山羊mTOR基因cDNA编码区3’端核苷酸序列制造技术

本发明专利技术涉及从山羊睾丸细胞分离的编码ｍＴＯＲ蛋白的ｃＤＮＡ和与它对应的氨基酸序列。本发明专利技术通过比较已知的人、大鼠、小鼠ｍＴＯＲ基因的核苷酸序列，找到保守区，在不打破氨基酸编码的前提下设计出了一对用于ＲＴ－ＰＣＲ扩增山羊ｍＴＯＲ基因ｃＤＮＡ编码区３’端片段的简并引物并用这对引物通过ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增出了特异性片段，测序后得到了羊ｍＴＯＲ基因ｃＤＮＡ的编码区３’端６１２ｂｐ的核苷酸序列和与它对应的氨基酸序列。获得的这６１２ｂｐ的核苷酸序列可进一步用于羊ｍＴＯＲ基因全长ｃＤＮＡ的克隆及用于通过ＲＴ－ＰＣＲ或杂交的方法检测ｍＴＯＲ基因的组织表达特异性，也可用于重组表达得到蛋白后制备检测ｍＴＯＲ的抗体。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
本专利技术涉及一段从山羊睾丸细胞分离的编码ｍＴＯＲ蛋白的ｃＤＮＡ，更具体地说涉及编码ｍＴＯＲ蛋白质的ｃＤＮＡ编码区３’端核苷酸序列和与它对应的氨基酸序列。目前应用ＲＴ－ＰＣＲ方法克隆基因并获得相应的核苷酸序列是获得基因（ｃＤＮＡ）核苷酸序列的常用方法。本项专利技术设计了一对简并引物并应用这对引物通过ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增出了山羊ｍＴＯＲ基因ｃＤＮＡ的编码区３’端特异性片段，经过测序后得到这一片段的６１２ｂｐ的核苷酸序列，其特征是在没有羊ｍＴＯＲ基因核苷酸序列的情况下，通过比较已知的人、大鼠、小鼠的ｍＴＯＲ基因的核苷酸序列，找到保守区，然后在不打破氨基酸编码的前提下设计ＰＣＲ简并引物，进而通过ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增出了山羊ｍＴＯＲ基因ｃＤＮＡ编码区３’端特异性片段，测序后得到了６１２ｂｐ的核苷酸序列和与它对应的氨基酸序列，这一山羊ｍＴＯＲ基因ｃＤＮＡ编码区３’端片段的核苷酸序列和与它对应的氨基酸序列在国内外是首次获得。基于上述说明的本专利技术的技术特征，本专利技术的独立权利要求表述为：一种自山羊分离的多核苷酸序列和与它对应的氨基酸序列，是下列序列之一：１）序列 表中ＳＥＱＩＤＮＯ：１的ｃＤＮＡ序列；２）与序列表中ＳＥＱＩＤＮＯ：１的ｃＤＮＡ序列对应的标注为ＳＥＱＩＤＮＯ：２的氨基酸序列。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：旭日干，吴应积，王志钢，
申请(专利权)人：旭日干，吴应积，王志钢，
类型：发明
国别省市：15[中国|内蒙]