Kefir粒人参发酵液制造技术

本发明专利技术公开了一种Kefir粒人参发酵液及马克斯克鲁维酵母人参发酵液，Kefir粒人参发酵液，是按重量百分比将kefir粒接种到人参浆中发酵，发酵后稀有皂苷Rg3提高了134.7 %，人参皂苷Rd提高了104.5%，同时增加了人参果香味和烧烤香味；马克斯克鲁维酵母人参发酵液，是按重量百分比将马克斯克鲁维酵母接种到人参浆中发酵，发酵后人参皂苷Rg3含量为3.31mg/g，同时产生特殊的香气；本发明专利技术利用Kefir粒发酵人参，食用安全，同时改善了人参口感，提高了稀有皂苷的含量，使人参药用价值更高、肠道吸收功能性强。

Kefir granule ginseng fermentation broth

The invention discloses a Kefir particle ginseng broth and Marx Kluyveromyces ginseng broth, Kefir grain ginseng fermented liquid is according to weight percent of kefir particle was inoculated into ginseng pulp fermentation, after fermentation of rare ginsenoside Rg3 increased 134.7%, ginsenoside Rd increased 104.5%, while increasing the ginseng fruit flavor and barbecue flavor; Marx Kluyveromyces ginseng broth, according to the weight percentage of fermentation Marx Kluyveromyces inoculated into ginseng paste, fermented after ginsenoside Rg3 content is 3.31mg/g, also produced a special aroma; using Kefir grain fermentation ginseng food safety, the invention improves the taste, increased the content of ginseng, ginsenoside. The medicinal value of ginseng is higher, the intestinal absorption function is strong.

