超螺旋质粒分离纯化工艺制造技术

本发明专利技术公开了一种超螺旋质粒分离纯化工艺，不使用动物源性的酶，不使用对人畜有毒的苯酚、氯仿等有机溶剂，优化了工艺原料的用量和步骤，降低了生产成本，减少了对环境的污染，提高了提取效率，为超螺旋质粒ＤＮＡ在制备基因治疗和基因疫苗药物方面的应用打下了坚实的基础。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种超螺旋质粒分离纯化工艺，其特征是包括以下步骤：（１）取发酵菌液，４℃、５０００ｇ离心２ｍｉｎ，去上清，得菌体沉淀；（２）ＳＴＥ洗脱液洗涤，于４℃、５０００ｇ条件下离心２ｍｉｎ，去上清，沉淀干燥得湿菌；（３）湿菌中加入溶液Ⅰ；（４）加入溶液溶液Ⅱ，轻轻混匀，室温放置３ｍｉｎ；（５）加入冰预冷溶液Ⅲ，轻轻混匀，冰上放置５ｍｉｎ，于４℃、１２０００ｇ条件下离心１５ｍｉｎ，取上清液；（６）上清液中加入硫酸铵调电导率至２８０－２８５ｍｓ／ｃｍ，４℃放置２０ｍｉｎ，于４℃、１２０００ｇ条件下离心１５ｍｉｎ，取上清液；（７）上清液经疏水层析柱层析，洗脱收集第２个峰；（８）第２个峰经分子筛柱层析，洗脱收集第１个峰。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：黄树林，李黄金，薄华本，邵红伟，沈娟，余雪松，
申请(专利权)人：广东药学院，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]