一种苦瓜强雌系重组自交系群体的构建方法技术

本发明专利技术提供了一种苦瓜强雌系重组自交系群体的构建方法，该技术方案包括群体构建基地要求、播种时间、育苗、整地施肥、定植、肥水管理、搭架整枝、人工授粉、病虫害防治，采种，种子贮藏等步骤，通过单株自交，尽量从F2到F6将每个单株都保存下来，群体中单株特性也比较完整。本方法可获得从F2到F6足够大的重组自交系群体，重组自交系(RI)群体的优点是可以长期使用，可以进行重复试验。因此它除了可用于构建分子标记连锁图外，特别适合于数量性状基因座(QTL)的定位研究。本发明专利技术方法保证了苦瓜强雌系重组自交系群体中每个单株尽量得以保留，其操作简单，群体的完整性更强。

Construction of a recombinant inbred line of bitter melon strong female lines

The present invention provides a method for constructing a gourd pistillate line recombinant inbred lines, the technical scheme includes group construction base requirements, sowing time, seedling, soil fertilizer, planting, fertilizer and water management, shelf pruning, artificial pollination, pest control, seed collection, seed storage and other steps, through the individual self, as far as possible from F2 to F6 of each plant are preserved in the individual characteristics of groups are relatively complete. This method can obtain large enough recombined inbred lines from F2 to F6, and the advantages of the recombinant inbred line (RI) population can be used for a long time and can be repeated. Therefore, it is especially suitable for the localization of quantitative trait loci (QTL), in addition to the construction of molecular marker linkage map. The method of the invention ensures that each single plant of the strong female line of bitter gourd is preserved as much as possible, and its operation is simple and the integrity of the population is stronger.

