一种鸡球虫病活卵囊疫苗助悬剂制造技术

本发明专利技术公开了一种鸡球虫病活卵囊疫苗助悬剂，属于动物疫苗免疫接种领域。本发明专利技术通过将鸡球虫病活卵囊疫苗加入至海藻酸钠水溶液中，可以维持疫苗中卵囊长时间不发生沉降，且对疫苗免疫效果不产生任何影响。本发明专利技术的益处在于：采用海藻酸钠作为鸡球虫病活卵囊疫苗助悬剂，免疫接种简单方便，适用于不同类型和不同规模的养鸡场，并能使疫苗中的卵囊均匀悬浮于海藻酸钠溶液中维持8小时以上，可使鸡只获得均匀免疫，同时，疫苗接种前无须对免疫鸡只采取控水措施，避免了鸡只出现抢水现象，极大的减少了疫苗接种过程中的应激反应。

A live oocyst vaccine for coccidiosis in chicken

The present invention discloses a chicken coccidiosis live oocyst vaccine suspension agent, which belongs to the field of immunization for animal vaccines. By adding chicken ocid live oocysts vaccine into sodium alginate solution, the oocyst can maintain no settlement for a long time, and has no effect on vaccine immunity. The benefits of the present invention is: using sodium alginate as chicken coccidiosis oocysts vaccine suspending agent, immunization is simple and convenient, suitable for different types and scale of the farm, and can make the vaccine oocysts suspended evenly in the sodium alginate solution in the last more than 8 hours, the chicken is obtained at the same time, immunization, vaccination before do not need to take only water control measures on immune chickens, avoid the chickens over water phenomenon, greatly reducing the stress in the process of vaccination.

