用于治疗乳腺癌的miRNA制造技术

本发明专利技术公开的主题涉及基于RNA的组合物和治疗受试者中的乳腺癌的方法。更具体地，本发明专利技术公开的主题涉及包含多分支RNA纳米颗粒、乳腺癌靶向模块和有效量的乳腺癌治疗剂的RNA纳米结构和组合物。此外，目前公开的主题涉及使用RNA纳米颗粒组合物治疗患有乳腺癌或处于患乳腺癌风险中的受试者的乳腺癌的方法。

MiRNA for the treatment of breast cancer

The disclosure of the present invention relates to a composition based on RNA and a method for the treatment of breast cancer in the subjects. More specifically, the theme of the invention relates to RNA nanostructures and compositions containing multiple branched RNA nanoparticles, breast cancer targeting modules and effective amounts of breast cancer therapeutic agents. In addition, the current open topic concerns the use of RNA nanoparticle composition for breast cancer patients who are suffering from breast cancer or who are at risk of breast cancer.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗乳腺癌的miRNA相关申请本申请要求于2015年3月9日提交的美国临时专利申请号62/130,533和于2015年6月15日提交的美国临时专利申请号62/175,774的权益，其全部内容通过引证并入本文。政府利益本专利技术是在由国立卫生研究院授予的EB019036、CA151648和EB0037305以及由国防部授予的BC140428下的政府支持下进行。政府对本专利技术具有一定的权利。
本专利技术公开的主题涉及治疗受试者中乳腺癌的RNA纳米结构和方法。更具体地，本专利技术公开的主题涉及包含多分支RNA纳米颗粒、乳腺癌靶向模块和有效量的乳腺癌治疗剂的RNA纳米结构和组合物。此外，目前公开的主题涉及使用RNA纳米颗粒组合物治疗患有乳腺癌或处于患乳腺癌风险中的受试者的乳腺癌的方法。
技术介绍
由于侵袭性增殖和转移和缺乏多样化的治疗选择，三阴性乳腺癌(TNBC)具有高死亡率。TNBC，代表I5至20％的乳腺癌，在年轻女性中更频繁地发生。非洲裔美国妇女和个体携带这些BRCA1基因。目前，没有TNBC的治疗性治疗，并且可用的化学疗法与显著的毒性和耐药性的发展相关。因此，TNBC患者的预后仍然很差。五年存活率小于74.5％，相比之下，HER2阳性乳腺癌的存活率为87％和ER阳性乳腺癌的存活率超过90％。因此，存在对TNBC靶向治疗剂开发的迫切和未满足的需求。该介绍仅提供一般的背景信息，并且不旨在用于帮助确定所要求保护的主题的范围。
技术实现思路
当前公开的主题满足一些或所有上述需要，这对于本领域的普通技术人员经过对本文档中提供的信息的研究之后将变得清晰明了。本专利技术内容描述了当前公开的主题的若干实施例，并且在许多情况下列出了这些实施例的变型和置换。本
技术实现思路
仅仅是众多和变化的实施例的示例。提及给定实施例的一个或多个代表性特征同样是示例性的。这样的实施例通常可以具有或不具有所提及的特征；同样，那些特征可以应用于本公开主题的其它实施例，无论是否在本
技术实现思路
中列出。本
技术实现思路
