新蛋白材料制造技术

本发明专利技术涉及一种新蛋白材料。所述蛋白材料包含2～15mg/100mg的量的血管生成素和/或血管生成素水解产物，以及与血管生成素和/或血管生成素水解产物的质量比为0.003～0.6的抑半胱氨酸蛋白酶蛋白和/或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白水解产物。

【技术实现步骤摘要】
新蛋白材料本申请是申请日为2012年07月31日、进入中国的申请号为201280074973.9、专利技术名称为“新蛋白材料”的申请的分案申请。
本专利技术涉及新蛋白材料，和包含该蛋白材料的药物、饮食品或饲料，并用于预防和治疗骨疾病。该蛋白材料具有促进成骨细胞增殖，并抑制破骨细胞分化和破骨细胞的骨吸收的功能。因此，该蛋白材料用于预防和治疗各种骨疾病，如骨质疏松症、骨折、风湿病和关节炎。
技术介绍
近年来，在全球范围内伴随着社会老龄化等，各种骨疾病，例如骨质疏松、骨折和腰疼增加，并且已变为严重的社会问题。这些疾病由钙摄入不足，钙吸收能力下降，闭经期后激素失衡等引起。据认为，从生命早期开始通过活化成骨细胞和骨形成尽可能地增加体内骨量，并且增加最大骨量和骨强度(骨密度+骨质)在预防各种骨疾病，例如骨质疏松、骨折和腰疼方面是有效的。注意术语“骨质”涉及骨显微结构、代谢更新(metabolicturnover)、微裂纹和钙化。据称各种骨疾病，例如骨质疏松、骨折和腰疼可通过抑制破骨细胞的骨吸收来预防。骨以平衡的方式反复吸收和形成(重塑)。然而，当由于闭经期后激素平衡变化等引起骨吸收超过骨形成时，可发生各种骨疾病，例如骨质疏松、骨折和腰疼。因此，通过抑制破骨细胞的骨吸收和维持骨强度在恒定水平可使骨得到强化。考虑到上述情形，为了强化骨，已摄取了单独添加钙盐，例如碳酸钙、磷酸钙或乳酸钙的钙盐或者天然钙制品，例如乳清钙、牛骨粉或鸡蛋壳的药物、饮食品或饲料等。还使用包含此类钙制品以及具有钙吸收促进效果的物质，例如酪蛋白磷肽或寡聚多糖的药物、饮食品或饲料等来强化骨。然而，当摄取包含钙盐或天然钙制品的饮食品时钙吸收率为50％以下，并且摄取的大部分钙可能排出体外而没有被吸收。另外，即使钙被吸收入体内，由于对骨的亲和性可根据其形式或同时摄取的营养成分的类型而不同，也未必显示骨代谢改善效果或骨强化效果。作为用于治疗骨质疏松或强化骨的药物已知雌激素制品、活性维生素D3制品、维生素K2制品、双膦酸盐制品和降钙素制品等，并且还开发了新型药物例如抗RANKL抗体。然而，这些药物可具有副作用例如耳鸣、头痛或食欲不振。另外，从安全和成本等观点，目前上述物质处于不能将其添加到饮食品的状况。因此，已需要开发根据各种骨疾病例如骨质疏松、骨折和腰疼的性质，可长期经口摄取，通过促进骨形成和抑制骨吸收来增加骨强度，并且可期望具有预防或治疗各种骨疾病的效果的此类骨强化剂、饮食品或饲料。存在几种意欲改善骨强度的食材，例如，已报道了源自乳的碱性蛋白质或其酶促水解产物的肽级分显示成骨细胞增殖活性、破骨细胞的骨吸收抑制活性，以及由此的骨强化作用(参见专利文献1)。还已报道了包含在源自乳的碱性蛋白级分的血管生成素和抑半胱氨酸蛋白酶蛋白独立地具有改善骨代谢的功能(参见专利文献2和3)。现有技术文献专利文献[专利文献1]JP-A-H08-151331[专利文献2]JP-A-H10-7585[专利文献3]JP-A-2000-281587
技术实现思路
专利技术要解决的问题本专利技术的目的为提供新蛋白材料，所述蛋白材料安全，且通过日常摄取促进成骨细胞增殖，同时抑制破骨细胞分化和破骨细胞的骨吸收，因而可强化骨。本专利技术的另一目的为提供通过经口摄取用于预防和治疗各种骨疾病如骨质疏松症、骨折、风湿病和关节炎的骨强化药物、饮食品或饲料。用于解决问题的方案本专利技术人已发现，有效促进成骨细胞增殖以及抑制破骨细胞分化和破骨细胞的骨吸收的作用可通过摄取包含特定量血管生成素和/或血管生成素的水解产物，并相对于血管生成素和/或血管生成素的水解产物以特定的质量比进一步包含抑半胱氨酸蛋白酶蛋白(cystatin)和/或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白的水解产物的蛋白材料来获得。该发现导致本专利技术的完成。具体地，本专利技术包括以下方面：(1)一种蛋白材料，其包含2～15mg/100mg的量的血管生成素和/或血管生成素的水解产物，以及以与血管生成素和/或血管生成素的水解产物的质量比为0.003～0.6的抑半胱氨酸蛋白酶蛋白和/或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白的水解产物。(2)一种饮食品或饲料，其包含根据(1)所述的蛋白材料。(3)一种骨强化剂，其包含根据(1)所述的蛋白材料作为活性成分。(4)一种骨强化方法，其包括以5mg/天以上的量摄取根据(1)所述的蛋白材料。(5)一种制备根据(1)所述的蛋白材料的方法，其包括下列步骤1)～3)：1)制备血管生成素和/或血管生成素的水解产物；2)制备抑半胱氨酸蛋白酶蛋白和/或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白的水解产物；和3)混合根据上述2)所述的抑半胱氨酸蛋白酶蛋白和/或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白的水解产物以及根据上述1)所述的血管生成素和/或血管生成素的水解产物，以使得抑半胱氨酸蛋白酶蛋白和/或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白的水解产物与血管生成素和/或血管生成素的水解产物的质量比为0.003～0.6。