毛蕊异黄酮衍生物在制备促进内皮细胞增殖药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种毛蕊异黄酮衍生物在制备促进内皮细胞增殖药物中的应用。申请人通过实验发现，该毛蕊异黄酮衍生物能够上调ERα和GPR30的表达水平，比毛蕊异黄酮更能促进内皮细胞增殖，并且在低浓度下(10μM)对MCF‑7细胞有抑制作用；此外，该毛蕊异黄酮衍生物还能够上调ERK1/2磷酸化水平，对去势大鼠具有很强的促子宫增殖作用，能够诱导子宫体重比的增加。所述的毛蕊异黄酮衍生物的结构如下述式(I)所示。

Application of stamen isoflavone derivatives in the preparation of drugs to promote endothelial cell proliferation

The invention discloses the application of a kind of stamen isoflavone derivative in the preparation of the drug to promote the proliferation of endothelial cells. The experiment found that the calycosin derivatives can up regulate the expression of ER alpha and GPR30, can promote the proliferation of endothelial cells than calycosin, and at a low concentration (10 M) had inhibitory effect on MCF cells 7; in addition, the calycosin derivatives can also increase the phosphorylation level of ERK1/2 with the proliferation of uterine, strong in ovariectomized rats, can induce uterine weight ratio increases. The structure of the stamen isoflavone derivative is shown in the following formula (I).

