一种新的短葶山麦冬鲁斯可甾体皂苷类化合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种新的短葶山麦冬鲁斯可甾体皂苷类化合物及其应用，所述短葶山麦冬鲁斯可甾体皂苷类化合物是具有式Ⅰ结构的化合物，本发明专利技术提供的化合物对血栓、肿瘤及治疗肿瘤并发症具有治疗作用，为临床治疗肿瘤细胞提供了新的药物。同时，在肿瘤治疗的辅助环节，本发明专利技术提供的化合物可以减少化疗药物对心血管系统的损坏。

A new kind of l.muscari rusco steroidal saponins and its preparation method and Application

The present invention relates to a novel l.muscari rusco steroidal saponins and its application, the l.muscari rusco steroidal saponins are compounds of the formula I compound provided by the invention has therapeutic effect on tumor thrombus, tumor complications and treatment, provide new drugs for the clinical treatment of tumor cells. At the same time, the compound provided by the invention can reduce the damage to the cardiovascular system caused by chemotherapeutic drugs.

【技术实现步骤摘要】
一种新的短葶山麦冬鲁斯可甾体皂苷类化合物及其制备方法和应用
本专利技术涉及从短葶山麦冬地下部位中提取分离的一组五个鲁斯可甾体皂苷类新化合物、制备方法及在抗肿瘤方面的用途。
技术介绍
短葶山麦冬为百合科(Lilaceae)山麦冬属(Liriope)植物短葶山麦冬Liriopemuscari(Decne)Baily的干燥块根，是《中国药典》一部“山麦冬”项下收载的常用中药。具有养阴润肺，益胃生津的功效，可用于肺燥干咳，阴虚痨嗽，喉痹咽痛，津伤口渴，内热消渴，心烦失眠，肠燥便秘”，广泛用于心血管系统、呼吸系统疾病及糖尿病等疾病的治疗。药理实验表明，短葶山麦冬药材可以显著延长小鼠存活时间、极显著增加小鼠的脾脏重量、显著增强小鼠的碳粒廓清作用。前期研究表明，短葶山麦冬中主要含甾体皂苷类、萜类、酰胺生物碱类、脂肪酸类等化合物，其中甾体皂苷是其主要生物活性成分。药理作用表明，短葶山麦冬药材中分离所得的甾体皂苷类化合物DT-13为其主要活性成分，其能抑制肺癌、乳腺癌、黑色素瘤等肿瘤的生长和转移，并发现其通过与蛋白NMMHCIIA结合，调节肿瘤转移过程中的多种关键分子，进而抑制肿瘤。长期以来，在市场上，尤其是在福建省泉州市，惠安，仙游等地将短葶山麦冬作为麦冬Ophiopogonjaponicus的替代品使用。国内外学者对该植物化学成分研究报道甚少，仅有的文献大部分集中在专利技术人所在研究小组对其成分的研究上，经过大量的研究专利技术人意外的发现一类新的鲁斯可甾体皂苷类化合物。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供从短葶山麦冬地下部位中分离出的5个鲁斯可甾体皂苷类新化合物。本专利技术提供了一个具有通式Ⅰ结构的化合物或药学上可接受的盐：式中：R1为H、-CH2OH或-CH3；R2为吡喃木糖；R3为吡喃木糖、鼠李糖或岩藻糖。注：式Ⅰ右侧的破折线是异构体的标志，可以为R型也可以为S型或R型和S型的混合物。优选的，本专利技术所述化合物选自以下结构的化合物：本专利技术进一步包括制备本专利技术所述化合物或药学上可接受的盐的方法，所述方法包括以下步骤：1)称取粉碎的短葶山麦冬地下部位，加入乙醇，搅匀，回流提取，过滤，合并滤液，减压回收乙醇，备用；2)将药液直接用大孔树脂吸附,并用水和低浓度乙醇除杂，高浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，备用；3)将(2)中所得药液用乙酸乙酯多次萃取，再用正丁醇多次萃取，将萃取液分别浓缩至浸膏，分别获得乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物；4)将正丁醇萃取物进行硅胶柱色谱分离，用氯仿-甲醇进行梯度洗脱，收集I2至I8部分的洗脱液，用薄层色谱进行检测，显色，合并相同部分，浓缩至干，备用；5)将硅胶柱层析I2至I8部分分别用凝胶SephadexLH-20进行柱层析，用氯仿-甲醇进行洗脱除杂，分别收集所得洗脱液，减压回收浓缩至干得II2至II8，备用；6)将II6部分以RP-18为填料，用高压液相色谱仪进行分离纯化，得式1化合物或式2化合物；将II7部分以RP-18为填料，用高压液相色谱仪进行分离纯化，得式3化合物、式4化合物或式5化合物。其中，所述步骤1)：提取用的乙醇为50-70％的乙醇，其用量是药材重量的6-10倍体积。其中，所述步骤2)：所用大孔树脂为D101型，除杂乙醇浓度为20％-30％，所得合并液为50％-75％洗脱部分。其中，所述步骤3)中：乙酸乙酯的用量是药液的体积比为1:1～3：1；正丁醇的用量是药液的体积比为1:1～3：1。其中，所述步骤(4)中：所述梯度洗脱，洗脱方式为氯仿-甲醇体积比为10:1，9:1，8:2，7:3，6:4，5:5，4:6，3:7，2:8；其中，所述步骤(6)中：II6的纯化过程为：以甲醇-水为流动相，梯度洗脱条件如下：0到10分钟，甲醇-水为流动相中，甲醇体积浓度为60％，水的浓度为40％；10到20分钟，甲醇的浓度匀速变为70％，水的浓度为30％；20到30分钟，甲醇的浓度匀速变为80％，水的浓度为20％，根据化合物的保留时间不同，共收集到两个主要馏分，经过分别浓缩馏分，回收溶剂，得式1化合物或式2化合物；II7的纯化过程为：以甲醇-水为流动相，梯度洗脱条件如下：0到10分钟，甲醇-水为流动相中，甲醇体积浓度为50％，水的浓度为50％；10到20分钟，甲醇的浓度匀速变为60％，水的浓度为40％；20到30分钟，甲醇的浓度匀速变为70％，水的浓度为30％，根据化合物的保留时间不同，共收集到三个主要的馏分，经过分别浓缩馏分，回收溶剂，得式3化合物、式4化合物或式5化合物。优选的，本专利技术的方法包括以下步骤：1)称取粉碎的短葶山麦冬地下部位，加入药材重量的6-8倍体积的浓度为50％-70％的乙醇，搅匀，回流提取1-3次，每次1-3小时，过滤，合并滤液，减压回收乙醇，备用；2)将药液直接用大孔树脂吸附,并用水和20％-30％的乙醇除杂，用50％-70％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，备用；3)将步骤2)中所得药液用乙酸乙酯多次萃取，然后再用正丁醇多次萃取，将萃取液分别浓缩至浸膏，分别获得乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物，其中乙酸乙酯和正丁醇的用量均为药液的1倍体积；4)将正丁醇萃取物进行硅胶柱色谱分离，分别用体积比为10:1，9:1，8:2，7:3，6:4，5:5，4:6，3:7，2:8的氯仿-甲醇进行梯度洗脱，收集第I2至I8部分，用薄层色谱进行检测，显色，合并相同部分，浓缩至干，备用；5)将硅胶柱层析I2至I8部分分别用凝胶SephadexLH-20进行柱层析，用体积比为1-3：1-3的氯仿-甲醇混合液进行洗脱除杂，分别收集所得洗脱液，减压回收浓缩至干得II2至II8，备用；6)将II6部分以RP-18为填料，以甲醇-水为流动相，梯度洗脱条件如下：0到10分钟，甲醇-水为流动相中，甲醇体积浓度为60％，水的浓度为40％；10到20分钟，甲醇的浓度匀速变为70％，水的浓度为30％；20到30分钟，甲醇的浓度匀速变为80％，水的浓度为20％，根据化合物的保留时间不同，共收集到两个主要馏分，经过分别浓缩馏分，回收溶剂，得式1化合物或式2化合物；将II7部分以RP-18为填料，以甲醇-水为流动相，梯度洗脱条件如下：0到10分钟，甲醇-水为流动相中，甲醇体积浓度为50％，水的浓度为50％；10到20分钟，甲醇的浓度匀速变为60％，水的浓度为40％；20到30分钟，甲醇的浓度匀速变为70％，水的浓度为30％，根据化合物的保留时间不同，共收集到三个主要的馏分，经过分别浓缩馏分，回收溶剂，得式3化合物、式4化合物或式5化合物。本专利技术的式1-5的化合物，在本专利技术的实验阶段也被称为化合物1-5。根据需要，采用化学领域的常规技术，可用酸碱中和的方式得到本专利技术化合物的药用盐。如使本专利技术化合物和硫酸、盐酸、氢溴酸、磷酸、酒石酸、富马酸、马来酸、柠檬酸、乙酸、甲酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、草酸或琥珀酸反应，得到相应的盐。或使本专利技术化合物和氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钡等，碱金属碳酸盐，如碳酸钠、碳酸钙等反应得到相应的盐。反应可在溶剂中进行，例如水或有机溶剂，如乙醇、四氢呋喃、二噁烷、乙二醇、乙酸等，或这种有机溶剂与水的混合物。如需要，该反应还可在无任何溶剂中进行。本专利技术还涉及含有本专利技术化合物或其药用盐的药物组合物。本专利技术的药物组本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有式Ⅰ结构的化合物或药学上可接受的盐，