(6)一种制造根据(1)所述的蛋白材料的方法，其包括从乳和/或源自乳的材料提取包含血管生成素和/或血管生成素的水解产物以及抑半胱氨酸蛋白酶蛋白和/或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白的水解产物的级分，以使得抑半胱氨酸蛋白酶蛋白和/或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白的水解产物与血管生成素和/或血管生成素的水解产物的质量比为0.003～0.6。(7)根据(6)所述的方法，其进一步包括将包含于所述级分中的血管生成素和/或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白酶促水解的另外的步骤。专利技术的效果本专利技术的蛋白材料通过促进成骨细胞增殖以及抑制破骨细胞分化和破骨细胞的骨吸收而显示显著的骨强化作用。本专利技术的药物、饮食品或饲料强化骨，且用于预防和治疗各种骨疾病，如骨质疏松症、骨折、风湿病和关节炎。具体实施方式本专利技术的蛋白材料的特征在于，该蛋白材料包括特定量的血管生成素和/或血管生成素的水解产物，并且相对于血管生成素和/或血管生成素的水解产物以特定质量比进一步包含抑半胱氨酸蛋白酶蛋白和/或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白的水解产物。本专利技术的蛋白材料可为通过以特定质量比混合包含血管生成素和/或血管生成素的水解产物的级分以及包含抑半胱氨酸蛋白酶蛋白和/或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白的水解产物的级分获得的混合物，或者通过从乳或源自乳的材料如脱脂乳或乳清等提取以特定质量比包含血管生成素和/或血管生成素的水解产物以及抑半胱氨酸蛋白酶蛋白和/或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白的水解产物的级分来制备的材料等。本专利技术的蛋白材料还可包括通过酶促水解血管生成素和/或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白制备的材料。当通过混合包含血管生成素和/或血管生成素的水解产物的级分以及包含抑半胱氨酸蛋白酶蛋白和/或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白的水解产物的级分来制备本专利技术的蛋白材料时，由哺乳动物如人、奶牛、水牛、山羊或绵羊的乳制备的级分，通过基因工程生产的级分，或由血液或内脏器官纯化的级分等可用作包含血管生成素和/或血管生成素的水解产物的级分以及包含抑半胱氨酸蛋白酶蛋白和/或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白的水解产物的级分。也可使用商购可得的纯化的血管生成素或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白试剂。在该情况下，本专利技术的蛋白材料可通过调整抑半胱氨酸蛋白酶蛋白和/或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白的水解产物与血管生成素和/或血管生成素的水解产物的质量比来制备。使用一种以上的蛋白酶通过酶促水解上述包含血管生成素的级分、血管生成素试剂本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蛋白材料，其包含2～15mg/100mg的量的血管生成素和/或血管生成素水解产物和与血管生成素和/或血管生成素水解产物的质量比为0.003～0.6的抑半胱氨酸蛋白酶蛋白和/或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白水解产物，所述血管生成素水解产物和所述抑半胱氨酸蛋白酶蛋白水解产物的分子量为500‑8000。

【技术特征摘要】
1.一种蛋白材料，其包含2～15mg/100mg的量的血管生成素和/或血管生成素水解产物和与血管生成素和/或血管生成素水解产物的质量比为0.003～0.6的抑半胱氨酸蛋白酶蛋白和/或抑半胱氨酸蛋白酶蛋白水解产物，所述血管生成素水解产物和所述抑半胱氨酸蛋白酶蛋白水解产物的分子量为500-8000。2.一种饮食品或饲料，其包含根据权利要求1所述的蛋白材料。3.一种骨强化剂，其包含根据权利要求1所述的蛋白材料作为活性成分。4.根据权利要求1所述的蛋白材料在制备通过骨强化方法来强化骨的药剂中的用途，所述骨强化方法包括以5mg/天以上的量摄取根据权利要求1所述的蛋白材料。5.一种制备根据权利要求1所述的蛋白材料的方法，其包括下列步骤1)～3)：1)制备血管生成素和/或血管生...

【专利技术属性】
技术研发人员：大町爱子，松山博昭，森田如一，石田祐子，奈良贵幸，加藤健，芹泽笃，
申请(专利权)人：雪印惠乳业株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP