用于治疗细菌感染的杀菌剂与亲溶酶体碱化剂的组合制造技术

本发明专利技术涉及医药领域，特别是涉及细菌感染及其治疗领域。

Combination of bactericides and lysosomal alkalization agents used for the treatment of bacterial infections

The invention relates to the field of medicine, in particular to the field of bacterial infection and its treatment.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗细菌感染的杀菌剂与亲溶酶体碱化剂的组合
本专利技术涉及医药领域，特别是涉及细菌感染及其治疗领域。
技术介绍
人类病原体金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)存在于约三分之一的全部人类中，并且是工业化世界中菌血症(bacteremia)和感染性心内膜炎的主要原因之一(1)。除了新出现的抗生素耐药性，持续和复发性感染显著地增加了发病率和死亡率(2,3)。特别是在骨髓炎或心内膜炎之后，复发率很高，并且在明显治愈后甚至几年内感染都可能复发(4)。感染复发出于几个缘由与SCV(smallcolonyvariant，小菌落变异体)和/或非复制性持留菌因子(non-replicatingpersister)有关(5-8)。它们受抑制的或缓慢的生长和降低的新陈代谢会使抗生素效率低下(9-13)。此外，它们优先隐藏于特殊位置(privilegedlocation)，例如脓肿和宿主细胞内(14-16)。这些特殊位置使其免受宿主的先天免疫系统和细胞外活性抗生素的侵害。此外，由于pH低，抗生素不能有效渗透脓肿并且活性较低(17-21)。因此，即使抗生素活性高，但是“有脓就挤(ubipusibievacua)”—在古代制定的手术切除脓肿的必要性现在仍然适用。与脓肿相反，细胞内细菌不能机械去除，并且经常抵抗目前可获得的抗生素的根除。在诊所中分离出的大多数SCV在传代培养(sub-cultivation)后会恢复到大的集落表型。由于这些不稳定的性质，在电子传递系统中具有缺陷的稳定遗传改性的SCV突变体已经用于找寻靶向SCV的新策略，并据发现定位于宿主细胞溶酶体中(22)。然而，稳定的SCV仅部分反映临床SCV。它们毒性较低(23)，以及不能恢复到高毒性和快速生长的表型。因此，迫切需要研究临床SCV和持留菌的手段和最终的治疗SCV和持留菌(persister)的有效方法。
技术实现思路
令人惊奇的是，本专利技术人已经确定可逆的持留菌和可逆的SCV能够由低pH诱导，并且低pH适应细菌在细胞内，特别是在溶酶体(低pH细胞器)内持续存在。在pH升高时，低pH诱导的SCV和持留菌返回为所述高毒力表型。提高所述pH会细胞内返回体外和体内细菌适应的所述低pH，并使所述SCV和持留菌对通常在细胞内无效的抗菌剂敏感。这提供了一种预防和/或治疗主要或至少部分细胞内持留于细胞内区室中的感染，如但不限于皮肤感染，呼吸道或扁桃体上皮(咽炎)的感染，(牛)乳腺炎，或消除孕妇阴道无乳链球菌(S.agalactiae)感染(巨噬细胞内)以预防新生儿败血症或预防/治疗肺炎链球菌(S.pneumoniae)诱导的单核细胞衍生的巨噬细胞凋亡，或治疗结核病(tuberculosis)，麻风病(leprosy)，李斯特菌病(listeriosis)，伤寒症(typhoidfever)，杆菌性痢疾(bacillarydysenteria)，瘟疫(plague)，布鲁氏菌病(brucellosis)，斑疹伤寒(typhus)，落基山斑点热(RockyMountainsspottedfever)，衣原体疾病(chlamydia)，沙眼(trachoma)的全新方法。因此，在第一方面中，本专利技术提供了治疗需要其的受试者中的细菌感染的方法，包括：-给予有效量的提高宿主细胞和/或宿主细胞的细胞内区室的细胞内pH的试剂，和-给予有效量的杀菌剂。所述方法在本文中称为根据本专利技术的方法。优选在本专利技术的实施方式中，pH的升高会激活非复制性细胞内细菌并且所述杀细菌剂会杀死所述活化的细胞内细菌。在本专利技术的实施方式中，所述细菌感染优选是持留细菌感染，并且可能与各种组织，如但不限于皮肤，呼吸道上皮，扁桃体组织，乳腺炎的持留性金黄色葡萄球菌感染有关。