没有列出或表明这些特征的所有可能的组合。本专利技术公开的主题涉及治疗受试者的乳腺癌的基于RNA的组合物和方法。更具体地，本专利技术公开的主题涉及包含多分支RNA纳米颗粒、乳腺癌靶向模块和有效量的乳腺癌治疗剂的RNA纳米结构和组合物。此外，本专利技术公开的主题涉及使用RNA纳米颗粒组合物治疗患有乳腺癌或处于患乳腺癌风险中的受试者的乳腺癌的方法。本专利技术公开的主题涉及人工RNA纳米结构分子。该分子包括包含至少一个RNA寡核苷酸的多分支RNA连接基序以及与RNA连接基序偶联的乳腺癌靶向模块。在一些实施方案中，所述分子还包括与RNA连接基序偶联的至少一种生物活性剂。在一些实施方案中，RNA寡核苷酸长度为至少3个核苷酸。在一些实施方案中，生物活性剂是治疗剂。在一些实施方案中，RNA寡核苷酸包括在2’位置的至少一个化学修饰。化学修饰的非限制性实例包括2’-氟、2’-氨基、2’-O-甲基。在一些实施方案中，多分支RNA连接基序是三分支RNA连接基序。在本公开的一些实施方案中，RNA分子形成二聚体、三聚体、六聚体和图案化的超结构。此外，在一些实施方案中，多分支RNA包含序列5’-UUGCCAUGUGUAUGUGGGAUCCCGCGGCCAUGGCGGCCGGGAG-3’(SEQIDNO：5)。在一些实施方案中，多分支RNA包含序列5’-CCCACAUACUUUGUUGAUCCGCCUUAGUAACGUGCUUUGAUGUCGAUUCGACAGGAGGC-3’(SEQIDNO：6)。在一些实施方案中，多分支RNA包含序列5’-GATAAGCTCTCCCGGCCGCCATGGCCGCGGGAT-3’(SEQIDNO：7)。在一些实施方案中，多分支RNA包含序列5’-CTCCCGGCCGCCATGGCCGCGGGAT-3’(SEQIDNO：8)。在一些实施方案中，多分支RNA包含序列5’-AUCCCGCGGCCAUGGCGGCCGGGAG-3’(SEQIDNO：9)。在一些实施方案中，分子的直径为至少约40nm或更小。在一些实施方案中，分子的直径为至少约20nm或更小。在一些实施方案中，分子的直径为至少约10nm或更小。在一些实施方案中，分子具有约-100mV至约100mV范围的ζ电位。在一些实施方案中，分子具有约-50mv至约50mV的ζ电位。在一些实施方案中，三分支RNA连接基序的分支包括a3WJRNA模块(SEQIDNO：1)、b3WJRNA模块(SEQIDNO：2)或c3WJRNA模块(SEQIDNO：3)。在一些实施方案中，三分支RNA连接基序包括a3WJRNA模块(SEQIDNO：1)、b3WJRNA模块(SEQIDNO：2)、和c3WJRNA模块(SEQIDNO：3)。在一些实施方案中，SEQIDNO：1包含核苷酸序列5’-UUGCCAUGUGUAUGUGGG-3’。在一些实施方案中，SEQIDNO：2包括核苷酸序列5’-CCCACAUACUUUGUUGAUCC-3’。在一些实施方案中，SEQIDNO：3包含核苷酸序列5’-GGAUCAAUCAUGGCAA-3’。在一些实施方案中，乳腺癌靶向模块包括结合至少一种乳腺癌细胞表面标记物的配体。在一些实施方案中，配体结合至叶酸受体、表皮生长因子受体2(ErbB-2/HER2)、表皮生长因子受体(EGFR)、HER2或其组合。在一些实施方案中，配体是适体。在一些实施方案中，配体是EGFR靶向适体。在一些实施方案中，适体结合至EGFR、PDGFR、叶酸受体或其组合。在一些实施方案中，适体具有序列5’-GCCUUAGUAACGUGCUUUGAUGUCGAUUCGACAGGAGGC-3’(SEQIDNO：10)。在一些实施方案中，靶向模块是叶酸(folate)。叶酸的非限制性实例是氧化型叶酸(folicacid)、5-甲基四氢叶酸、5-甲酰基四氢叶酸，二氢叶酸、四氢叶酸或其他叶酸化合物。在一些实施方案中，本专利技术公开的主题提供生物活性剂是治疗剂。在一些实施方案中，生物活性剂是药物、荧光染料或化学品、或其组合。在一些实施方案中，生物活性剂是siRNA、miRNA、抗miRNA、核酶RNA、反义RNA。在一些实施方案中，生物活性剂针对乳腺癌标记物。在一些实施方案中，生物活性剂是siRNA序列或微RNA序列。在一些实施方案中，siRNA结合至癌基因的mRNA分子。非限制性癌基因包括RAS、cMET、HER2、MDM2、PIK3CA、AKT、CDK4或其组合。在一些实施方案中，生物活性剂是miRNA的抗miRNA分子，其干扰miRNA以复原癌症生长。miRNA的非限制性实例包括miR-9、miR-10b、miR-21、miR-17和miR-26。在一些实施方案中，RNA纳米结构分子引入肿瘤抑制性miRNA以拯救下调的肿瘤抑制性miRNA。