一种保健食品中不饱和脂肪酸含量测定的前处理方法技术

本发明专利技术涉及保健食品分析领域，特别涉及一种保健食品中不饱和脂肪酸含量测定的前处理方法。本发明专利技术采用毛氏抽脂瓶替代国标GB28404‑2012中规定的50ml比色管和100mL具塞量筒，并使用配套的毛氏抽脂瓶离心机及毛氏抽脂瓶摇混器，用于健食品中不饱和脂肪酸含量测定的前处理，能够有效消除提取过程中由于振摇水相和有机相发生的“乳化”现象，最大限度地减少脂肪损失，从而显著提高α‑亚麻酸、二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸的含量，同时检测结果准确度高、稳定性好。另外，本发明专利技术前处理时间由8h缩短至4h以内，缩短了检测用时，并减少了操作误差，适用于当今企业的对产品快速放行的需求。

A pretreatment method for determining the content of unsaturated fatty acids in health food

The invention relates to the field of health food analysis, in particular to a pretreatment method for determining the content of unsaturated fatty acids in health food. The invention adopts Mao liposuction bottle instead of GB GB28404 2012 specified in the 50ml tube and 100mL with a plug, and supporting the use of Mao Mao liposuction liposuction bottle centrifuge and shake flask mixer for health food, the unsaturated fatty acid content was determined before treatment, can effectively eliminate the extraction process due to shake the aqueous and organic phase occurs \emulsification\ phenomenon, minimize fat loss, thereby significantly increased the content of alpha linolenic acid, twenty carbon twenty-two carbon five acid, five acid and twenty-two carbon acid six, and the detection results of high accuracy and good stability. In addition, the preprocessing time of the invention is shortened from 8h to 4h, which shortens the detection time and reduces the operational error, which is suitable for the rapid release of products nowadays.

