一种用于体外牙本质屏障细胞毒性实验的实验装置制造方法及图纸

一种用于体外牙本质屏障细胞毒性实验的实验装置，包合培养皿和材料固定圈，所述培养皿上的培养井内盛放细胞培养液，培养井上有一个平台用于放置牙本质片或者其他替代材料，以及在上面放置材料固定圈，牙科修复充填材料充填于固定圈的内圈内，所述培养皿上面有保护盖。培养皿的培养井中的细胞营养液通过放在上面的牙本质片或者替代材料的微小空隙渗入材料固定圈，与材料固定圈中的牙科修复充填材料接触，进而可测定培养井内细胞培养液中的靶细胞的增值率以及观察细胞形态，判断待测牙科修复充填材料的细胞毒性，该体外细胞毒性实验与在体实验有更好的相关性，能更好的测定牙齿修复材料的生物相容性，目结构简单，使用方便，制造价格低廉，实验结果重复性好。

An experimental apparatus for cytotoxicity test of dentin barrier in vitro

An experimental apparatus for in vitro cytotoxicity of dentin barrier, the inclusion of Petri dishes and material fixed ring, the Petri dish containing culture medium in cell culture wells, wells have a platform for placing dentine plates or other alternative materials, and placing materials fixed ring on dental restoration filling materials on the fixed ring of the inner ring, the dish above the protective cover. Cell culture in nutrient solution culture dish by placed above the dentin slices or substitute small gap into fixed ring material, contact dental filling materials and material fixed circle, which can be determined in a well cultured cell culture fluid in the increment rate of target cells and observe cell morphology, test the cytotoxicity of dental filling materials, the in vitro cytotoxicity test and in vivo experiments have better correlation, compatibility can better determine the biological target material for dental restoration, simple structure, convenient manufacture, low price, good repeatability of experimental results.

