IL-6结合蛋白制造技术

提供了包含与ＩＬ－６或其部分结合的单体结构域的多肽。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】IL-6结合蛋白与相关专利申请的交叉引用本专利申请要求于2005年7月13日提交的美国临时专利申请 60/699,137的优先权权益，所述美国临时专利申请为了所有目的引入作 为参考。专利技术背景白介素-6 (IL-6)在调节免疫应答和炎症中具有重要作用。IL-6具 有一系列生物活性，并以内分泌、自分泌和旁分泌方式作用于各种耙细 胞。IL-6的主要来源是单核细胞。成纤维细胞和内皮细胞连同T细胞和 B细胞、角质形成细胞、系膜细胞以及几种肿瘤细胞产生IL-6。 IL-6的 合成由IL-1、 IL-2、 TNF-P和千扰素诱导。IL-6被IL-4、 IL-10和IL-13 抑制。IL-6因此在免疫调节和炎症以及自身免疫疾病中起重要作用。IL-6具有刺激B淋巴细胞成熟的最后阶段的能力，由此B淋巴细胞 分化成成熟的浆细胞并分泌免疫球蛋白(Ig )。此外，IL-6通过增加IL-2 受体表达和IL-2产生来诱导T细胞生长和细胞毒性T细胞分化。IL-6 协同其他细胞因子以支持骨髓干细胞成熟，是嗜中性粒细胞激活物，并 刺激由巨核细胞产生血小板。它还是末端巨噬细胞和破骨细胞分化的有 效诱导物。IL-6还与IL-1和TNF共享几种活性，包括诱导发热和产生 急性期蛋白质，例如血清淀粉样蛋白A、 CRP、 ocl抗胰蛋白酶、纤维蛋 白原和触珠蛋白(haptoglobulin)。IL-6介导几种独特的抗炎作用。当IL-1和TNF- ot诱导彼此以及IL-6 的合成时，IL-6终止这个上调炎症级联并抑制IL-1和TNF-oc合成。IL-6 也是重要的细胞生长因子，它可以诱导表皮角质形成细胞和系膜细胞增殖，并且在系膜增生性肾小球肾炎中具有活性作用。IL-6的受体(IL-6R)属于I型细胞因子受体超家族，并由2条链 即IL-6R ( 80 kDa糖蛋白)和gpl30组成。IL-6R是配体特异性结合组 分，而gpl30是负责传递IL-6相关细胞因子的细胞内信号的共有受体组 分，所述IL-6相关细胞因子例如为白血病抑制因子(LIF)、睫状神经 营养因子、制瘤素M和IL-ll。IL-6与受体的结合导致gpl30形成二聚体，引起gpl30相关激酶 JAK1活化和随后的gpl30的酪氨酸磷酸化。尽管gpl30是普遍表达的， 但IL-6R是较受限制的。IL-6R和gpl30都具有可溶形式。IL-6和可溶 性IL-6R的复合物可以作用于只表达gpl30的细胞。这可能是可溶性受 体的重要促炎症机制。专利技术概述本专利技术提供了包含与IL-6结合(例如，选择性结合)的单体结构域 的多肽。在一些实施方案中，所述多肽包含与IL-6结合的单体结构域， 其中所述单体结构域是包含下述序列之一的LDL受体A类单体结构域CXXXQFQCXSGCXXXWCDGXNDCEDXSDEXXC ( SEQ ID NO: 2)或CX X FXCXXGQC PXXXXCDGX DCXDXSDEXXC ( SEQ ID NO: 3)，其中X是任意氛基酸，并且方括号中的氨基酸指出在特定位置处的 备选氨基酸。在一些实施方案中，所述多肽包含CXXXQFQCXSGCXXXWCDGXNDCEDXSDEXXC (SEQ ID NO: 2 )。在一些实施方案中，所述多肽包含CX X FXCXXGQC PXXXXCDGX DCXDXSDEXXC ( SEQ IDNO: 3)。在一些实施方案中，所述多肽包含至少一个且不超过6个结合IL-6 的单体结构域。在一些实施方案中，所述多肽包含至少2个结合IL-6的单体结构域。 在一些实施方案中，所述多肽包含对IL-6具有结合特异性的第一个单体 结构域，和对IL-6具有结合特异性的第二个单体结构域；其中所述第一个单体结构域包含CXXXQFQCXSGC XXXWCDGXNDCEDXSDEXXC (SEQ ID NO: 2);和所述第二个单体结构域包含CX X FXCXXGQC PXXXXCDGX DCXDXSDEXXC ( SEQ ID NO: 3)。