【技术实现步骤摘要】
一种保健食品中不饱和脂肪酸含量测定的前处理方法
本专利技术涉及保健食品分析领域，特别涉及一种保健食品中不饱和脂肪酸含量测定的前处理方法。
技术介绍
目前保健食品中α-亚麻酸的测定方法标准GB28404-2012前处理原理为试样经酸水解后用乙醚和石油醚这两种易挥发的有机溶剂去提取脂肪，提取的有机相经浓缩蒸干，用正己烷溶解脂肪，其中α-亚麻酸、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳五烯酸(DPA)和二十二碳六烯酸(DHA)经氢氧化钠-甲醇溶液进行酯交换生成脂肪酸甲酯后，通过气相色谱分离检测，以保留时间定性，外标法定量。该方法采用的前处理方法具体为：在50mL比色管中对样品进行酸水解，水解完毕后加入乙醇混合，然后移入100mL具塞量筒中，分别加入无水乙醚和石油醚进行振摇，静置，分层，分离出有机层，过无水硫酸钠滤入浓缩瓶中。在使用有机溶剂无水乙醚和石油醚进行提取过程中，有机相和水相由于振摇，原本不相容的两种液体混合在一起，发生“乳化”(乳化是一种液体以极微小液滴均匀地分散在互不相溶的另一种液体中的作用)现象。而国标GB28404-2012规定的上述方法经静置后，仍有大部分乳化现象，不能最大限度提取脂肪，使检测结果偏小。具体地，GB28404-2012规定的前处理方法存在以下三个缺点：其一：100ml具塞量筒不能离心，且市面上也没有应用于100ml具塞量筒的离心机。这样就导致不能最大限度提取脂肪，总有部分脂肪残留在乳化层中，导致结果偏低。虽然可以通过将100ml量筒中的样液转移到离心管中进行离心来消除乳化，但转移过程中会造成脂肪损失，且步骤繁琐。其二，由于使用具塞量筒，振摇后上层有机相需要用吸管吸出，由于有机相液体表面张力小，吸出的有机相在吸取转移过程中会有滴落现象，这样操作就不得不让操作者在转移过程中变得小心翼翼，使前处理过程繁琐化。其三，每次振摇需要振摇1分钟，检测人员手会很累。且振摇后需静止30min，实验发现静止30min后，提取的有机相依然有部分乳化，造成实验时间成本延长，不利于当今企业生产产品快速放行的需求。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种保健食品中不饱和脂肪酸含量测定的前处理方法，使得该前处理方法能够最大限度地减少脂肪损失，显著提高α-亚麻酸、二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸的含量，同时检测结果准确度高、稳定性好。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种保健食品中不饱和脂肪酸含量测定的前处理方法，包括如下步骤：将待测样品粉碎后置于毛氏抽脂瓶中，加酸水解，有机溶剂搅拌提取，离心，倾倒、收集有机层，经浓缩得到浓缩液，蒸干，加正己烷溶解，得到前处理溶液。本专利技术采用毛氏抽脂瓶替代国标GB28404-2012中规定的50ml比色管和100mL具塞量筒，可用于离心，经离心后水相有机相分层清晰，能够有效消除提取过程中由于振摇水相和有机相发生的“乳化”现象，最大限度地减少脂肪损失。抽脂瓶底部设计成球型，可使下层水相截留在球型里面，并且有鹰嘴流出口，倾斜即可倒出上层有机相，有效避免了下层水相一并倒出的问题。而且，整个提取过程都在同一个抽脂瓶中完成，无需转移，进一步减少待测组分的损失，最终显著提高了α-亚麻酸、二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸的含量，且检测结果准确度高、稳定性好。另外，本专利技术前处理时间由8h缩短至4h以内，缩短了检测用时，并减少了操作误差。作为优选，所述离心为采用毛氏离心机室温下600r/min，离心4～8min。更优选地，所述离心为采用毛氏抽脂瓶离心机室温下600r/min，离心5min。作为优选，所述有机溶剂搅拌提取为向毛氏抽脂瓶中加入有机溶剂，于毛氏抽脂瓶摇混器中震荡频率为100次/min，振摇搅拌1min。所述有机溶剂优选为无水乙醚和石油醚，所述无水乙醚与所述石油醚的体积比优选为为1:1。在本专利技术提供的具体实施例中，所述有机溶剂搅拌提取具体为：向毛氏抽脂瓶中加入25mL无水乙醚，密塞放置于毛氏抽脂瓶摇混器中100次/min振摇1min；再加入25mL石油醚，密塞放置于毛氏抽脂瓶摇混器中100次/min振摇1min。作为优选，所述加酸水解为：向毛氏抽脂瓶中加水，将待测样品与水混匀，然后加入盐酸，置于70℃～80℃水浴中，采用涡旋混合器进行混合，间隔5min～10min混合一次，混合4～10次。作为优选，所述加酸水解之后、所述有机溶剂搅拌提取之前还包括加乙醇混合的步骤。作为优选，所述浓缩为将有机相过无水硫酸钠滤入浓缩瓶。作为优选，所述蒸干为采用旋转蒸发仪于40℃减压浓缩至有机溶剂挥发完毕。本专利技术采用毛氏抽脂瓶替代国标GB28404-2012中规定的50ml比色管和100mL具塞量筒，并使用配套的毛氏抽脂瓶离心机及毛氏抽脂瓶摇混器，用于健食品中不饱和脂肪酸含量测定的前处理，能够有效消除提取过程中由于振摇水相和有机相发生的“乳化”现象，最大限度地减少脂肪损失，从而显著提高α-亚麻酸、二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸的含量。而且，采用本专利技术提供的前处理方法进行前处理，最终的检测结果具有较高的准确度和精密度，其中，加标回收率可达95％以上，相对标准偏差小于2％。而且缩短了检测用时，可使前处理时间由8h缩短至4h以内，并减少了操作误差，适用于当今企业的对产品快速放行的需求。附图说明图1示本专利技术实施例1倾倒、收集有机层的步骤示意图。具体实施方式本专利技术公开了一种保健食品中不饱和脂肪酸含量测定的前处理方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。对所公开的实施例的说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本专利技术。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本专利技术的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本专利技术将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。下面结合实施例，进一步阐述本专利技术：实施例1本专利技术所述前处理方法称取待测试样粉碎混合均匀，取2g(精确到0.001g)加入毛氏抽脂瓶中，加8mL水，混匀后再加10mL盐酸。将抽脂瓶放入75℃水浴中，采用涡旋混合器进行混合，间隔10min混合一次，混合6次，至试样水解完全为止。取出抽脂瓶，加入10mL乙醇，混合。向毛氏抽脂瓶中加入25mL无水乙醚，密塞放置于毛氏抽脂瓶摇混器振摇搅拌1min，再加入25mL石油醚，密塞放置于毛氏抽脂瓶摇混器中100次/min振摇1min，然后将毛氏抽脂瓶放于毛氏抽脂瓶离心机中室温下600r/min，离心5min，将有机层倾斜倒出(如图1所示)，收集有机层，将有机层过无水硫酸钠(5g)滤入浓缩瓶中，得到浓缩液。采用旋转蒸发仪于40℃条件下对浓缩液进行减压浓缩，至有机溶剂挥发完毕，加正己烷溶解，得到前处理溶液。实施例2紫苏子油微囊中α-亚麻酸含量的检测以紫苏子油微囊为待测样品，试验设置试验组和对照组1～2，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种保健食品中不饱和脂肪酸含量测定的前处理方法，其特征在于，包括如下步骤：将待测样品粉碎后置于100ml毛氏抽脂瓶中，加酸水解，有机溶剂搅拌提取，离心，倾倒、收集有机层，经浓缩得到浓缩液，蒸干，加正己烷溶解，得到前处理溶液。

【技术特征摘要】
1.一种保健食品中不饱和脂肪酸含量测定的前处理方法，其特征在于，包括如下步骤：将待测样品粉碎后置于100ml毛氏抽脂瓶中，加酸水解，有机溶剂搅拌提取，离心，倾倒、收集有机层，经浓缩得到浓缩液，蒸干，加正己烷溶解，得到前处理溶液。2.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于，所述离心为采用毛氏离心机室温下600r/min，离心4～8min。3.根据权利要求2所述的前处理方法，其特征在于，所述离心为采用毛氏抽脂瓶离心机室温下600r/min，离心5min。4.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于，所述有机溶剂搅拌提取为向毛氏抽脂瓶中加入有机溶剂，于毛氏抽脂瓶摇混器中震荡频率为100次/min，振摇搅拌1min。5.根据权利要求1或4所述的前处理方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：高宏海，黄美山，李煜，
申请(专利权)人：无限极营口有限公司，
类型：发明
国别省市：辽宁,21