【技术实现步骤摘要】
毛蕊异黄酮衍生物在制备促进内皮细胞增殖药物中的应用
本专利技术涉及一种毛蕊异黄酮衍生物在制备促进内皮细胞增殖药物中的应用，属于医药

技术介绍
随着人们对生活质量要求的提高，女性绝经后由于雌激素水平明显降低所引发的心血管事件的高发生率，正成为全世界医学研究的热点。其中内皮细胞功能紊乱是绝经后冠心病、心肌梗塞等心血管疾病的最主要原因之一。同时，内皮细胞功能障碍和死亡还是动脉粥样硬化等心血管疾病的重要病理过程。因此，临床上希望发现一种能够促进绝经后妇女内皮细胞增殖，保护其内皮细胞功能的药物。大量研究表明，对于绝经女性给予雌激素替代治疗可有效发挥心血管保护作用，降低心血管疾病发生率和死亡率。雌激素发挥作用的机制是通过与细胞中的雌激素受体(ER)特异性结合而完成的。ER作为一种配体激活的转录因子，在全身广泛分布，已有报道证实ER在血管内皮细胞中有表达，并且雌激素能促进内皮细胞增殖，而且雌激素能发挥这些效应均与它和内皮细胞的ER结合有关。ER属于核受体超家族的成员，目前发现的有两种亚型:ERα和ERβ。雌激素效应的经典通路是通过ERα介导的基因组效应(genomicsignaling)。随着研究的不断深入，雌激素是否只能通过进入细胞内结合ERα调节下游目的基因的转录引起了人们的质疑。区别于经典的基因组效应通路，许多学者提出了跨膜相关的雌激素效应通路即涉及细胞信号转导的快速非基因组通路。G蛋白偶联受体30(Gprotein-coupledreceptor30，GPR30)是一种7次跨膜G蛋白偶联受体，广泛存在和表达于多种雌激素依赖性疾病。自2005年提出GPR30作为一种新型雌激素膜受体以来，有关GPR30参与雌激素快速非基因组通路的研究有很多。雌激素可以通过结合GPR30快速激活细胞信号转导通路及下游效应分子，介导雌激素的快速非基因组效应进而影响细胞周期进程或导致细胞功能的变化。GPR30参与信号转导的途径主要有MAPK途径和PI3K/Akt途径。目前，激素疗法在绝经后妇女心血管疾病的预防和治疗中已被广泛运用。但使用天然雌激素如17β-雌二醇的激素替代疗法会增加女性患乳腺癌、子宫内膜癌的几率，使用不当还能造成内分泌失调和代谢紊乱。而很多异黄酮类化合物能作为植物雌激素与ER相互作用，产生心血管保护效应且较于内源性激素更为安全，有望成为雌激素的替代品。黄芪为豆科多年生草本植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.Var.mongholicus(Bge)Hsiao或膜荚黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。据药典记载黄芪味甘，性微温，具有补气升阳、益卫固表、改善心功能、扩张冠状动脉、利尿消肿、托疮生肌、抗菌、抗病毒、抗疲劳、抗衰老、促进造血功能、保护肝脏等功效。毛蕊异黄酮(calycosin)是从黄芪中提取和分离出来的一种异黄酮类化合物(马晓丰等，蒙古黄芪中黄酮类成分的研究，中草药，第36卷第9期,2005年9月，p1293-1296)，其结构式如下式所示：已有的研究表明，毛蕊异黄酮具有抗氧化应激、抗病毒和调节细胞凋亡等作用，但其不足之处在于其有效浓度较大，靶点不明确。低浓度毛蕊异黄酮(<16μM)能够促进ER阳性乳腺癌细胞MCF-7增殖；虽然高浓度毛蕊异黄酮(>20μM)能够抑制ER阳性乳腺癌细胞MCF-7及T47D增殖，但是其对ER阴性乳腺癌细胞的增殖无影响(周黎明、陈健，不同浓度的毛蕊异黄酮对ER阳性乳腺癌细胞的作用及其机制研究，中国药理学会第十一届全国化疗药理学术研讨会论文集，2012年7月1日，p322-323)。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种结构新颖的毛蕊异黄酮衍生物在制备促进内皮细胞增殖药物中的应用。本专利技术的技术方案为：下述式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐在制备促进内皮细胞增殖药物中的应用；本专利技术技术方案中涉及的式(I)所示化合物的化学名称为：3-(4-甲氧基-3-(2-吗啉代乙氧基)苯基)-7-(2-吗啉代乙氧基)-4H-苯并吡喃-4-酮，分子量为510.6。该式(I)所示化合物可自行设计路线进行合成，具体可按以下合成路线进行合成：其中，化合物1的化学名称为：7-羟基-3-(3-羟基-4-甲氧基)-4H-苯并吡喃-4-酮，化合物2的化学名称为：1,2-二溴乙烷，中间产物3的化学名称为：7-(2-溴乙氧基)-3-(3-(2-溴乙氧基)-4-甲氧基苯基)-4H-苯并吡喃-4-酮，化合物4的化学名称为：吗啉；化合物5的化学名称为：3-(4-甲氧基-3-(2-吗啉代乙氧基)苯基)-7-(2-吗啉代乙氧基)-4H-苯并吡喃-4-酮。具体的合成方法为：1)取7-羟基-3-(3-羟基-4-甲氧基)-4H-苯并吡喃-4-酮(300mg)和1,2-二溴乙烷按1：8的摩尔比溶解于13mL丙酮中，然后用三乙胺调节体系的pH＝10，室温条件下反应8h，待反应结束后，旋干，向所得残渣中加入200ml乙酸乙酯,用300mL*3的水洗三次，之后用无水硫酸钠干燥，上硅胶柱纯化(洗脱剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：4，体积比)，得到中间产物3(收率60％)；2)取中间产物3(100mg)和吗啉按1：1的摩尔比溶解于10mL丙酮中用三乙胺调节体系的pH＝10，室温条件下反应6h，待反应结束后，旋干，向所得残渣中加入150ml乙酸乙酯，用200mL*3的水洗三次，用无水硫酸钠干燥，上硅胶柱纯化上硅胶柱纯化(洗脱剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：3，体积比)，得到黄色固体产物即目标产物(收率55％)。本专利技术还提供一种促进内皮细胞增殖的药物，该药物含有治疗上有效剂量的下述式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐；本专利技术所述促进内皮细胞增殖的药物的剂型可以是药学上可接受的任意剂型，具体可以是颗粒剂、片剂、丸剂、胶囊或注射剂等常规剂型。申请人通过实验发现，上述式(I)所示化合物能够上调ERα和GPR30的表达水平，比毛蕊异黄酮更能促进内皮细胞增殖，并且在低浓度下(10μM)对MCF-7细胞有抑制作用，因此，式(I)所示化合物比毛蕊异黄酮更有希望成为雌激素的替代品；此外，申请人的实验还表明，式(I)所示化合物能够上调ERK1/2磷酸化水平，对去势大鼠具有很强的促子宫增殖作用，能够诱导子宫体重比的增加。附图说明图1为用不同浓度的式(I)所示化合物及其毛蕊异黄酮作用内皮细胞HUVECs及乳腺癌细胞MCF-7量效曲线图，*p＜0.05vscontrol，@p＜0.05vs10μM式(I)所示化合物；图2为式(I)所示化合物与ERα抑制剂MPP、GPR30抑制剂G15共同作用HUVECs柱状图，*p＜0.05vscontrol，@p＜0.05vs10μM式(I)所示化合物；图3为式(I)所示化合物影响HUVECs中GPR30基因表达的柱状图，*p＜0.05vscontrol；图4为式(I)所示化合物影响HUVECs中ERα基因表达柱状图，*p＜0.05vscontrol；图5为式(I)所示化合物影响HUVECs中GPR30蛋白表达的WB图；图6为式(I)所示化合物影响HUVECs中GPR30蛋白表达的柱状图，*p＜0.05vs本文档来自技高网...

【技术保护点】
下述式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐在制备促进内皮细胞增殖的药物中的应用；

【技术特征摘要】
1.下述式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐在制备促进内皮细胞增殖的药物中的应用；2.一种促进内皮细胞增殖的药物，含有治疗上有效剂量的下述式(I)所示化合物或其药学上可接受...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈健，黄照权，夏春波，张幸，田晶，
申请(专利权)人：桂林医学院，
类型：发明
国别省市：广西,45