VEGF‑B的应用制造技术

本发明专利技术公开了VEGF‑B在制备抑制新生血管形成、肿瘤和其它增生性疾病的药物中的应用以及含有VEGF‑B的药物。本发明专利技术中的VEGF‑B能够与FGF2的受体FGFR1和FGFR2结合，诱导FGFR1/VEGFR1或FGFR2/VEGFR1复合物形成，抑制FGFR1和FGFR2的作用，上调Spry4表达，抑制FGF2对Erk的活化作用，继而抑制新生血管形成和肿瘤生长。

Application of VEGF B

The invention discloses a drug VEGF B in preparing angiogenesis inhibition, application of drugs for cancer and other proliferative diseases and the containing VEGF B. The invention of the VEGF B binds to the FGF2 receptor FGFR1 and FGFR2 induced by FGFR1/VEGFR1 or FGFR2/VEGFR1 complex formation, inhibition of FGFR1 and FGFR2, upregulate the expression of Spry4, inhibition of FGF2 activation of Erk, which can inhibit the angiogenesis and tumor growth.

【技术实现步骤摘要】
VEGF-B的应用
本专利技术涉及生物医药
，尤其是VEGF-B在制备抑制肿瘤生长的药物中的应用。
技术介绍
血管内皮生长因子-B(VascularendothelialgrowthfactorB,VEGF-B)是VEGF家族的成员并在多种细胞中表达。但有关其在血管系统中的作用的研究甚少。目前关于VEGF-B在新生血管发生中的功能及机制尚不清楚。1996年，VEGF-B被发现。VEGF-B的氨基酸序列与VEGF家族的其他成员VEGF165和PIGF的同源性分别是47％和37％。VEGF-B在大多数组织和器官都有表达，以分泌性同源二聚体的形式存在。成熟的VEGF-B有2个亚型：VEGF-B167和VEGF-B186。VEGF-B167在其羧基端有一个肝素结合位点，分泌后与细胞表面的肝素蛋白多糖(HSPGs)相结合。VEGF-B186没有肝素结合位点，因此分泌出细胞后分布较分散。VEGF-B可与受体VEGFR1和NRP-1结合。VEGFR1作为VEGF-B的受体在多种细胞，包括血管内皮细胞及平滑肌细胞中均有表达。关于VEGFR1在血管中作用的研究提示其具有双面性：在特定环境下VEGFR1既可表现为促新生血管作用，也可以表现为抗新生血管作用。一些研究模型中VEGFR1敲除促进新生血管形成，VEGFR1在血管细胞及非血管细胞中能够抑制Erk活化。然而关于VEGFR1抑制Erk活化及新生血管的作用机制尚不清楚，作为VEGFR1的配体，VEGF-B是否参与该作用，目前尚不明确。成纤维细胞生长因子2(fibroblastgrowthfactor2,FGF2)及其受体FGFR1和FGFR2在机体内广泛表达，具有强大的促新生血管作用。过表达FGF2能够显著诱导新生血管发生，FGF2缺失导致心脏血管密度降低。FGF2敲除不仅能影响血管形成，更能导致血管退化。FGF/FGFR通路上配体或受体的突变及功能异常均可导致多种器官的肿瘤发生，如乳腺、膀胱、肺和头颈部的鳞状细胞癌，FGF/FGFR在多种肿瘤细胞高表达。因此，如何平衡/抑制FGF/FGFR的功能对抑制肿瘤发生至关重要。目前为止，对于FGF2和FGFR1/2活性的抑制因素知之甚少。
技术实现思路
基于此，本专利技术的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种可抑制FGF2和FGFR1/2的活性的药物，从而抑制肿瘤发生。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：作为本专利技术的第一个方面，本专利技术提供了VEGF-B在制备抑制新生血管形成的药物中的应用。本申请的专利技术人经多次实验发现，当组织中VEGF-B的浓度为10～300ng/ml时，抑制新生血管形成的效果较佳。作为本专利技术的第二个方面，本专利技术提供了VEGF-B在制备治疗增生性疾病的药物中的应用。作为本专利技术的第三个方面，本专利技术提供了VEGF-B在制备抑制肿瘤生长的药物中的应用。作为本专利技术的第四个方面，本专利技术提供了VEGF-B在制备治疗癌症的药物中的应用。作为本专利技术的第五个方面，本专利技术提供了VEGF-B和FGF2的受体抑制剂的联合使用在制备抑制新生血管形成的药物中的应用。在本申请中，专利技术人综合运用各种模型及实验方法，首次发现VEGF-B是FGF2/FGFR信号通路的重要负调控因子；同时，首次发现VEGF-B能够与FGF2的受体FGFR1和FGFR2结合，诱导FGFR1/VEGFR1或FGFR2/VEGFR1复合物形成，上调Spry4表达，抑制FGF2对Erk的活化作用，继而抑制新生血管形成和肿瘤生长。