在本专利技术的实施方式中，所述细菌感染优选是由选自由以下各项组成的细菌组中的物种引起的感染：葡萄球菌属，链球菌属(如化脓性链球菌(S.pyogenes)，无乳链球菌(S.agalactiae)和肺炎链球菌(S.pneumonia))，放线菌属，诺卡氏菌属，芽孢杆菌属(例如，炭疽杆菌(B.anthracis))，考克斯氏体属(Coxiella)(如贝纳特氏考克斯氏体(Coxiellaburnetii))，立克次体(Rickettsia)，分枝杆菌(如结核分枝杆菌(M.tuberculosis)和麻疯分支杆菌(M.leprae))，军团杆菌属(Legionella)(如嗜肺性军团杆菌(L.pneumophila))，支原体(Mycoplasma)，沙门氏菌属(如鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium))，志贺氏杆菌(Shigella)(如痢疾志贺氏杆菌(S.dysenteriae))，耶尔森氏菌(Yersinia)(如鼠疫耶尔森氏菌(Y.pestis))，布鲁杆菌属(Brucella)，李斯特菌属(Listeria)(如单核细胞增生李斯特氏菌(L.monocytogenesis))，放线杆菌属(Actinobacillus)(如伴放线放线杆菌(A.actinomycetemcomitans))，加德纳菌(Gardnerella)(例如阴道加德纳菌(G.vaginalis))，衣原体(沙眼衣原体(C.trachomatis))和Chlamidophila；更优选的细菌是葡萄球菌的一个种；优选的葡萄球菌种是金黄色葡萄球菌。在本专利技术的实施方式中，引起所述细菌感染的细菌优选胞内存在于宿主细胞中，如所述胞质溶胶中；更优选引起所述细菌感染的细菌优选存在于金黄色葡萄球菌的细胞内区室内。优选所述细菌感染包括包含至少一种对杀菌剂(例如，抗生素)，例如，但不限于MRSA具有抗药性的细菌亚群的细菌群体。在本专利技术的实施方式中，所述细胞内区室可以是任何细胞内区室，其中细菌能够持续存在和/或持续存在；优选所述细胞内区室是具有低pH值的区室。优选的细胞内区室是选自由内涵体(endosome)、溶酶体(lysozome)、吞噬体(phagosome)、吞噬溶酶体(phagolysosome)、自噬体(autophagosome)和自噬溶酶体(autolysosome)组成的组的区室，更优选的细胞内区室是吞噬体、吞噬溶酶体的溶酶体；更加优选的细胞内区室是吞噬溶酶体。在本专利技术的实施方式中，在需要治疗的受试者内，所述感染的宿主细胞优选是真核宿主细胞；所述真核宿主细胞优选选自由以下各项组成的组：专业和非专业吞噬细胞，淋巴细胞，扁桃体组织细胞，呼吸道上皮细胞，颊上皮细胞，骨髓细胞，成骨细胞，角质形成细胞，肌肉细胞，单核细胞，巨噬细胞，树突细胞，内皮细胞，上皮细胞，成纤维细胞，星形胶质细胞和小胶质细胞组成的组；更优选的真核宿主细胞是专业或非专业吞噬细胞。所述受试者可以是对持留细菌感染易感或遭受其感染的任何受试者，例如，但不限于人或动物。动物可以是家养动物，或可以是种畜，宠物，牛，家禽等。优选的受试者是人，并可以是新生儿，少年，成年或老年受试者。在本专利技术的实施方式中，提高所述细胞内pH和/或所述细胞内区室的pH的试剂可以是本领域技术人员已知有效提高细胞内pH和/或所述胞内区室的pH的任何试剂。优选在本专利技术的实施方式中，提高所述细胞内pH和/或所述胞内区室的pH的试剂是碱化剂，优选本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗需要其的受试者中的细菌感染的方法，包括：‑给予有效量的增加宿主细胞胞内pH和/或宿主细胞胞内区室的胞内pH的试剂，以及‑给予有效量的杀菌剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.03.12 EP 15158880.31.一种治疗需要其的受试者中的细菌感染的方法，包括：-给予有效量的增加宿主细胞胞内pH和/或宿主细胞胞内区室的胞内pH的试剂，以及-给予有效量的杀菌剂。2.根据权利要求1所述的治疗方法，其中所述细菌感染是胞内细菌感染和/或持留细菌感染和/或是葡萄球菌(Staphylococcus)感染，优选金黄色葡萄球菌(S.aureus)感染。3.根据权利要求1或2所述的治疗方法，其中所述宿主细胞是需要治疗的受试者内的真核宿主细胞和/或其中所述胞内区室是吞噬溶酶体。4.根据前述权利要求中任一项所述的治疗方法，其中增加胞内pH和/或胞内区室的pH的试剂是碱化剂，优选亲溶酶体碱化剂，优选选自氯喹、巴菲洛霉素A1、氯化铵的组。5.根据前述权利要求中任一项所述的治疗方法，其中所述杀菌剂是能够进入宿主细胞和/或宿主细胞胞内区室的杀菌剂。6.根据前述权利要求中任一项所述的治疗方法，其中所述杀菌剂选自由细菌素或其功能部分、细菌自溶素或其功能部分、噬菌体溶素或其功能部分、抗微生物肽和抗生素组成的组。7.根据前述权利要求中任一项所述的治疗方法，其中所述抗生素选自由以下各项组成的组：β-内酰胺抗生素类如青霉素衍生物、头孢菌素类、单环内酰胺类、碳青霉烯类、万古霉素类、达托霉素、氟喹诺酮类、甲硝唑、硝基呋喃妥因、复方磺胺甲噁唑、泰利霉素、氨基糖苷类抗生素类，更优选氟氯西林。8.根据权利要求1至7所述的治疗方法，其中所述杀菌剂包含来...

【专利技术属性】
技术研发人员：弗里茨·艾兴泽埃尔，
申请(专利权)人：迈克瑞欧斯人体健康有限公司，
类型：发明
国别省市：荷兰,NL