【技术实现步骤摘要】
一种鸡球虫病活卵囊疫苗助悬剂
本专利技术属于动物疫苗免疫接种领域，具体涉及一种鸡球虫病活卵囊疫苗助悬剂。
技术介绍
鸡球虫病是由一种或多种艾美耳属球虫（Eimeriaspp.）同时或先后寄生于鸡肠道所引起的寄生原虫病，流行广泛，是目前危害集约化养鸡业生产的最严重的疾病之一，经济损失巨大，据不完全统计，我国每年仅因亚临床球虫病而导致饲料报酬下降所致的间接经济损失就达100亿元。免疫预防是目前鸡球虫病防治中有效解决球虫抗药性所致药效下降、最大限度地消除抗球虫药物残留所引起我国鸡产业出口技术壁垒的最科学、最可行、最有效、最安全的方法，正逐渐成为新一代的“可持续”绿色技术。鸡球虫病疫苗对提高我国养鸡业生产效益、改善和提高食品卫生质量、保障人民生命健康有重要意义，并具有广阔的市场需求。目前，鸡球虫病活卵囊疫苗免疫方法有饮水法、滴口法、喷料法及喷雾法等。其中，以滴口法为最佳，可确保100%免疫，但对于大型养鸡场则操作不便且对鸡只应激较大；喷雾法较适用于设备先进的孵化室；饮水法和喷料法是较为适用的免疫方法。其中，饮水法是鸡球虫病活卵囊疫苗临床应用最简便的方法，同时所产生的应激小，但是由于卵囊密度大，在饮水中容易自然沉降而造成免疫不均匀或免疫失败，因此，在鸡球虫病活卵囊疫苗免疫接种时通常加入一定量的助悬剂，使疫苗中的球虫卵囊均匀的悬浮在饮水中并维持一定时间不沉降，以提高疫苗免疫均匀度。目前，鸡球虫病活卵囊疫苗助悬剂的主要成分一般选用羧甲基纤维素类/纤维素类衍生物。这些助悬剂悬浮球虫卵囊的时间仅为6h左右，虽然也有使球虫卵囊均匀的悬浮在饮水中并维持10小时不沉降的专利技术，但其组分相对复杂，生产成本较高。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种鸡球虫病活卵囊疫苗助悬剂，以保持鸡球虫病活卵囊疫苗中的卵囊在饮水中均匀分布，使鸡只获得均匀免疫，从而减少疫苗免疫应激反应。为了达到所述的目的，本专利技术通过以下技术方案实现：一种鸡球虫病活卵囊疫苗助悬剂，在常温下配制海藻酸钠水溶液，再加入鸡球虫病活卵囊疫苗，搅拌混匀而成，其中海藻酸钠溶液的质量体积比浓度为0.1—0.5%。优选的，所述海藻酸钠溶液的质量体积比浓度为0.15—0.2%。本专利技术中的鸡球虫病活卵囊疫苗助悬剂为海藻酸钠。海藻酸钠为无色或淡黄色细丝颗粒或粉末状固体，英文名：Sodiumalginate，分子式为(C6H7O6Na)n。海藻酸钠为一种天然多糖，具有药物制剂辅料所需的稳定性、溶解性、粘性和安全性，几乎无臭无味，溶于水，不溶于乙醇、乙醚、氯仿等有机溶剂。溶于水成粘稠状液体，1%水溶液pH值为6—8。当pH=6—9时粘性稳定，加热至80℃以上时则粘性降低。海藻酸钠无毒，LD50>5000mg/kg。本专利技术采用海藻酸钠作为鸡球虫病活卵囊疫苗助悬剂，免疫接种简单方便。并进行了一系列海藻酸钠水溶液对鸡球虫病活卵囊疫苗悬浮效果试验。结果表明，鸡球虫病活卵囊疫苗中的卵囊在海藻酸钠的水溶液中维持既不上浮也不沉降的时间长达8h以上，且对疫苗免疫效果不产生任何影响，可使鸡只获得均匀免疫，同时，疫苗接种前无须对需免疫的鸡只采取控水措施，避免了鸡只在免疫接种过程中出现“抢水”现象，极大的减少了疫苗接种过程中的应激反应，疫苗生产成本亦大幅降低。适用于不同类型和不同规模的养鸡场。具体实施方式下面的实施例可以进一步说明本专利技术，但不以任何方式限制本专利技术。本专利技术中，鸡球虫病活卵囊疫苗、海藻酸钠水溶液的用量并未给出特别限定，可以根据具体应用需求进行调整。实施例1在海藻酸钠的水溶液中加入鸡球虫病活卵囊疫苗，搅拌混匀而成，其中海藻酸钠溶液的质量体积比浓度为0.5%。选用1000羽/瓶的鸡球虫病活卵囊疫苗，每瓶疫苗对应的海藻酸钠水溶液用量为2—8L。实施例2在海藻酸钠的水溶液中加入鸡球虫病活卵囊疫苗，搅拌混匀而成，其中海藻酸钠溶液的质量体积比浓度为0.15%。选用1000羽/瓶的鸡球虫病活卵囊疫苗，每瓶疫苗对应的海藻酸钠水溶液用量为2—8L。