多药性作用植物生物活性物质制造技术

本发明专利技术属于药理学，并可以用于制作治疗和预防由疱疹、流行性感冒、乙型和丙型肝炎病毒引起的病毒性疾病以及病毒感染免疫缺陷的药物。禾本科植物Gramineae科Calamagrostis Adans属和/或Deshampsia Beauv属绿色部分和小穗中提取的生物活性物质含黄酮类化合物，即小麦黄素(tricin)、芹菜素、木犀草素、槲皮素、鼠李金黄酮类苷元和/或小麦黄素、芹菜素、木犀草素、槲皮素、鼠李金黄酮苷，辅助物质，成分(质量％)如下：小麦黄素黄酮类苷元和/或其黄酮苷0.016至2.062％；芹菜素黄酮类苷元和/或其黄酮苷0.010至1.393％；木犀草素黄酮类苷元和/或其黄酮苷0.01至4.979％；槲皮素黄酮类苷元和/或其黄酮苷0.001至0.771％；鼠李金黄酮类苷元和/或其黄酮苷0.104至0.203％；辅助物质99.868至90.592％；至0.203％；辅助物质99.868至90.592％。因此，测定生物活性物的具体活性物质成分，其物理化学、生物学性能允许改善并选择其对特定病毒、剂型计量发挥抗病毒作用的最佳成分。此外，已确定本生物活性物质作为(γ)型内源干扰素的诱导剂，并具有凋亡调节作用和抗氧化性能，提高细胞对自由基压力的稳定性。特定病毒抗病毒作用针对2型单纯疱疹病毒、流感病毒、牛腹泻病毒(丙型肝炎病毒)。

Bioactive substances in multidrug-resistant plants

The invention belongs to pharmacology and can be used for making drugs for curing and preventing viral diseases caused by herpes, influenza, hepatitis B virus and hepatitis C virus, and virus infection and immunodeficiency. Gramineae, Calamagrostis gramineous plant genus Adans and / or Deshampsia Beauv belongs to the green part and spikelets of bioactive substances in extracting flavonoids tricin (tricin), namely apigenin, luteolin, quercetin, flavonoid aglycones in Li gold and / or wheat genistein, apigenin, luteolin, quercetin, rat Li Jin Huang Tonggan, auxiliary material, composition (mass%) as follows: tricin flavonoid aglycones and / or its 0.016 to 2.062% flavone glycosides; apigenin flavone aglycones and / or its 0.010 to 1.393% flavonoid glycosides; flavonoid aglycone luteolin and / or its 0.01 to 4.979% flavonoids; quercetin flavonoid aglycone flavonoid glycosides and / or its 0.001 to 0.771%; in Li Jin flavonoids aglycone flavonoid glycosides and / or its 0.104 to 0.203%; 99.868 to 90.592% auxiliary substances; 0.203% to 99.868 to 90 auxiliary substances; .592%. Therefore, the determination of specific active substances of bioactive substances can improve their physical, chemical and biological properties, and select the best components to play the antiviral effect on specific viruses and dosage forms. In addition, it has been identified that this bioactive substance acts as an inducer of interferon gamma, and has the effect of regulating apoptosis and oxidation resistance, and improving the stability of cell to free radical pressure. The antiviral effects of specific viruses are targeted to herpes simplex virus type 2, influenza virus, bovine diarrhoea virus (hepatitis C virus).