【技术实现步骤摘要】
一种苦瓜强雌系重组自交系群体的构建方法
本专利技术涉及农作物育种
，具体涉及一种苦瓜强雌系重组自交系群体的构建方法。
技术介绍
苦瓜(MomordicacharantiaL.)，葫芦科苦瓜属(Momordica)蔓性一年生植物，起源于热带、亚热带地区，广泛分布于南美亚马逊地区、非洲、亚洲、加勒比地区等地，近些年，在我国南方地区发展比较迅速。由于苦瓜中含有丰富的维生素C、苦味甙和苦味素(苦瓜素被誉为“脂肪杀手”能使捏取脂肪和多糖减少)、一种类似胰岛素的物质(多肽-P)及一种蛋白脂类物质(具有刺激和增强动物体内免疫细胞吞食癌细胞的能力，它可同生物碱中的奎宁一起在体内发挥抗癌作用)，使其具有清热益气、保护机体、抗癌、降血糖、降血脂、美容肌肤等功效。进入21世纪，随着人们对苦瓜独特的营养保健功效的深入认识和现代药理学对苦瓜药用价值的新发现，苦瓜产业的发展越来越受到人们的重视，那么苦瓜育种工作自然而然的受到很多育种家的关注。生物产量是经济产量的基础，现有技术的苦瓜作物在生物产量方面已经达到较高水平，在这种情况下如何提高经济产量便成了苦瓜育种的首要目标。生产实践表明，限制苦瓜作物经济产量的首要因子是植株的雌雄花比例，那么强雌性或者强雌系的研究就成为苦瓜育种的关键问题。因此，开展苦瓜强雌系育种工作对我国苦瓜育种体系进一步完善意义重大，而苦瓜强雌系重组自交系群体的构建是加速苦瓜育种进程的一种有效方法。
技术实现思路
本专利技术旨在针对现有技术的技术缺陷，提供一种苦瓜强雌系重组自交系群体的构建方法，以解决现有技术的强雌系育种方法所得的苦瓜强雌系重组自交系(RI)群体中，单株保留率较低、群体完整性较弱的技术问题。为实现以上技术目的，本专利技术采用以下技术方案：一种苦瓜强雌系重组自交系群体的构建方法，包括以下步骤：1)对基地及大棚的选择：选择沙壤土或粘质壤土的基地，土壤pH值5.5～6.5，前茬为非瓜类作物；选择顶高2.5m以上的钢管大棚或连栋大棚，顶部盖膜防雨；2)整地施肥：在大棚内作畦，畦高0.25m；畦中央挖沟，于其中以每667m2土地面积对应N-P2O5-K2O＝15-15-15水平的硫酸钾型复合肥80kg、钙镁磷肥50kg、腐熟有机肥2000kg的比例施放基肥；施肥后整平，铺设滴灌软管，春季覆盖黑色地膜，秋季覆盖银灰色地膜；3)营养土配制：以含60％(w/w)水稻田土、20％(w/w)腐熟农家肥、20％(w/w)火土灰的混合物或泥炭土作为营养土，装入规格为8cm×8cm的营养钵或32孔穴盘内；所述营养土中无病菌、无虫卵、无其他作物种子；4)浸种、催芽：选择3月中旬或7月下旬作为播种时间，播种前晒种2h～4h，然后用清水浸种17h，浸种期间搓洗1～2次并换水，浸种后取出沥干，用湿纱布或湿毛巾保湿，置于28～32℃条件下的恒温培养箱内催芽2～7d，种子发芽露白后播种于步骤3)所得的盛有营养土的营养钵或穴盘中；催芽期间每天用清水淘洗1次；5)苗期管理：当有70～80％的幼苗出土后，通风降温，白天温度控制在20～30℃，夜晚15～20℃；整个苗期过程中进行1～2次叶面喷肥，所喷肥是浓度为0.2～0.3％(w/v)的磷酸二氢钾；6)定植：定植前3～5d将畦面灌透水，选晴天下午定植，每畦栽2行步骤5)培育所得的苦瓜幼苗，定植孔距畦沟15cm，株距60cm，挖好定植穴后把苗放入，摆正培土，浇透水，并保证子叶露出地面；7)肥水管理：整个生长期追肥3～5次，均采用硫酸钾型复合肥兑水浇施，第一次追肥在定植后5～7d，浓度0.5％，每株追0.3kg；此后每隔10d追肥一次，浓度均为1％，每株追0.5kg；整个生长期每7～10d灌水一次；8)搭架整枝：株高20cm时搭设直立篱笆架，在篱笆架上每隔40cm绑蔓一道，植株1.2m以下的侧枝全部去除；9)授粉：授粉时间为每天上午6～10时；①采集当天开放的雄花，取开放的雌花授粉；②采集当天开放的雄花，取未开放但花瓣已变黄的雌花剥去花瓣露出柱头授粉；③采集当天开放的雄花，取前一天开放但花瓣还没有萎蔫的雌花进行授粉；每朵雄花授1～3朵雌花；连续授粉20～30d后，待每株结瓜3～4个停止授粉；10)采收与晾晒：授粉停止后生长25～28d采收，取出种子，洗净，晾晒2～3d至干燥状态；11)种子贮藏：取步骤10)所得的种子，放入干燥的瓶体中或低温、低湿种子柜中保存。作为优选，步骤1)中：大棚的四周采用25目的尼龙网纱隔离，大棚薄膜的上部固定在卡槽或摇膜杆上、下部用土压紧，棚门处重叠成双层隔离网。作为优选，步骤2)中大棚的宽度为6m或8m；当大棚宽度为6m时，大棚内作3畦，棚两侧各留0.7m宽过道，畦面宽1.2m，中间2条畦沟各宽0.5m；当大棚宽度为8m时，大棚内作4畦，棚两侧各留0.85m宽过道，畦面宽1.2m，中间3条畦沟宽0.5m。作为优选，步骤4)中所述播种具体包括以下步骤：播种前对营养钵或穴盘浇透底水，每钵或穴盘每穴播一粒发芽的种子，胚芽朝下平置于播种穴内，播后盖土0.5cm；春季播种后盖上小拱棚并密闭以保湿保温，关好大棚，保持苗床温度28～32℃；秋季需遮阳育苗，并在播种后搭小拱棚盖上遮阳网降温保湿。作为优选，播种时间为春季，步骤5)中育苗苗龄为25d，苗体上具有3～4片真叶。作为优选，播种时间为秋季，步骤5)中育苗苗龄为10d，苗体上具有2～3片真叶。作为优选，步骤8)中直立篱笆架的搭设方法如下：在定植行的上方各拉一道14#铁丝，高1.6m，每株傍插一根长2～2.5m、横径1.5cm的竹竿，上端固定在铁丝上，在竹竿离地0.8m高处再架一横杆或塑料绳，供侧蔓攀爬。作为优选，步骤9)中授粉的植株为强雄株，其雄花已经开放，雌花还未开，此时将开放的雄花放入冰箱冷藏1～2天，待雌花开放时授粉。作为优选，步骤10)中：采收时间为下午，取种子的时间为转天上午；或采收时间为上午，采收后当即取出种子；当苦瓜发生裂果现象，若种子掉落在地膜上，当天将种子捡起洗净晾晒。作为优选，实施该方法的过程中，采取病虫防治手段，所病虫防治手段包括以下步骤：采用防虫网防止害虫进入大棚：将2m宽、25目的尼龙网纱围在大棚四周裙膜位置，上部固定在卡槽或摇膜杆上，下部用土压紧，棚头大门处采用双层尼龙网纱，尼龙网纱高度1.8m；采用黄板诱杀蚜虫：用25cm×20cm的纸板，涂上黄漆，再涂一层机油，用量为50～60块/667m2土地面积。本专利技术提供了一种苦瓜强雌系重组自交系群体的构建方法，该技术方案包括群体构建基地要求、播种时间、育苗、整地施肥、定植、肥水管理、搭架整枝、人工授粉、病虫害防治，采种，种子贮藏等步骤，通过单株自交，尽量从F2到F6将每个单株都保存下来，群体中单株特性也比较完整。本方法可获得从F2到F6足够大的重组自交系群体，重组自交系(RI)群体的优点是可以长期使用，可以进行重复试验。因此它除了可用于构建分子标记连锁图外，特别适合于数量性状基因座(QTL)的定位研究。本专利技术方法可以保证苦瓜强雌系重组自交系群体中，每个单株尽量的都保存下来，操作简单，群体的完整性更强。具体实施方式以下将对本专利技术的具体实施方式进行详细描述。为了避免过多不必要的细节，在以下实施例中对属于公知的结构或功能将不进行详细描述。除有定义外，以下实施例本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种苦瓜强雌系重组自交系群体的构建方法，其特征在于包括以下步骤：1)对基地及大棚的选择：选择沙壤土或粘质壤土的基地，土壤pH值5.5～6.5，前茬为非瓜类作物；选择顶高2.5m以上的钢管大棚或连栋大棚，顶部盖膜防雨；2)整地施肥：在大棚内作畦，畦高0.25m；畦中央挖沟，于其中以每667m