【技术实现步骤摘要】
一种用于体外牙本质屏障细胞毒性实验的实验装置
本专利技术涉及一种用于体外牙本质屏障细胞毒性实验的实验装置
技术介绍
随着科学的发展技术的进步，有越来越多的新型牙科充填修复材料出现。这些牙齿充填修复材料能被临床接受的先决条件是必须经过安全性和有效性的检测与评价，而且生物相容性的测定是确保材料能安全地应用于人体的重要前提条件。生物相容性是指生命体组织对非活性材料产生反应的一种性能，一般是指材料与宿主之间的相容性。生物材料植入人体后，对特定的生物组织环境产生影响和作用，生物组织对生物材料也会产生影响和作用，两者的循环作用一直持续，直到达到平衡或者植入物被去除。生物相容性是生物材料研究中始终贯穿的主题。评价口腔材料生物相容性的主要手段分为体外试验、动物试验和临床试验。尽管体外试验的临床相关性较其他两种方法略为不足，然而其具有简便、快捷且可以避免对动物和人体的伤害等优点，因此实际应用较为普遍。口腔材料的体外细胞毒性试验方法分为三类，即浸提液试验、直接接触试验和间接接触试验。牙体充填材料主要使用浸提液试验和间接接触试验。其中浸提液试验中的MTT法、XTT法、中性红摄取法等试验可定量测定细胞毒性，间接接触试验中常用的琼脂扩散法和滤膜扩散法属于定性评价材料的细胞毒性。尽管上述方法已普遍用于口腔材料生物相容性的检测，但许多研究表明，传统的体外试验中细胞的反应与体内试验中牙髓细胞的反应之间的相关性较低，此差异与牙本质的结构和牙髓细胞在体内的特殊生长环境有关。因牙体充填材料与人体的接触方式特殊，即在材料与牙髓细胞之间有牙本质的分隔，有学者于上世纪八十年代提出了一种专门适用于牙体充填材料的利用牙本质为屏障的体外细胞毒性试验，且发现其结果与临床实际情况有很好的相关性。经过不同学者长期的试验与研究，试验方法有很大改进，试验装置也发展为固定模型。目前应用的牙本质屏障法模拟了牙体充填材料充填入牙体后与牙本质接触的过程，材料及其可滤沥成分通过牙本质小管渗透到牙本质下方的细胞并与其接触，可以通过定量分析细胞的存活从而判定材料的细胞毒性。与其他体外细胞毒性试验相比，此法更好地模拟了临床实际情况，具有替代动物试验(如牙髓牙本质试验)的可能性，更加适合用于评价牙体充填材料以及与牙本质直接接触材料的细胞毒性。此法在2008年被国际化标准组织ISO列入牙科医疗器械生物相容性评价国际标准的资料性附录B中，并已广泛应用于相关材料的毒性研究。
技术实现思路
本专利技术专利技术的目的在于提供一种用于体外牙本质屏障细胞毒性实验的实验装置，用它可以进行测定与牙本质直接接触的牙齿充填修复材料的细胞毒性，进而评价该牙齿充填修复材料的生物相容性。通过该装置，可以模拟牙齿充填修复材料与牙髓细胞的接触方式，更好地模拟在体情况，解决现有技术中，部分牙齿充填修复材料的体内与体外生物相容性实验结果不一致的问题。本专利技术专利技术的目的是这样实现的，一种用于体外牙本质屏障细胞毒性实验的实验装置，包括培养皿上的培养井，以及对应的材料固定圈，所述的培养井中盛放有细胞培养液，所述的培养皿上方有保护盖，待测牙齿充填修复材料放置在材料固定圈内，材料固定圈置于屏障片上，屏障片放在培养皿内培养井的内环形平台上。所述培养皿中的培养井深度可根据需要进行调节。所述屏障片为离体人牙或牛牙的牙本质片，或多孔陶瓷片，或其他替代性材料，厚度可根据需要调节。所述培养皿、材料固定圈、保护盖均为光学级PMMA或聚苯乙烯树脂材料或其他可用来培养细胞的材料制成。本专利技术专利技术具有如下有益效果，本专利技术专利技术的培养皿中的培养井内放置细胞培养液，培养井上面的环形平台上放置屏障片，细胞培养液与屏障片相接触；屏障片上放置材料固定圈，材料置于其中。待测材料自身析出的化学成分可以通过屏障片与细胞培养液接触，进而影响细胞的生长。通过测定培养液中细胞的增值率以及观察细胞的形态结构，可以判断待测材料的细胞毒性。本专利技术专利技术实验装置与在体实验有更好的相关性，能更好地模拟临床实际状态，能更好地测定牙齿充填修复材料的生物相容性，并且结构简单，制造成本低廉，使用方便，实验结果重复性好。附图说明图1为本专利技术专利技术中培养皿、材料固定圈和培养皿上方的保护盖的结构示意图；图2为本专利技术专利技术中独立单元的结构示意图；图3为本专利技术专利技术的横截面示意图；图中，1.培养皿的底座、2.培养皿、3、培养皿中的培养井、4.材料固定圈、5.培养皿的保护盖、6.屏障片、7.待测牙科修复充填材料。具体实施方式实施例1，一种用于体外牙本质屏障细胞毒性实验的实验装置，包括用于培养细胞的培养井3、材料固定圈4、培养皿保护盖5，以及培养皿2。培养皿2与培养皿底座1是一体化的，培养皿内有15个培养井3，分三排排列，每排5个，培养井内的深度可以调节。屏障片6置于培养井上圆环形平台3上，屏障片可以为离体的人牙本质片，或具有与其相似通透性的替代材料的屏障片，屏障片的厚度可以根据实验需要进行调节。材料固定圈4为15个，分别置于每个培养井3的平台上的屏障片6上。屏障片6的直径大于培养井3的内径，直接放置于培养井上的圆环形平台上，不需要任何粘结。该步骤操作简单、稳定。培养皿2上可以根据实验需要制作多个培养井3，这些培养井3均与底座1连接为一体。屏障片6置于培养井3上的圆环形平台后，与培养井3内的细胞培养液相接触，培养井3内接种有细胞。材料固定圈4置于屏障片6上，待测的牙齿充填修复材料7填充于材料固定圈4内，该操作顺序完全模拟临床实际操作过程。培养井3内的细胞培养液可以通过屏障片6渗透，与材料固定圈4内的待测材料7相接触。同时，待测材料7的化学成分也会通过屏障片6与培养井3内的细胞培养液相接触，进而影响培养井3内的细胞。作用一段时间后，移除待测材料7、材料固定圈4、屏障片6，测定培养井3内的细胞增值率和观察细胞的形态结构。根据细胞的增值率以及细胞的形态结构判断待测牙科修复充填材料的细胞毒性。上述的所有装置均为光学级PMMA或聚苯乙烯树脂或其他可用于培养细胞的材料加工制成。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于体外牙本质屏障细胞毒性实验的实验装置，其特征在于：包括培养皿2，培养皿中的培养井3，培养井3内盛放细胞培养液，屏障片6置于培养井3上的圆环形平台上，材料固定圈4置于屏障片6上，待测材料7应用于材料固定圈4内，保护盖5置于整个培养皿2上。

【技术特征摘要】
1.一种用于体外牙本质屏障细胞毒性实验的实验装置，其特征在于：包括培养皿2，培养皿中的培养井3，培养井3内盛放细胞培养液，屏障片6置于培养井3上的圆环形平台上，材料固定圈4置于屏障片6上，待测材料7应用于材料固定圈4内，保护盖5置于整个培养皿2上。2.如权利要求1所述的一种用于体外牙本质屏障细胞毒性实验的实验装置，其特征在于：所述培养井3的深度和直径可以根据实验需要设计成其他的尺寸。3.如权利要求1和2所述的一种用于体外牙本质屏障细胞毒性实验的实验装置，其特征在于：所述培养皿2上可以根据实验需要制作多个培养井3，这些培养井3均与底座1...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑刚，林红，胡孟龙，
申请(专利权)人：北京大学口腔医学院，
类型：发明
国别省市：北京,11