【技术实现步骤摘要】
Kefir粒人参发酵液
本专利技术属于发酵工程
，具体涉及Kefir粒人参发酵液、马克斯克鲁维酵母人参发酵液。
技术介绍
人参皂苷是人参（PanaxginsengC.A.Mey.entum）中主要生物活性成分之一，属于四环三萜皂苷，而皂苷化学结构是由苷元骨架和糖基，通过Glc-相连而形成的一种糖苷类化合物，因不同的苷元骨架与不同的糖基侧链形成了不同的人参皂苷，人参皂苷具有抗衰老、抗氧化、抗肿瘤和抗炎等多种功效。人参皂苷在自然生长人参中含量多少可分为分为主人参皂苷和稀有人参皂苷，稀有人参皂苷（如人参皂苷Rg3、人参皂苷Rh2、人参皂苷CK等）在抗肿瘤等方面具有更强的药理活性，将人参中含量丰富的人参皂苷（Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rg1、Rf等）转化为药用价值更高、肠道吸收功能更强的稀有人参皂苷（Rh1、Rh2、F1、F2、Rg3、Rb3、Rh2、compoundK等）成为现代研究的重点之一。稀有人参皂苷Rg3具有抑制肿瘤细胞增殖、浸润、转移作用，抑制胃癌诱导的血管内皮细胞增殖作用等备受关注。人参皂苷Rg3肿瘤细胞的抑制，首先是通过抑制肿瘤新血管生成。小剂量应用时即可产生，最适合预防肿瘤发生和肿瘤的复发、转移，并且无其他抗癌药物常见的毒副作用，完全可以长期使用。Rg3在较大计量时还能抑制肿瘤瘤细胞的增殖、浸润，诱导肿瘤细胞凋亡。然而自然生长的人参中人参皂苷Rg3含量极少，可以通过化学法、酶法和微生物法达到转化的目的。微生物法转化原理主要在于微生物所分泌的β-葡萄糖苷酶为主的酶系对人参皂苷进行转化。邵巍等在《GS0202菌产人参皂苷-β-葡萄糖苷酶条件及其酶的反应条件》中报道，利用β-葡萄糖苷酶将人参皂苷Rb1的C-21位两个-GLc键水解，进而转化为稀有人参皂苷Rg3；闫炳雄等在《黑曲霉固体发酵三七药材的皂苷变化研究》中，发现经黑曲霉发酵人参后，也可生成人参皂苷Rg3，并得到较好的转化效果。开菲尔粒(KefirGrain)是开菲尔的菌种，Kefir粒是一种多菌种共生的可食用微生物资源，常用来发酵牛乳、羊乳等制成酸乳制品，与普通酸乳制品相比，开菲尔乳最大的特点是，发酵过程中会产生二氧化碳，使得该制品有碳酸饮料的独特口感，所以该产品又被称为牛奶酒或酸乳酒。有研究表明Kefir粒发酵液中含有β-葡萄糖苷酶在内的丰富酶系，其中β-葡萄糖苷酶是转化人参皂苷的重要酶之一，但目前利用Kefir粒发酵人参的研究鲜有报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决人参口味不佳的问题，而提供一种口味好、人参皂苷Rg3含量高、食用安全的Kefir粒人参发酵液及马克斯克鲁维酵母人参发酵液。Kefir粒人参发酵液，它是由下述方法制备的：按重量百分比，将3-6%kefir粒接种到人参浆中，26-30℃条件下发酵60-84h；所述的发酵时间72h；所述的人参浆为将人参蒸制15-25min，加水打浆，高温灭菌。马克斯克鲁维酵母人参发酵液，它是由下述方法制备的：按重量百分比，将2-6%马克斯克鲁维酵母接种到人参浆中，26-30℃条件下发酵36-72h；所述的重量百分比为3%；所述的发酵时间为48h；所述的人参浆为将人参蒸制15-25min，加水打浆，高温灭菌；所述的马克斯克鲁维酵母它的保藏编号为CGMCC13907。本专利技术提供了一种Kefir粒人参发酵液及马克斯克鲁维酵母人参发酵液。Kefir粒人参发酵液，是按重量百分比将kefir粒接种到人参浆中发酵，发酵后稀有皂苷Rg3提高了134.7%，人参皂苷Rd提高了104.5%；马克斯克鲁维酵母人参发酵液，是按重量百分比将马克斯克鲁维酵母接种到人参浆中发酵，发酵后人参皂苷Rg3含量为3.31mg/g；本专利技术利用Kefir粒发酵人参，食用安全，同时改善了人参口感，提高了稀有皂苷的含量，使人参药用价值更高、肠道吸收功能性强。马克斯克鲁维酵母发酵人参后产生特殊的香气，给人们一种非常愉悦的感受；对kefir粒发酵人参后香气成分进行分析，发现发酵后的人参增加了果香味和烧烤香味，同时降低其不良风味。附图说明图1产β-葡萄糖苷酶菌菌株的培养形状与形态特征；A.c21菌株在改良七叶苷培养基中的形态；B.c21菌株在种子培养基中的形态；C.c21菌株在显微镜（×100）下的形态；图2待测菌株（C21）26SrDNAD1/D2区域的PCR；图3依据26SrDNA序列的系统发育树；图4参水比、接种量、发酵时间对人参皂苷Rg3影响。具体实施方式实施例1Kefir粒发酵人参浆挑选无病虫害的完整鲜人参，清洗干净，蒸制20min，按照参水质量比（g/g）1:2、5000rpm/min多次点动共计3min打浆，110℃灭菌20min。按kefir粒5%（w/w）的接种量接种到人参浆中，28℃条件下培养3d；同等培养条件下加入相等体积的无菌水，作为未发酵人参空白对照组。发酵结束后立即冷冻，随后使用真空冷冻进行干燥，干燥后样品真空包装，在-4℃下储存备用。HPLC法与TLC法相结合分析人参浆中人参皂苷Rg3的转化情况。所述的HPLC法分析条件：C18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；柱温35℃；进样量10μL；流速1mLmin-1；流动相A为含5%磷酸的水溶液、B为乙腈，洗脱条件是0～45min，33%B，45～80min，49%B；检测波长为203nm。所述的TLC法，是将人参皂苷点样于薄层层析硅胶板上，展开剂为氯仿-甲醇-水(10:5:1V/V/V)，喷20%硫酸-乙醇溶液后于110℃显色5min。用薄层扫描仪扫描其灰度，计算皂苷转化率。人参皂苷Rg3有多种转化途径，其中一条转化途径为人参皂苷Rb1→Rd→Rg3。本实验测定发酵人参浆中人参皂苷Rb1、Rd和Rg3的变化，结果如表1所示。很显然，kefir粒发酵后大大增加了Rg3的含量，稀有皂苷Rg3提高了134.7%；同时，发酵人参中人参皂苷Rb1比未发酵组降低了41.3%，人参皂苷Rd提高了104.5%。因此可以推测，kefir粒发酵人参转化人参皂苷Rg3可能的转化途径为Rb1→Rd→Rg3，表明β-葡萄糖苷酶在该转化途径中起重要作用。注：表中所有数据均为平均值±标准偏差(n=3)，涉及到人参皂苷含量均为占人参干重。实施例2产β-葡萄糖苷酶的菌株的筛选kefir粒在28℃下发酵人参浆48h后，将其按10-3、10-4、10-5、10-6四个梯度稀释，各取50μL菌液均匀涂布于改良七叶苷培养基，25℃培养48h，菌落周围出现黑色的水解斑则为产β-葡萄糖苷酶菌株。Kefir粒发酵人参菌液涂布于改良七叶苷培养基上培养36h后，筛选出产黑色水解斑的菌株C21（图1A），判断其为产β-葡萄糖苷酶菌菌种。将该菌株接入固体种子培养基后观察发现菌落呈乳白色、平滑、不透明，表面光滑，菌落易挑起（图1B）。显微镜（×100）下观察形态结果如图1C所示，初步鉴定结果为一株产酵母菌。所述的改良七叶苷琼脂糖培养基，为1g七叶苷、0.5g柠檬酸铁、2g酵母膏、0.5g蛋白胨、20g琼脂，经121℃高压蒸汽灭菌20min；种子培养基配方为10g酵母粉、20g蛋白胨、20g葡萄糖、20g琼脂、1000mL蒸馏水、调至pH6.0、经121℃高压蒸汽灭菌20min。实施例3产β-葡萄本文档来自技高网...

【技术保护点】
Kefir粒人参发酵液，它是由下述方法制备的：按重量百分比，将3‑6%kefir粒接种到人参浆中，26‑30℃条件下发酵60‑84h。

【技术特征摘要】
1.Kefir粒人参发酵液，它是由下述方法制备的：按重量百分比，将3-6%kefir粒接种到人参浆中，26-30℃条件下发酵60-84h。2.根据权利要求1所述的Kefir粒人参发酵液，其特征在于：所述的发酵时间72h。3.根据权利要求1或2所述的Kefir粒人参发酵液，其特征在于：所述的人参浆为将人参蒸制15-25min，加水打浆，高温灭菌。4.马克斯克鲁维酵母人参发酵液，它是由下述方法制备的：按重量百分比，将2-6%马克斯克鲁维酵母接种到人参浆中，2...

【专利技术属性】
技术研发人员：朴春红，赵梓瀛，王玉华，刘俊梅，于寒松，代伟长，苏敏，初琦，
申请(专利权)人：吉林农业大学，
类型：发明
国别省市：吉林,22