一种冬虫夏草寄主蝙蝠蛾卵壳软化脱色方法及软化脱色剂技术

本发明专利技术属于生物技术领域，提供了一种冬虫夏草寄主蝙蝠蛾卵壳软化脱色方法，其特征是将蝙蝠蛾卵浸入0.1‑0.2％二氧化氯的溶液中处理10到60分钟。本发明专利技术还提供了一种冬虫夏草寄主蝙蝠蛾卵壳软化脱色剂。该方法操作简单，可控，且其软化脱色剂成分廉价，绿色环保，完全更新了现有对于卵壳软化脱色领域的技术，特别是对蝙蝠蛾卵壳的软化脱色，为对蝙蝠蛾卵进一步研究提供了可能。

A host of Cordyceps bat moth chorion softening and softening agent decolorization decolorization method

The invention belongs to the field of biotechnology, provides a host of Cordyceps sinensis, Hepialus eggshell softening decolorization method, characterized in that the solution bat moth eggs immersed in 0.1 0.2% chlorine dioxide treatment 10 to 60 minutes. The invention also provides a host of Cordyceps bat moth chorion softening bleaching agent. The method is simple, controllable, and the softening of decoloring agent composition cheap, green environmental protection, fully updated the existing technology for eggshell decolorizationand, especially decolorizationand of bat moth eggshell, provides the possibility for further research on bat moth eggs.