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】多药性作用植物生物活性物质
本专利技术归于医学，即药理学，涉及到多药性作用植物生物活性物质成分，含黄酮类苷元、黄酮苷和辅助物质。生物活性物质能用于制作治疗和预防由疱疹、流行性感冒、乙型和丙型肝炎病毒引起的病毒性疾病以及病毒感染免疫缺陷的药物。
技术介绍
近年来，植物材料的抗病毒药物受更多关注，其中检测到直接作用于病毒剂的物质。一种已知的具有广泛范围内抗病毒活性作用的分子为小麦黄素(tricin)(5,7,4'-三羟基-3'，5'-二甲氧基黄酮)。已知，小麦黄素抗流感病毒、巨细胞病毒和单纯疱疹病毒性能有效(日本专利Р2010-254649А,2010年11月11日版本；日本专利Р2006-265248А,2006年10月05日版本)。已测定，从在细胞层次50％抑制巨细胞病毒感染发展(抗病毒作用)的Sasaalbo-marginata中提取的小麦黄素浓度超过0.42微米(或0.139微克/毫升)(AntiviralResearch91(2011),296-303)，而合成小麦黄素对甲型流感病毒(H1N1)的抗病毒作用仅在等于或高于3.3微米(或1.09微克/毫升)的浓度生效(抗病毒化学与化疗2011,22:1-11；Joi103851/MP1782)。化学纯小麦黄素苷元或小麦黄素与芹菜素和/或木犀草素和/或槲皮素的复合化合物源自植物材料：竹叶(Bambooleaves)，Sasa，稻叶。化学纯黄酮类化合物快速氧化并且是疏水性的，因此其使用仅限于细胞层次科学研究领域(MicrobesandInfection.2012p.V.14.Is.12.p1086-1092)。络合物：小麦黄素苷元、芹菜素、木犀草素、槲皮素的糖苷与其复合物是疏水性的，在整个生物体的水平，不同分子量黄酮类化合物的配合物具有协同作用，以及与某些纯物质的作用相比，生物利用度较高(Invivo2011,25(5),757-762,JournalofFood.Vol.13,№1,p.140-150)。本专利技术化学成分和来源最接近的物质用于治疗和预防病理状况，是以2003年2月17日UA№543627МПКA61K35/78公报2号专利方法提取的植物生物活性物质。植物材料为CalamagrostisAdans和DeschampsiaBeauv属混合物，收集期间是茎发育到小穗开花结束为止。如此的生物活性物质毒性较低，为人体提供广泛药理作用，但未确定活性物质具体成分，以及对特定病毒作用未知，无创建药剂推荐剂量的信息。目的为改进生物活性物质，并确定其活性成分、物理化学、生物学特性，确定其针对特定病毒抗病毒作用最佳成分、创建药剂同时保持低毒性的剂量。
技术实现思路
上述任务解决方案为：禾本科植物Gramineae科CalamagrostisAdans属和/或DeshampsiaBeauv属绿色部分和小穗中提取的生物活性物质含黄酮类化合物，即小麦黄素(tricin)、芹菜素、木犀草素、槲皮素、鼠李金黄酮类苷元和/或小麦黄素、芹菜素、木犀草素、槲皮素、鼠李金黄酮苷，辅助物质，成分(质量％)如下：小麦黄素黄酮类苷元和/或其黄酮苷0.016至2.062％；芹菜素黄酮类苷元和/或其黄酮苷0.010至1.393％；木犀草素黄酮类苷元和/或其黄酮苷0.01至4.979％；槲皮素黄酮类苷元和/或其黄酮苷0.001至0.771％；鼠李金黄酮类苷元和/或其黄酮苷0.104至0.203％；辅助物质99.868至90.592％。最好生物活性物质的辅助物质含碳氢化合物、氨基酸、叶绿素。最好生物活性物质从拂子茅(CalamagrostisepigeiosL.，CalamagrostisAdans属)和/或发草(DeshampsiacaespitosaL.，DeshampsiaBeanu属)提取。最好生物活性物质黄酮类化合物总数中O-糖苷形式的黄酮类含量达(53.545÷86.422)％，C-糖苷形式的黄酮类含量达(43.293÷4.910)％，其余为黄酮类苷元。为了测定生物活性物质特定活性成和特性分之间的因果关系，其最佳成分，使用了标准技术进行试验(米罗诺夫，扬科夫斯基。有机化学中的光谱学。莫斯科“化学”1985年——230页。先切夫。液相色谱实用指南。莫斯科“捷赫诺斯费拉”，2010年——272页)。当黄酮类苷元处于O-和/或С-糖苷形式时，提高了生物活性物质在水性介质中的溶解度，同时保证了黄酮类糖苷混合物在整个生物体中协同作用和生物利用度。配置了5个系列不同季节植物的模型提取物。模型提取物系列组成于总提取物：拂子茅和发草混合，比例为1:1，个别植物原料：乙醇重量比1:10到3:1。5个系列提取物用于测定被研究物质含量范围的边界，并确定其平均值。用已知提取方法配置模型提取物，即：浸渍、渗滤、超声提取与其方法的组合(制药生产创新技术和设备；缅舒季纳版本；2册33-88页莫斯科市“比诺姆”2013年——480页)。在提取过程中，定期监测干渣。至于原料和乙醇重量比1:10的提取物，在干渣达0.5％(平均密度0.8010克/毫升)完成提取过程；原料和乙醇重量比1:2的提取物，在干渣达1.2％(平均密度0.8100克/毫升)完成提取过程；原料和乙醇重量比3:1的提取物，在干渣达2.5％(平均密度0.8250克/毫升)完成提取过程。首先测定总提取物中黄酮类苷元、黄酮类糖苷的含量，原料和乙醇重量比1:2。生物活性物质成分测定用了仪器分析物理化学方法，即：具有二极管矩阵检测的高效液相色谱(UPLC-PDA)；电子碰撞电离气相色谱/质谱；电喷雾电离质量检测器液体高效色谱(UPLC-MC/MC)；核磁共振法。鉴定和确定总提取物中的物质后，在模型提取物测定了个别植物生物活性物质定性和定量的含量。为了确定特定作用，进行了总提取物和个别植物生物活性物质的比较。生物活性物质在植物的含量跟宏成分，即叶绿素、植物纤维，相比为痕量的，因此生物活性物质提取第一步为宏成分的排除。疏水的叶绿素(脂溶性)级分，用有机溶剂除去，即己烷或氯仿。植物原料中的碳氢化合物处于游离状态并与具有羟基糖苷组合的单糖和多糖。亲水性质游离碳氢化合物用提取方法去除，即提取苷元，而碳氢化合物留在水相中。由于植物黄酮类苷元处于游离状态和糖苷形式，因此，去除叶绿素部分后，进行定性和定量测定需要使全部苷元(游离状态和糖苷形式)成一个分析形式——无碳氢化合物片块的苷元。通过酸解可以解决这个问题：通过氢离子对苷类形式的黄酮类的作用分裂出碳氢化合物片块。黄酮醇和黄酮糖苷化合物的化学结构通过分光光度法、色谱法(高效液相色谱法、各种检测器气相色谱)等水解产物分析而测定。附图说明附图中示出了本专利技术的实质：图1.高效液相色谱法,UPLC-PDA，总提取物色谱图和分离化合物的吸收光谱图。图2.高效液相色谱法,UPLC-PDA，水解后总提取物色谱图和分离化合物的吸收光谱图。图3.高效液相色谱法,UPLC-PDA，主要小麦黄素苷元制备型分离化合物的色谱，与其吸收光谱图。图4.气相色谱/质谱，主要小麦黄素苷元化合物TMS衍生物的色谱图(离子组成谱)。图5.气相色谱/质谱，主要小麦黄素苷元化合物TMS衍生物的色谱图(离子质量为531.00的保持时间)。图6.1H核磁共振波本文档来自技高网...

