本发明专利技术属于生物技术领域。具体涉及七鳃鳗解偶联蛋白（ｕｎｃｏｕｐｌｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ，ＵＣＰ）分子克隆。本发明专利技术应用简并引物和３′，５′－ＲＡＣＥ首次从七鳃鳗中克隆了ＵＣＰ基因，该基因具有解偶联功能。ＵＣＰ与机体的代谢相关。七鳃鳗是原口纲动物，在演化中占有重要地位。因此，了解ＵＣＰ的功能，对我们认识和了解生物代谢功能的演化规律具有重要意义。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物
，具体涉及七鳃鳗解偶联蛋白(uncoupling protein, UCP)分子克隆及功能研究。二、
技术介绍
线粒体的主要功能是参与能量代谢。当线粒体进行呼吸时，呼吸链传递电 子的同时，将质子从线粒体基质泵到膜间隙，形成线粒体跨膜电位。质子通过 驱动ATP合成酶合成ATP，从而回到线粒体基质，形成氧化与磷酸化的偶联。 定位于线粒体内膜的UCP能使线粒体膜间隙的质子回漏到基质中，从而降低线 粒体的膜电位，使氧化与磷酸化解偶联。目前共发现5个UCP家族成员，由于 UCP4和UCP5与其余3个成员同源性较远，是否为UCP家族成员仍有争论。氧化磷酸化解偶联是恒温动物产热以维持自身体温的机理之一。UCP1参与 恒温动物的非颤栗性产热已得到公认(Enerback S. et. al. Nature 387: 90 - 94， 1997)。尽管有许多研究表明，UCP2和UCP3可能参与ATP的合成、调节 活性氧(reactive oxygen spicies, ROS)的生成、参与脂肪酸的代谢等 (Vida:i-Puig AJ. et. al. J Biol Chem 275: 16258 - 16266, 2000. Arsenijevic D. et. al. Nat Genet 26: 435 - 439, 2000. Jos印h JW. et. al. J Biol Chem 279: 51049 - 51056， 2004. Jaburek M. et. al. J Biol Chem 279: 53097 - 53102， 2004)。但是，目前它们的功能仍有争论。如果我们能够寻找到UCP进化的祖先， 明确其功能，然后沿动物进化路线，脊索动物-圆口纲动物-鱼类-两栖类-爬行类 -啮齿类-人，逐一阐明不同进化层次动物UCP的功能，对我们了解变温动物向恒 温动物进化过程中，UCP功能的变化，以及这种变化对变温动物向恒温动物进化 的影响，无疑是有益的。UCP与多种疾病相关。如，糖尿病、心血管疾病以及肿 瘤等(Zhang CY et al Cell 105: 745 - 755， 2001. Murrav AJ et al Lancet 364: 1786-1788, 2004. Mills EM et al J Biol Chem 277:27385-27392,2002)。 了解七鳃鳗(圆口纲动物)UCP的功能有助于我们更深刻理解哺乳类和人的UCP 的功能，因此，有助于我们以UCP作为靶点，制备治疗这些疾病的药物。七鳃鳗属于圆口纲动物，在演化过程中占有重要地位。 一些器官的起源与发 育以及获得性免疫的起源等，均出现于此进化阶段。因此，是研究这些课题的理 想动物。弄清七鳃鳗是否具有UCP，以及UCP在七鳃鳗代谢过程中的作用，将有 助于我们理解七鳃鳗的代谢特点及生理习性。为进一步研究在组织和器官的起源 与发育、获得性免疫的起源、尤其是代谢的演化打下基础。 三、
技术实现思路
本专利技术的目的是克隆七鳃鳗的UCP基因并对其功能进行研究。七鳃鳗UCP序列acgcggggacaggacgaagtcgtcaagcactcccacacttcccactggcatctcgcttcttCC3CC3CC3ccatcacagc3gC3gC3gC3gctcgcatsggccgggctggtctccaggcac卿cggcgccctgctggaggaggacttctcgcccagcaactcgagtcgggggagcggsctggctgtgtttcgcggactgc犯caggatcgtattatgcgcttaaagagtcgcgtccccaccactcttatgga卿agccctggtccaagaattctgccaaacggtccactacagtgaaagggacgcgtttcgggsgtcttgatgagctgsgaacccttttcccatcaagatttcgggcagagtacacctacctgcatcttcatcacatcagtcccgctaccgcc3ccactaccacctctacc33ccctccgctcatttcgtgCt3t犯3atacattcagaattaggcttttttcacgttaacgttttgga犯tatccgccgcaagtcaacataacacgctcgcacagagggg已咖tggttggtcttcggcccacggatgttccgccgactgcggctgtg^gttC3tCggagccggcaccgcagcgtgcattgccgacctcatcacgttccctctggacacggctaaagtccgcctgc鄉tccagggcgagtgccagcgcggtggag郷gggcggcgcgctctgctggcgtacaataccgcggtgtgttcggcaccatcgcggccatggtgcgcacggagggcccgcgcagcctctacagcggcctcgtcgccgggctgcagcggcagatgagcttcgcctcggtccgcatcggcctctacgactccgtc犯gaacttctacaccaacggcgctgaacacgcggggattgggtgccgcctactggccggctgcaccaccggcgcgatggccgtgacctttgcgcagcccaccgatgtggtgaaggttcgattccaggcgc郷tga3C3tgCtgggcacctccaagcgctacagcgtgcctacaagaccatcgcacgggaggagggcgtccgtggcgcactggccccaacatcacgcgcaacgccatcgtgaactgcgcggagctcgtgacctatgacatc3tc犯ggacaccatcctcaagtacaaactgctgactgacaacctgccctgccacttcgtgtccgccttcggagcgggcttctgcaccaccgttgtggcgtctcctgtggatgtggtga卿cgcggt3catg^ctctgcccccggccggtatcccagtgccttcaactgtgcctacctcatgctggagccatggctttttacaaagggtttgtgccgtcgttcctgcgcctgggctcctggaacgtggtgatgttcgtcacgtacgagcagctc卿cgcggcatcatgatggcc犯gc3gtcatgggaggtgcccttctagaagg鄉ttgtgtgcggctccccaacggcccgtcgttccgtgcacgtgaccaagcacgtgaacggcggcc^gtggtgcaagacgtgtcgtcggacagaac3acattacgcacagc3a3attttgctcaataattattcttcttcttcatagggctcattgctccagccgttactgcccctgatctatgtttttaagtttttttttgcctgtgttgctcgtcacttgctttg犯actctttaattctcgt犯gtggcc卿tttaagttgacttgcggtg本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种七鳃鳗解偶联蛋白基因，其特征在于序列为：ａｃｇｃｇｇｇｇａｃａｇｇａｃｇａａｇｔｃｇｔｃａａｇｃａｃｔｃｃｃａｃａｃｔｔｃｃｃａｃｔｇｇｃａｔｃｔｃｇｃｔｔｃｔｔｃｃａｃｃａｃｃａｃｃａｔｃａｃａｇｃａｇｃａｇｃａｇｃａｇｃｔｃｇｃａｔａｇｇｃｃｇｇｇｃｔｇｇｔｃｔｃｃａｇｇｃａｃａａｇｃｇｇｃｇｃｃｃｔｇｃｔｇｇａｇｇａｇｇａｃｔｔｃｔｃｇｃｃｃａｇｃａａｃｔｃｇａｇｔｃｇｇｇｇｇａｇｃｇｇａｃｔｇｇｃｔｇｔｇｔｔｔｃｇｃｇｇａｃｔｇｃａａｃａｇｇａｔｃｇｔａｔｔａｔｇｃｇｃｔｔａａａｇａｇｔｃｇｃｇｔｃｃｃｃａｃｃａｃｔｃｔｔａｔｇｇａａｇａａｇｃｃｃｔｇｇｔｃｃａａｇａａｔｔｃｔｇｃｃａａａｃｇｇｔｃｃａｃｔａｃａｇｔｇａａａｇｇｇａｃｇｃｇｔｔｔｃｇｇｇａｇｔｃｔｔｇａｔｇａｇｃｔｇａｇａａｃｃｃｔｔｔｔｃｃｃａｔｃａａｇａｔｔｔｃｇｇｇｃａｇａｇｔａｃａｃｃｔａｃｃｔｇｃａｔｃｔｔｃａｔｃａｃａｔｃａｇｔｃｃｃｇｃｔａｃｃｇｃｃａｃｃａｃｔａｃｃａｃｃｔｃｔａｃｃａａｃｃｃｔｃｃｇｃｔｃａｔｔｔｃｇｔｇｃｔａｔａａａａｔａｃａｔｔｃａｇａａｔｔａｇｇｃｔｔｔｔｔｔｃａｃｇｔｔｔｇｔｇｇａａａａａａａｃｇｔｔｔｔｇｇａａａｔａｔｃｃｇｃｃｇｃａａｇｔｃａａｃａｔａａｃａｃｇｃｔｃｇｃａｃａｇａｇｇｇｇａａａａｔｇｇｔｔｇｇｔｃｔｔｃｇｇｃｃｃａｃｇｇａｔｇｔｔｃｃｇｃｃｇａｃｔｇｃｇｇｃｔｇｔｇａａｇｔｔｃａｔｃｇｇａｇｃｃｇｇｃａｃｃｇｃａｇｃｇｔｇｃａｔｔｇｃｃｇａｃｃｔｃａｔｃａｃｇｔｔｃｃｃｔｃｔｇｇａｃａｃｇｇｃｔａａａｇｔｃｃｇｃｃｔｇｃａｇｇｔｃｃａｇｇｇｃｇａｇｔｇｃｃａｇｃｇｃｇｇｔｇｇａｇａｇｇｇｇｇｃｇｇｃｇｃｇｃｔｃｔｇｃｔｇｇｃｇｔａｃａａｔａｃｃｇｃｇｇｔｇｔｇｔｔｃｇｇｃａｃｃａｔｃｇｃｇｇｃｃａｔｇｇｔｇｃｇｃａｃｇｇａｇｇｇｃｃｃｇｃｇｃａｇｃｃｔｃｔａｃａｇｃｇｇｃｃｔｃｇｔｃｇｃｃｇｇｇｃｔｇｃａｇｃｇｇｃａｇａｔｇａｇｃｔｔｃｇｃｃｔｃｇｇｔｃｃｇｃａｔｃｇｇｃｃｔｃｔａｃｇａｃｔｃｃｇｔｃａａｇａａｃｔｔｃｔａｃａｃｃａａｃｇｇｃｇｃｔｇａａｃａｃｇｃｇｇｇｇａｔｔｇｇｇｔｇｃｃｇｃｃｔａｃｔｇｇｃｃｇｇｃｔｇｃａｃｃａｃｃｇｇｃｇｃｇａｔｇｇｃｃｇｔｇａｃｃｔｔｔｇｃｇｃａｇｃｃｃａｃｃｇａｔｇｔｇｇｔｇａａｇｇｔｔｃｇａｔｔｃｃａｇｇｃｇｃａｇｇｔｇａａ...
【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：孙国勋，陈坤，张辰宇，项阳，王修强，陈均远，张峻峰，张红杰，徐威，邹季虹，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：84[]
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