一种含20(R)‑人参皂苷Rh1的Sirt1抑制剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种Sirt1抑制剂20(R)‑人参皂苷Rh1，该化合物为从云南产臭参中分离得到。本发明专利技术还提供了该化合物的制备方法及含有该化合物的药物组合物；本发明专利技术进一步提供了该化合物抑制Sirt1方面的活性，提示其在与Sirt1相关疾病中的价值。

A containing 20 (R) ginsenoside Rh1 Sirt1 inhibitor and preparation method and application thereof

The invention provides a Sirt1 inhibitor 20 (R) ginsenoside Rh1, the compound was isolated from cbfp in Yunnan. The invention also provides a method for the preparation of the compound and a pharmaceutical composition containing the compound. The invention further provides the activity of the compound inhibiting Sirt1, and indicates its value in Sirt1 related diseases.

【技术实现步骤摘要】
一种含20(R)-人参皂苷Rh1的Sirt1抑制剂及其制备方法和应用
本专利技术属于化学药物领域，涉及20(R)-人参皂苷Rh1及其在制备治疗与Sirt1相关疾病的药物中的应用。
技术介绍
沉默信息调节因子1(silentmatingtypeinformationregulation2homolog-1,Sirt1)是一种广泛存在于哺乳动物细胞中的核蛋白，主要通过对组蛋白、转录因子及其他蛋白修饰的赖氨酸残基进行去乙酰化而调节基因的表达，进而广泛参与脂肪酸氧化、应激耐受、胰岛素分泌、细胞凋亡及衰老等生理活动，这些生理活动与二型糖尿病、心血管疾病、代谢综合征、炎症、肿瘤和衰老等密切相关。其相关功能主要体现在以下几个方面：(1)SIRT1与能量代谢方面：SIRT1可与过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPAR-γ)协同刺激因子a(PGC-1a)及肝细胞核因子4a(HNF4a)结合成一种蛋白复合物，在NAD参与下，SIRT1通过去乙酰化PGC-1a来激活HNF4a，从而调节糖异生相关基因转录，进而增强肝脏糖异生。另一方面，SIRT1通过结合PPAR-γ上2个辅助蛋白核受体共抑制蛋白(nuclearreceptorcorepressor，NCoR)和视黄酸及甲状腺激素受体沉默中介蛋白(silencingmediatorofretinoidandhormonereceptor，SMRT)抑制PPAR-γ活性，进而在热量摄入减少时，促进白色脂肪组织中的脂肪动员。(2)SIRT1与胰岛素分泌:SIRT1通过抑制解偶联蛋白2(UCP-2)来促进胰岛b细胞分泌胰岛素。UCP-2作为线粒体内膜上的转运蛋白，使线粒体呼吸作用中的氧化磷酸化解偶联。由于此过程中能量以热能形式释放，使ATP合成减少，此时β细胞内ATP/ADP比值降低。ATP敏感的K+通道开放受其影响所导致的细胞内[Ca2+]下降，抑制了细胞胞吐作用，使胰岛素释放减少。(3)SIRT1与细胞寿命:SIRT1可与多种蛋白相互作用，最初研究认为SIRT1的主要功能是应激条件下减少细胞凋亡及衰老，增加细胞存活率。SIRT1可负调控肿瘤抑制子p53—这是一种最早发现的SIRT1非组蛋白底物，SIRT1将p53中382位Lys残基去乙酰化，降低p53与DNA顺式元件结合力，减少由其诱导的细胞凋亡。因此，SIRT1也被看作为一种有潜力的肿瘤激动子。(4)SIRT1与肿瘤多药耐药:SIRT1在许多耐药的肿瘤株中高表达。最近研究表明，SIRT1在肿瘤耐药中的作用可能主要与其能靶向并调节肿瘤抑制子p53、p73、E2F1和FOXO3a的活化相关。换言之，在SIRT1依赖的转录因子去乙酰化用于调节基因表达期间，细胞避开了化疗药物所致的增殖阻滞和细胞死亡。总之，Sirt1的功能比较复杂，其可以去乙酰化组蛋白，还可以去乙酰化很多重要的转录因子和调节蛋白，从而调控多种生物学过程。党参为桔梗科党参属植物，一种属于党参属的植物在云南被俗称为臭参、云南参多年，后经权威鉴定发现其实际是党参(Codonopsispilosula)，只因其生长在云南低纬高海拔的特殊环境而发生性味变化，功能较其他地区有了显著不同，如服用臭参后可矢气频频，而传统北方产党参不具此功能。本专利技术从中发现的Sirt1抑制剂未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供药物化合物20(R)-人参皂苷Rh1，20(R)-人参皂苷Rh1的药物组合物，所述药物组合物包括20(R)-人参皂苷Rh1或其药学上可接受的衍生物及其盐类。为了实现本专利技术的上述目的，本专利技术提供了如下的技术方案：一种Sirt1抑制剂，所述的有效成分为20(R)-人参皂苷Rh1。包含20(R)-人参皂苷Rh1的药物组合物，所述药物组合物包括20(R)-人参皂苷Rh1或其药学上可接受的衍生物及其盐类，和药学上的至少一种载体。如所述的药物组合物，所述药物组合物为药物制剂，由20(R)-人参皂苷Rh1或其药学上可接受的衍生物及其盐类作为活性成分和药学上可接受的赋形剂组成。20(R)-人参皂苷Rh1的制备方法，该方法为：取干燥臭参，粉碎后用80％的乙醇回流提取(78L×3×3h)，提取液合并浓缩后得总提物。总提物用水混悬后用乙酸乙酯萃取3次，分别得水部分和乙酸乙酯萃取部分，其中乙酸乙酯部位行MCIgelCHP20P柱(甲醇-水，35％-100％)，梯度洗脱，得10个组分C1-C10，C5经SephadexLH-20(MeOH)凝胶柱层析分离，得5个组分，C51-C55，其中C52经RP-18柱(甲醇-水，(11:9,13:7,15:9,17:3,19:1,1:0))得C521-C524，4个组分，C523经SephadexLH-20(MeOH)凝胶得4个组分，C5231-C5234，其中C5232经RP-18柱(甲醇-水，(9:11,11:9,13:7,15:9,17:3,19:1,1:0))得C52321-C52328，8个组分，C52326经半制备HPLC(乙腈/水(0.05％甲酸)40:60)纯化得20(R)-人参皂苷Rh1。20(R)-人参皂苷Rh1作为Sirt1抑制剂在制备治疗Sirt1相关疾病的药物中的应用。进一步地，所述的药物组合物为药物制剂，其是20(R)-人参皂苷Rh1或其药学上可接受的衍生物及其盐类作为活性成分和药学上可接受的赋形剂组成。其中固体制剂包括：片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；半固体制剂包括软膏剂、栓剂等；液体制剂包括：溶液剂、注射剂、喷雾剂等；眼用制剂包括：滴眼剂、眼用凝胶剂等。本专利技术所述的20(R)-人参皂苷Rh1，其制备方法为：取干燥臭参13kg，粉碎后用80％的乙醇回流提取(78L×3×3h)，提取液合并浓缩后得总提物。总提物用水混悬后用乙酸乙酯萃取3次，分别得水部分和乙酸乙酯萃取部分。其中乙酸乙酯部位(约350g)行MCIgelCHP20P柱(甲醇-水，35％-100％)，梯度洗脱，得10个组分(C1-C10)。C5(8.5g)经SephadexLH-20(MeOH)凝胶柱层析分离，得5个组分，C51-C55。其中C52(5.5g)经RP-18柱(甲醇-水，(11:9,13:7,15:9,17:3,19:1,1:0))得C521-C524，4个组分。C523(1.9g)经SephadexLH-20(MeOH)凝胶得4个组分，C5231-C5234。其中C5232(1.6g)经RP-18柱(甲醇-水，(9:11,11:9,13:7,15:9,17:3,19:1,1:0))得C52321-C52328，8个组分。C52326(156mg)经半制备HPLC(乙腈/水(0.05％甲酸)40:60)纯化得20(R)-人参皂苷Rh1(8.3mg)。进一步地，所述的20(R)-人参皂苷Rh1是从云南产党参或其他含有该成分的天然来源中获得。本专利技术的有益效果：1.本专利技术所述的20(R)-人参皂苷Rh1是从云南产党参(臭参)中分离鉴定得到的。2.本专利技术所述的20(R)-人参皂苷Rh1具有抑制Sirt1的效果。附图说明图1为化合物抑制Sirt1活性试验结果(n＝3)。采用Graphprism5统计学软件，应用单因素方差分析的统计学方法，计量数据以均数±标准差表本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种Sirt1抑制剂，其特征在于，所述的有效成分为20(R)‑人参皂苷Rh1。

【技术特征摘要】
1.一种Sirt1抑制剂，其特征在于，所述的有效成分为20(R)-人参皂苷Rh1。2.包含20(R)-人参皂苷Rh1的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括20(R)-人参皂苷Rh1或其药学上可接受的衍生物及其盐类，和药学上的至少一种载体。3.如权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为药物制剂，由20(R)-人参皂苷Rh1或其药学上可接受的衍生物及其盐类作为活性成分和药学上可接受的赋形剂组成。4.20(R)-人参皂苷Rh1的制备方法，其特征在于，该方法为：取干燥臭参，粉碎后用80％的乙醇回流提取78L×3×3h，提取液合并浓缩后得总提物，总提物用水混悬后用乙酸乙酯萃取3次，分别得水部分和乙酸乙酯萃取部分，其中乙酸乙酯部位行MCIgelCHP20P柱，甲醇-水，35％-100％，梯度洗脱，得10个组分C1-C10；C5经S...

【专利技术属性】
技术研发人员：程永现，李小珍，程礼芝，
申请(专利权)人：中国科学院昆明植物研究所，
类型：发明
国别省市：云南,53