【技术特征摘要】
1.一种苦瓜强雌系重组自交系群体的构建方法，其特征在于包括以下步骤：1)对基地及大棚的选择：选择沙壤土或粘质壤土的基地，土壤pH值5.5～6.5，前茬为非瓜类作物；选择顶高2.5m以上的钢管大棚或连栋大棚，顶部盖膜防雨；2)整地施肥：在大棚内作畦，畦高0.25m；畦中央挖沟，于其中以每667m2土地面积对应N-P2O5-K2O＝15-15-15水平的硫酸钾型复合肥80kg、钙镁磷肥50kg、腐熟有机肥2000kg的比例施放基肥；施肥后整平，铺设滴灌软管，春季覆盖黑色地膜，秋季覆盖银灰色地膜；3)营养土配制：以含60％(w/w)水稻田土、20％(w/w)腐熟农家肥、20％(w/w)火土灰的混合物或泥炭土作为营养土，装入规格为8cm×8cm的营养钵或32孔穴盘内；所述营养土中无病菌、无虫卵、无其他作物种子；4)浸种、催芽：选择3月中旬或7月下旬作为播种时间，播种前晒种2h～4h，然后用清水浸种17h，浸种期间搓洗1～2次并换水，浸种后取出沥干，用湿纱布或湿毛巾保湿，置于28～32℃条件下的恒温培养箱内催芽2～7d，种子发芽露白后播种于步骤3)所得的盛有营养土的营养钵或穴盘中；催芽期间每天用清水淘洗1次；5)苗期管理：当有70～80％的幼苗出土后，通风降温，白天温度控制在20～30℃，夜晚15～20℃；整个苗期过程中进行1～2次叶面喷肥，所喷肥是浓度为0.2～0.3％(w/v)的磷酸二氢钾；6)定植：定植前3～5d将畦面灌透水，选晴天下午定植，每畦栽2行步骤5)培育所得的苦瓜幼苗，定植孔距畦沟15cm，株距60cm，挖好定植穴后把苗放入，摆正培土，浇透水，并保证子叶露出地面；7)肥水管理：整个生长期追肥3～5次，均采用硫酸钾型复合肥兑水浇施，第一次追肥在定植后5～7d，浓度0.5％，每株追0.3kg；此后每隔10d追肥一次，浓度均为1％，每株追0.5kg；整个生长期每7～10d灌水一次；8)搭架整枝：株高20cm时搭设直立篱笆架，在篱笆架上每隔40cm绑蔓一道，植株1.2m以下的侧枝全部去除；9)授粉：授粉时间为每天上午6～10时；①采集当天开放的雄花，取开放的雌花授粉；②采集当天开放的雄花，取未开放但花瓣已变黄的雌花剥去花瓣露出柱头授粉；③采集当天开放的雄花，取前一天开放但花瓣还没有萎蔫的雌花进行授粉；每朵雄花授1～3朵雌花；连续授粉20～30d后，待每株结瓜3～4个停止授粉；10)采收与晾晒：授粉停止后生长25～28d采收，取出种子，洗净，晾晒2～3d至干燥状态；11)种子贮藏：取步骤10)所得的种子，放入干燥的瓶体中或低温、低湿种子柜中保存。2.根据权利要求1所述的一种苦瓜强...

【专利技术属性】
技术研发人员：张景云，万新建，关峰，缪南生，
申请(专利权)人：江西省农业科学院蔬菜花卉研究所，
类型：发明
国别省市：江西,36