miRNA的非限制性实例包括let-7a、miR-10b、miR-25、miR-34a、miR-124、miR-145和miR-181b。在一些实施方案中，微RNA序列是抗miR-21序列。在一些实施方案中，miRNA序列的非限制性实例包含5’-GATAAGCT-3’(SEQIDNO：11)、5’-AGCACTT本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人工RNA纳米结构分子，包含：包含至少一种RNA寡核苷酸的多分支RNA连接基序，和与所述RNA连接基序偶联的乳腺癌靶向模块。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.03.09 US 62/130,533;2015.06.15 US 62/175,7741.一种人工RNA纳米结构分子，包含：包含至少一种RNA寡核苷酸的多分支RNA连接基序，和与所述RNA连接基序偶联的乳腺癌靶向模块。2.根据权利要求1所述的分子，进一步包含与所述RNA连接基序偶联的至少一种生物活性剂。3.根据权利要求1所述的分子，其中所述生物活性剂是治疗剂。4.根据权利要求1所述的分子，其中所述RNA寡核苷酸在2’位置包含至少一个化学修饰。5.根据权利要求1所述的分子，其中所述修饰包括2’氟、2’胺基和2’O-甲基。6.根据权利要求1所述的分子，其中所述多分支RNA连接基序是三分支RNA连接基序。7.根据权利要求1所述的分子，其中所述多分支RNA包含序列5’-UUGCCAUGUGUAUGUGGGAUCCCGCGGCCAUGGCGGCCGGGAG-3’(SEQIDNO：5)。8.根据权利要求1所述的分子，其中所述多分支RNA包含序列5’-CCCACAUACUUUGUUGAUCCGCCUUAGUAACGUGCUUUGAUGUCGAUUCGACAGGAGGC-3’(SEQIDNO：6)。9.根据权利要求1所述的分子，其中所述多分支RNA包含序列5’-GATAAGCTCTCCCGGCCGCCATGGCCGCGGGAT-3’(SEQIDNO：7)。10.根据权利要求1所述的分子，其中所述多分支RNA包含序列5’-CTCCCGGCCGCCATGGCCGCGGGAT-3’(SEQIDNO：8)。11.根据权利要求1所述的分子，其中所述多分支RNA包含序列5’-AUCCCGCGGCCAUGGCGGCCGGGAG-3’(SEQIDNO：9)。12.根据权利要求1所述的分子，其中所述分子的直径为至少约40nm或更小。13.根据权利要求12所述的分子，其中所述分子的直径为至少约20nm或更小。14.根据权利要求13所述的分子，其中所述分子的直径为至少约10nm或更小。15.根据权利要求1所述的分子，其中所述分子具有范围从约-100mV至约100mV的ζ电位。16.根据权利要求1所述的分子，其中所述分子具有范围从约-50mV至约50mV的ζ电位。17.根据权利要求6所述的分子，其中所述三分支RNA连接基序的分支包含a3WJRNA模块(SEQIDNO：1)、b3WJRNA模块(SEQIDNO：2)或c3WJRNA模块(SEQIDNO：3)。18.根据权利要求6所述的分子，其中所述三分支RNA连接基序包含a3WJRNA模块(SEQIDNO：1)、b3WJRNA模块(SEQIDNO：2)和c3WJRNA模块(SEQIDNO：3)。19.根据权利要求17或18所述的分子，其中SEQIDNO：1包含核苷酸序列5’-UUGCCAUGUGUAUGUGGG-3’。20.根据权利要求17或18所述的分子，其中SEQIDNO：2包含核苷酸序列5’-CCCACAUACUUUGUUGAUCC-3’。21.根据权利要求17或18所述的分子，其中SEQIDNO：3包含核苷酸序列5’-GGAUCAAUCAUGGCAA-3’。22.根据权利要求1所述的分子，其中所述乳腺癌靶向模块包含结合至至少一种乳腺癌细胞表面标记物的配体。23.根据权利要求22所述的分子，其中所述配体...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭培宣，舒丹，束弋，李晖，法尔兹因·哈克，
申请(专利权)人：肯塔基大学研究基金会，
类型：发明
国别省市：美国,US