优选地，所述VEGF-B为VEGF-B167或/和VEGF-B186。作为本专利技术的第六个方面，本专利技术提供了VEGF-B和FGF2的受体抑制剂的联合使用在制备治疗增生性疾病的药物中的应用。优选地，所述VEGF-B为修饰过的VEGF-B，其中，所述修饰过的VEGF-B为环化、磷酸化或/和甲基化的VEGF-B；或者所述VEGF-B为相比VEGF-B少或多1～5个氨基酸的重组蛋白或多肽。作为本专利技术的第七个方面，本专利技术提供了VEGF-B和FGF2的受体抑制剂的联合使用在制备抑制肿瘤生长的药物中的应用。作为本专利技术的第八个方面，本专利技术提供了VEGF-B和FGF2的受体抑制剂的联合使用在制备治疗癌症的药物中的应用。优选地，所述癌症为鳞状细胞癌。优选地，所述癌症为子宫内膜癌、乳腺癌、膀胱癌或直肠癌。优选地，所述FGF2的受体为FGFR1和/或FGFR2。作为本专利技术的第九个方面，本专利技术提供了表达VEGF-B的质粒、病毒和细胞在制备抑制新生血管形成、治疗增生性疾病、抑制肿瘤生长或治疗癌症的药物中的应用。优选地，所述VEGF-B为VEGF-B167或/和VEGF-B186。作为本专利技术的第十个方面，本专利技术提供了一种抑制新生血管形成的药物，所述药物包含VEGF-B。或者，所述药物含有表达VEGF-B的质粒、病毒或细胞。作为本专利技术的第十一个方面，本专利技术提供了一种治疗增生性疾病的药物，所述药物包含VEGF-B。或者，所述药物含有表达VEGF-B的质粒、病毒或细胞。作为本专利技术的第十二个方面，本专利技术提供了一种抑制肿瘤生长的药物，所述药物包含VEGF-B。或者，所述药物含有表达VEGF-B的质粒、病毒或细胞。作为本专利技术的第十三个方面，本专利技术提供了一种治疗癌症的药物，所述药物包含VEGF-B。或者，所述药物含有表达VEGF-B的质粒、病毒或细胞。优选地，所述药物还包括FGF2的受体抑制剂。更优选地，所述FGF2的受体为FGFR1和/或FGFR2。优选地，所述癌症为鳞状细胞癌。优选地，所述癌症为子宫内膜癌、乳腺癌、膀胱癌或直肠癌。综上所述，本专利技术的有益效果为：VEGF-B能够与FGF2的受体FGFR1和FGFR2结合，诱导FGFR1/VEGFR1或FGFR2/VEGFR1复合物形成，上调Spry4表达，抑制FGF2对Erk的活化作用，继而抑制新生血管形成、肿瘤生长以及其他细胞、组织的增生。附图说明图1为本专利技术的实施例1的实验结果图；图2为本专利技术的实施例2的实验结果图；图3为本专利技术的实施例3的实验结果图；图4为本专利技术的实施例4的实验结果图；图5为本专利技术的实施例5的实验结果图；图6为本专利技术的实施例6的实验结果图；图7为本专利技术的实施例7的实验结果图；图8为本专利技术的实施例8的实验结果图；图9为本专利技术的实施例9的实验结果图；图10为本专利技术的实施例10的实验结果图；图11为本专利技术的实施例11的实验结果图；图12为本专利技术的实施例12的实验结果图。具体实施方式为更好的说明本专利技术的目的、技术方案和优点，下面将结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步说明。实施例1VEGF-B167与FGFR1结合并激活FGFR1实验材料：HREC(人视网膜内皮细胞)和HUVSMC(人脐静脉平滑肌细胞)；实验方法：免疫印迹检测(Westernblot):HREC和HUVSMC常规培养，分别加入FGF2(50ng/ml)或VEGF-B(100ng/ml)刺激15或30分钟后收集蛋白，SDS-PAGE胶电泳，分别检测磷酸化FGFR1(pFGFR1)和总的FGFR1(tFGFR1)。表面等离子体共振检测：将FGFR1-Fc固定于传感片，再加入FGF2或VEGF-B167,检测它们与FGFR1的结合。基于表面等离子体共本文档来自技高网...

【技术保护点】
VEGF‑B在制备抑制新生血管形成的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.VEGF-B在制备抑制新生血管形成的药物中的应用。2.VEGF-B在制备治疗增生性疾病、抑制肿瘤生长或治疗癌症的药物中的应用。3.VEGF-B和FGF2的受体抑制剂的联合使用在制备抑制新生血管形成、治疗增生性疾病、抑制肿瘤生长或治疗癌症的药物中的应用。4.根据权利要求1～3任一项所述的应用，其特征在于，所述VEGF-B为VEGF-B167或/和VEGF-B186。5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述FGF2的受体为FGFR1和/或FGFR2。6.根据权利要求1、2、3或5所述的应用，其特征在于，所述VEGF-B为修饰过的VEGF...

【专利技术属性】
技术研发人员：李旭日，李春植，任向荣，
申请(专利权)人：中山大学中山眼科中心，
类型：发明
国别省市：广东,44