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一种分离、纯化及提取脂肪间充质干细胞的方法技术

技术编号:1711172 阅读:259 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及生物细胞提取及应用领域,提供一种分离、纯化及提取脂肪间充质干细胞的方法,包括以下步骤:首先无菌条件下脂肪源抽取,然后通过缓冲液浸泡、冲洗,再采用营养液水浴振荡消化,所得消化物过筛后取过滤液进行离心处理,获其基质微管层,沉淀部分除去红细胞,然后再离心处理后用营养液离心洗涤,将消化分离出的细胞用生理盐水稀释;接着将电泳槽用尼龙筛布均匀横向分为三格,按一定体积比置入氯化钾及葡萄糖酸钙溶液,交流电持续输入2~5分钟,然后将上述所得细胞溶液置入中间格电泳槽搅匀,直流电电泳15~30分钟,抽取正电极侧电泳槽内细胞液,即得脂肪间充质干细胞。该方法周期短,不会造成DNA双旋链上的基因排序紊乱或突变。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种分离、纯化及提取脂肪间充质干细胞的方法,其特征在于,主要包括以下步骤:    a、脂肪源抽取、分离、纯化    无菌条件下脂肪源抽取,然后通过缓冲液浸泡、冲洗,再采用营养液水浴振荡消化,所得消化物过筛后取过滤液进行离心处理,获其基质微管层,沉淀部分除去红细胞,然后再离心处理后用营养液离心洗涤,将消化分离出的细胞用生理盐水稀释;    b、间充质干细胞电泳、提取    将电泳槽用尼龙筛布均匀横向分为三格,按一定体积比置入氯化钾及葡萄糖酸钙溶液,交流电持续输入2~5分钟,然后将上述所得细胞溶液置入中间格电泳槽搅匀,直流电电泳15~30分钟,抽取正电极侧电泳槽内细胞液,即得脂肪间充质干细胞。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:刘岱良
申请(专利权)人:刘岱良
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]

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