【技术实现步骤摘要】
一种冬虫夏草寄主蝙蝠蛾卵壳软化脱色方法及软化脱色剂
本专利技术属于生物
，涉及一种冬虫夏草寄主蝙蝠蛾卵壳软化脱色方法及软化脱色剂。
技术介绍
冬虫夏草，是中国历史中传统的名贵中药材，是由麦角菌科麦角菌属的冬虫夏草菌寄生于高山草甸土中的蝙蝠蛾幼虫，使幼虫身躯僵化，并在适宜条件下，由僵虫头端抽生出长棒状的子座而形成，即冬虫夏草菌的子实体与僵虫菌核(幼虫尸体)构成的复合体。蝙蝠蛾幼虫作为冬虫夏草菌的寄主，对其研究极其重要。而胚胎发育的研究对于真核生物而言是生命的根本，卵壳处理技术是进行蝙蝠蛾卵的发育研究、卵冻存技术开发和基因工程技术操作的前提。蝙蝠蛾的卵壳乌黑发亮、质地坚硬，是抵御不利环境保护胚胎发育的重要屏障，目前还未见关于蝙蝠蛾卵卵壳消解、软化、脱色技术的报道。因此，蝙蝠蛾卵壳的处理是这类研究的首要步骤。
技术实现思路
现有技术中的卵壳软化技术多是蚕卵方面的，蚕卵的软化技术对蝙蝠蛾卵完全无效，这是因为蝙蝠蛾卵与蚕卵的卵壳外观形态和组织结构存在差异所致。本方法通过二氧化氯，乙醇等试剂能够将蝠蛾卵的卵壳快速消解、软化、脱色，同时保持了胚胎完整性，经处理后的卵可进行病理组织切片。具体的，本专利技术提供了一种冬虫夏草寄主蝙蝠蛾卵壳软化脱色的方法，其特征是将蝙蝠蛾卵浸入0.1-0.2％二氧化氯的溶液中处理10到60分钟。在一些实施例中，所述溶液是水溶液或乙醇水溶液。在一些实施例中，所述乙醇水溶液是40％-70％乙醇水溶液。在一些实施例中，所述乙醇水溶液是50％乙醇水溶液。在一些实施例中，所述溶液是现配现用。在一些实施例中，当所述溶液为二氧化氯水溶液时，处理时间为30-60分钟。在一些实施例中，当所述溶液为二氧化氯乙醇水溶液时，处理时间为15-30分钟。本专利技术还提供了一种冬虫夏草寄主蝙蝠蛾卵壳软化脱色剂，其特征是0.1-0.2％二氧化氯的水溶液或乙醇水溶液。在软化脱色剂的一些实施例中，所述乙醇水溶液为40％-70％乙醇水溶液。在软化脱色剂的另一些实施例中，所述乙醇水溶液为50％乙醇水溶液。本专利技术提供的冬虫夏草寄主蝠蛾卵壳软化脱色的方法操作简单、可控，且其软化脱色剂成分廉价，绿色环保，完全更新了现有对于卵壳软化脱色领域的技术，特别是对蝙蝠蛾卵壳的软化脱色，为对蝙蝠蛾卵进一步研究提供了可能。附图说明图1为蝙蝠蛾的卵壳脱色软化过程示意图：A→B→C→D图2为发育初期蝠蛾卵切片示意图图3为发育中期蝠蛾卵切片示意图具体实施方式本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术中。本专利技术的方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的产品及方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。为了进一步理解本专利技术，下面结合实施例对本专利技术进行详细说明。实施例1软化脱色实验以1.5-2克二氧化氯粉剂(二氧化氯含量10％)投放于100mL50％的乙醇水溶液中(现配现用，无水乙醇与水1:1)，迅速将待测蝙蝠蛾卵放入上述溶液，卵逐渐由黑色退变为棕色最终变为半透明的淡黄色，15-30min后，卵壳软化脱色完成。本专利技术还通过使用不同的软化剂及处理方法对蝙蝠蛾卵壳进行处理，发现现有的蚕卵壳处理方法对蝙蝠蛾卵并不适用。表1：不同软化剂处理蝙蝠蛾卵软壳效果对比：本专利技术专利技术人通过对多种软化脱色方法进行研究都没有得到较好蝙蝠蛾卵的软化脱色方法，后通过对蝙蝠蛾卵壳的成分和结构的研究，试验了多种试剂，最终选择了含二氧化氯的溶液作为蝙蝠蛾卵的软化脱色剂，具有较优的软化脱色效果；又研究了不同溶剂对软化脱色的影响，其中用水及乙醇水配制的二氧化氯溶液都能使卵壳快速、有效软化和褪色，都无无卵黄膜破坏现象；其中以50％乙醇水溶液配制二氧化氯脱色剂可达到最快最好的软化脱色效果。实施例2组织切片研究取1克二氧化氯粉剂溶于60mL乙醇水溶液中，乙醇:水＝2:1，取发育初期和中期的蝙蝠蛾卵放入上述溶液，卵逐渐变色，30min后卵变为淡黄色，脱色软化完成后，用0.9％生理盐水漂洗三次后，进行组织切片。组织切片方法：将卵用卡诺氏固定液(Carnoy`sFluid)固定24h，后按常规石蜡切片方法进行脱水、透蜡及石蜡包埋等处理，切向为纵切且切片厚度均为4.5μM，贴片(温度为42℃)后烘干1.5h以上(烘箱温度设置为55℃)，再行苏木素-伊红对染法染色，中性树胶封片，切片置于徕卡DM2500正置显微镜观察并拍照。结论：经此法软化的蝙蝠蛾卵能够顺利进行切片，并获得良好的蝙蝠蛾卵胚胎发育过程切片图。在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本专利技术的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。尽管上面已经示出和描述了本专利技术的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本专利技术的限制，本领域的普通技术人员在本专利技术的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种冬虫夏草寄主蝙蝠蛾卵壳软化脱色的方法，其特征是将蝙蝠蛾卵浸入0.1‑0.2％二氧化氯的溶液中处理10到60分钟。

【技术特征摘要】
1.一种冬虫夏草寄主蝙蝠蛾卵壳软化脱色的方法，其特征是将蝙蝠蛾卵浸入0.1-0.2％二氧化氯的溶液中处理10到60分钟。2.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述溶液是水溶液或乙醇水溶液。3.根据权利要求2所述的方法，其特征是所述乙醇水溶液是40％-70％乙醇水溶液。4.根据权利要求3所述的方法，其特征是所述乙醇水溶液是50％乙醇水溶液。5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征是所述溶液是现配现用。6.根据权利要求1-...

【专利技术属性】
技术研发人员：李文佳，李全平，张宗耀，吕延华，贺媛，
申请(专利权)人：广东东阳光药业有限公司，宜昌山城水都冬虫夏草有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44