一种交联枯草杆菌蛋白酶晶体的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种工艺简单、性能稳定的交联枯草杆菌蛋白酶晶体的制备方法，包括如下步骤：（一）在４～６５℃下，将质量浓度为２％～１０％的枯草杆菌蛋白酶溶液和质量浓度为１０％～３０％的盐溶液按体积比１∶１～１∶５的比例混合，搅拌至溶液中有晶体析出；（二）将析出的晶体过滤并用盐溶液洗涤至少４次；（三）将晶体加入盐溶液中，得枯草杆菌蛋白酶晶体悬浊液；（四）将双功能交联剂慢慢加入到晶体悬浊液中，加入量为枯草杆菌蛋白酶晶体重量的１～５倍，搅拌３～１６小时；（五）将反应液经过滤或离心得交联枯草杆菌蛋白酶晶体粗品，将得到的粗品先用去离子水洗涤２～８次，再用缓冲液洗涤，直至得到所需的交联枯草杆菌蛋白酶晶体。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种交联枯草杆菌蛋白酶晶体的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：（一）在４～６５℃下，将质量浓度为２％～１０％的枯草杆菌蛋白酶溶液和质量浓度为１０％～３０％的盐溶液按体积比１∶１～１∶５的比例混合，在５０～１０００ｒｐｍ／ｍｉｎ的搅拌速度下，搅拌１小时～８天，溶液中有枯草杆菌蛋白酶晶体析出；（二）在４～３０℃下，将析出的晶体过滤，再经盐溶液洗涤至少４次。（三）将洗涤过的晶体加入盐溶液中，搅拌１～３小时，得枯草杆菌蛋白酶晶体悬浊液；（四）在４～４５℃，３００～１０００ｒｐｍ／ｍｉｎ的搅拌速度下，将双功能交联剂慢慢加入枯草杆菌蛋白酶晶体悬浊液中，加入量为枯草杆菌蛋白酶晶体重量的１～５倍，搅拌３～１６小时；（五）将反应液经过滤或离心得交联枯草杆菌蛋白酶晶体粗品，将得到的交联枯草杆菌蛋白酶晶体粗品先用去离子水洗涤２～８次，再用缓冲液洗涤，直到洗涤流出液在２８０ｎｍ下的紫外吸收值小于０．５停止洗涤，得到所需的交联枯草杆菌蛋白酶晶体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：姚亦明，袁方，李锐，
申请(专利权)人：张家港澳洁生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]