在一些实施方案中，所述多肽包含CX X FXCXXGQC PXXXXCDGX DCXDXSDEXXCXnCXXXQ FQCXSGCXXXWCDGXNDCEDXSDEXXC (SEQ ID NO: 4)， 其中n是0-100。在一些实施方案中，n是3-15、 1-20、 0-30或0-50。在一些实施方案中，所述多肽包含任何下述序列(SEQ IDNO: 5-13):EANCAGSVPTCPSDEFRCRNGRCIPRAWRCDGVNDCADNSDEEDCTEHT;或EANCAGSVPTCPSDEFRCRNGRCIPRAWRCDGVNDCADNSDEEDCTEHT;或EANCAGSVPTCPSDEFRCRNGRCIPRAWRCDGVNDCADNSDEEDCTEHT;或EANCAGSVPTCPSDEFRCRNGRCIPRAWRCDGVNDCADNSDEADCAAPT;或EANCAGSVPTCPSDEFRCRNGRCIPRAWRCDGVNDCADNSDEEDCTEHT;或EANCAGSVPTCPSDEFRCRNGRCIPRAWRCDGVNDCADNSDEEDCTEHT;或在一些实施方案中，所述多肽包含任何下述序列(SEQ ID NO: 14—22):VCDGENDCEDGSDEANCAGSVPTCPSDEFRCRNGRCIPRAWRCDGVNDCADNSDEEDCTEHT;VCDGENDCEDGSDEANCAGSVPTCPSDEFRCRNGRCIPRAWRCDGVNDCADNSDEEDCTEH T;VCDGENDCEDGSDEANCAGSVPTCPSDEFRCRNGRCIPRAWRCDGVNDCADNSDEEDCTEHPPT;VCDGENDCEDGSDEANCAGSVPTCPSDEFRCRNGRCIPRAWRCDGVNDCADNSDEADCAAP T;VCDGENDCEDGSDEANCAGSVPTCPSDEFRCRNGRCIPRAWRCDGVNDCADNSDEEDCTEH T;VCDGENDCEDGSDEANCAGSVPTCPSDEFRCRNGRCIPRAWRCDGVNDCADNSDEEDCTEH T;或RT。在一些实施方案中，所述多肽包含本文显示的IL-6结合单体、二 聚体或三聚体序列之一。在一些实施方案中，所述多肽包含3个结合IL-6的单体结构域。 在一些实施方案中，所述多肽进一步包含对血液因子具有结合特异 性的单体结构域，从而当所述多肽被注射入动物中时，与缺乏所述血液 因子结合单体结构域的多肽的血清半衰期相比较，增加了所述多肽的血 清半衰期。在一些实施方案中，血液因子是血清白蛋白、免疫球蛋白或 红细胞。在一些实施方案中，对血液因子具有结合特异性的所述单体结构域 与免疫球蛋白UgG)结合，并且对血液因子具有结合特异性的所述单 体结构域是包含选自下述序列的序列的LDL受体A类单体结构域CXSSGRCIPXXWVCDGXXDCRDXSDE (SEQ ID NO: 23),和CXSSGRCIPXXWLCDGXXDCRDXSDE ( SEQ ID NO: 24 )，其中X是任意氨基酸。在一些实本文档来自技高网...

【技术保护点】
包含与ＩＬ－６选择性结合的单体结构域的多肽，其中所述单体结构域是包含下述序列（ＳＥＱＩＤＮＯ：１和２）之一的ＬＤＬ受体Ａ类单体结构域：ＣＸＸＸＱＦＱＣＸＳＧ［Ｗ，Ｙ］Ｃ［Ｉ，Ｌ，Ｆ］ＸＸＸＷ［Ｖ，Ｌ］ＣＤＧＸＮＤＣＥＤＸＳＤＥＸＸＣ或ＣＸ［Ａ，Ｐ］Ｘ［Ｅ，Ｑ］ＦＸＣＸＸＧＱＣ［Ｉ，Ｌ］ＰＸＸＸＸＣＤＧＸ［Ｄ，Ｎ］ＤＣＸＤＸＳＤＥＸＸＣ其中Ｘ是任意氨基酸，并且方括号中的氨基酸指出在特定位置处的备选氨基酸。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：A巴克尔，AN杜谷阿伊，Q刘，J斯尔沃曼，K穆尔，
申请(专利权)人：安进芒廷维尤公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]