求的一项或多项的缀合物，其中R8代表支链的C1-5-烷基或环己基。12.前述权利要求的一项或多项的缀合物，其中R9代表H或F。13.前述权利要求的一项或多项的缀合物，其中所述抗-TWEAKR抗体特异性结合至TWEAKR(SEQIDNO：169)的位置47中的氨基酸D(D47)上，优选抗-TWEAKR抗体TPP-2658。14.前述权利要求的一项或多项的缀合物，其中连接体-L-具有以下基本结构(i)至(iv)中的一种：1.-(CO)m-SG1-L1-L2-(ii)-(CO)m-L1-SG-L1-L2-(iii)-(CO)m-L1-L2-(iv)-(CO)m-L1-SG-L2其中m代表0或1，SG和SG1代表体内可裂解的基团，L1彼此独立地代表体内不可裂解的有机基团，以及L2代表偶联至结合体的偶联基团。15.权利要求14的缀合物，其中体内可裂解的基团SG是2-8寡肽基团，优选二肽基团或二硫化物、腙、缩醛或缩醛胺，且SG1是2-8寡肽基团，优选二肽基团。16.前述权利要求的一项或多项的缀合物，其中所述连接体连接至半胱氨酸侧链或半胱氨酸残基上，并且具有下式：§-(CO)m-L1-L2-§§其中m代表0或1；§代表与活性化合物分子连接的键且§§代表与抗体连接的键，且-L2-代表其中#1表示与抗体的硫原子连接的点，#2表示与基团L1连接的点，L1-(NR10)n-(G1)o-G2-，其中R10代表H、NH2或C1-C3-烷基；G1代表-NHCO-或n代表0或1；o代表0或1；且G2代表具有1至100个碳原子的直链或支链的烃链，其来自亚芳基和/或直链和/或支链的和/或环状亚烷基并且其可被一个或多个以下基团间隔一次或多次：-O-、-S-、-SO-、SO2、-NH-、-CO-、-NMe-、-NHNH-、-SO2NHNH-、-NHCO-、-CONH-、-CONHNH-和具有最多达4个选自N、O和S的杂原子、-SO-或-SO2-的5至10元芳族或非芳族杂环(优选)，其中侧链，如果存在，可被-NHCONH2、-COOH、-OH、-NH2、NH-CNNH2、磺酰胺、砜、亚砜或磺酸取代；或代表以下基团中的一个：其中Rx...

【专利技术属性】
技术研发人员：HG·勒珍，S·威特罗克，Y·坎卓格兰德，B·斯特尔特路德维格，A·萨默，S·伯恩特，C·马勒特，AS·雷博斯托克，C·特吉望，S·格利文，
申请(专利权)人：拜耳医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：德国,DE