【技术保护点】
禾本科植物Gramineae科Calamagrostis Adans属和/或Deshampsia Beauv属绿色部分和小穗中提取的生物活性物质含黄酮类化合物，即小麦黄素(tricin)、芹菜素、木犀草素、槲皮素、鼠李金黄酮类苷元和/或小麦黄素、芹菜素、木犀草素、槲皮素、鼠李金黄酮苷，辅助物质，成分(质量％)如下：小麦黄素黄酮类苷元和/或其黄酮苷0.016至2.062％；芹菜素黄酮类苷元和/或其黄酮苷0.010至1.393％；木犀草素黄酮类苷元和/或其黄酮苷0.01至4.979％；槲皮素黄酮类苷元和/或其黄酮苷0.001至0.771％；鼠李金黄酮类苷元和/或其黄酮苷0.104至0.203％辅助物质99.868至90.592％。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.04.24 UA a2015039151.禾本科植物Gramineae科CalamagrostisAdans属和/或DeshampsiaBeauv属绿色部分和小穗中提取的生物活性物质含黄酮类化合物，即小麦黄素(tricin)、芹菜素、木犀草素、槲皮素、鼠李金黄酮类苷元和/或小麦黄素、芹菜素、木犀草素、槲皮素、鼠李金黄酮苷，辅助物质，成分(质量％)如下：小麦黄素黄酮类苷元和/或其黄酮苷0.016至2.062％；芹菜素黄酮类苷元和/或其黄酮苷0.010至1.393％；木犀草素黄酮类苷元和/或其黄酮苷0.01至4.979％；槲皮素黄酮类苷元和/或其黄酮苷0....

【专利技术属性】
技术研发人员：维克多·阿特曼纽克，
申请(专利权)人：维克多·阿特曼纽克，安娜特利·诺维克，
类型：发明
国别省市：乌克兰,UA