实施例3在海藻酸钠的水溶液中加入鸡球虫病活卵囊疫苗，搅拌混匀而成，其中海藻酸钠溶液的质量体积比浓度为0.2%。选用1000羽/瓶的鸡球虫病活卵囊疫苗，每瓶疫苗对应的海藻酸钠水溶液用量为2—8L。实施例4在海藻酸钠的水溶液中加入鸡球虫病活卵囊疫苗，搅拌混匀而成，其中海藻酸钠溶液的质量体积比浓度为0.1%。选用1000羽/瓶的鸡球虫病活卵囊疫苗，每瓶疫苗对应的海藻酸钠水溶液用量为2—8L。材料选择如下：1、鸡球虫卵囊堆型艾美耳球虫YL株、巨型艾美耳球虫HS株和柔嫩艾美耳球虫YL株早熟系，为中农威特生物科技股份有限公司分离、鉴定和保存。、鸡球虫病活卵囊疫苗实验室试制的鸡球虫病三联三价活卵囊疫苗（批号为20150301，1000羽份/瓶，24.9×104个孢子化卵囊/mL），系用堆型艾美耳球虫YL株、巨型艾美耳球虫HS株和柔嫩艾美耳球虫YL株早熟系，通过球虫卵囊分离纯化、孢子化培养之后，按一定比例配比混合而成。、检验用虫种柔嫩艾美耳球虫YL株、堆型艾美耳球虫HS株和巨型艾美耳球虫YL株，为中农威特生物科技股份有限公司分离、鉴定和保存。、试验动物和饲料1日龄黄羽肉鸡，购自于广东智威农业科技股份有限公司，饲养于无鸡球虫污染笼舍内，按肉鸡饲养标准（鸡饲养标准NY/T33-2004）饲养。饲料为不含任何抗球虫药物肉小鸡全价料，购自兰州养动力饲料有限公司。、主要试剂纯水；海藻酸钠（化学纯CP，购自北京索莱宝科技有限公司）；羧甲基纤维素钠（化学纯CP，购自国药集团化学试剂有限公司）。海藻酸钠溶液配制：分别称取0.5、1、2、3、4、10g海藻酸钠，加入至2L纯水中，常温下溶解（期间可多次搅拌或过夜溶解）。羧甲基纤维素钠溶液配制：称取2g羧甲基纤维素钠，加入至2L纯水中，常温下溶解（期间可多次搅拌或过夜溶解）。《不同浓度海藻酸钠溶液悬浮球虫卵囊效果比较试验》准备8个2L烧杯，分别配制不同浓度海藻酸钠溶液（0.025%、0.05%、0.1%、0.15%、0.2%、0.5%）和0.1%羧甲基纤维素钠溶液各2L，同时以2L纯水为对照。溶液配制完成后，各烧杯中分别加入等体积的卵囊液（各组卵囊浓度约为10×104个），充分搅拌混匀后，分别吸取各组10个不同位置的上层卵囊液各100ul至洁净的2mL离心管中，混匀后用血细胞计数板进行卵囊计数，每份样品计数5—10次，每次计数数8个大格内的卵囊总量，最后求平均值，并以此为卵囊基数（0h）。以同样的方法分别吸取各试验组静置2、4、6、8、10、12h后的上层卵囊液并进行混合和卵囊计数，并计算卵囊在不同试剂中静置不同时间后的悬浮效率。悬浮效率计算公式为：各组静置不同时间段的上层卵囊量/对应组0h卵囊基数×100%。各组悬浮率计算结果显示，球虫卵囊在0.15%—0.5%海藻酸钠溶液中静置8h后，上层卵囊量仍维持90%以上；球虫卵囊在0.1%海藻酸钠溶液中静置4h后的上层卵囊量为97.61%，6h后的上层卵囊量为87.85%；而球虫卵囊在0.1%羧甲基纤维素钠溶液中静置4h后的卵囊量仅为88.89%，仅相当于球虫卵囊在0.1%海藻酸钠溶液中静置6h的悬浮效果，各试剂悬浮效果如表1。结果表明，0.1%海藻酸钠溶液悬浮球虫卵囊的时间可达6h，0.15%—本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鸡球虫病活卵囊疫苗助悬剂，其特征在于：在常温下配制海藻酸钠水溶液，再加入鸡球虫病活卵囊疫苗，搅拌混匀而成，其中海藻酸钠溶液的质量体积比浓度为0.1—0.5%。

【技术特征摘要】
1.一种鸡球虫病活卵囊疫苗助悬剂，其特征在于：在常温下配制海藻酸钠水溶液，再加入鸡球虫病活卵囊疫苗，搅拌混匀而成，其中海藻酸钠溶液的质量体积比...

【专利技术属性】
技术研发人员：龚振兴，刘百林，魏红梅，余荣霞，刘宇，殷宏，
申请(专利权)人：中农威特生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：甘肃,62