【技术特征摘要】
1.一种具有式Ⅰ结构的化合物或药学上可接受的盐，式中：R1为H、-CH2OH或-CH3；R2为吡喃木糖；R3为吡喃木糖、鼠李糖或岩藻糖。2.根据权利要求1所述的化合物或药学上可接受的盐，其特征在于，所述化合物选自以下结构的化合物：3.一种制备权利要求1或2所述化合物或药学上可接受的盐的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：1)称取粉碎的短葶山麦冬地下部位，加入乙醇，搅匀，回流提取，过滤，合并滤液，减压回收乙醇，备用；2)将药液直接用大孔树脂吸附,并用水和低浓度乙醇除杂，高浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，备用；3)将(2)中所得药液用乙酸乙酯多次萃取，再用正丁醇多次萃取，将萃取液分别浓缩至浸膏，分别获得乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物；4)将正丁醇萃取物进行硅胶柱色谱分离，用氯仿-甲醇进行梯度洗脱，收集I2至I8部分的洗脱液，用薄层色谱进行检测，显色，合并相同部分，浓缩至干，备用；5)将硅胶柱层析I2至I8部分分别用凝胶SephadexLH-20进行柱层析，用氯仿-甲醇进行洗脱除杂，分别收集所得洗脱液，减压回收浓缩至干得II2至II8，备用；6)将II6部分以RP-18为填料，用高压液相色谱仪进行分离纯化，得式1化合物、式2化合物；将II7部分以RP-18为填料，用高压液相色谱仪进行分离纯化，得式3化合物、式4化合物、式5化合物。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤1)：提取用的乙醇为50-70％的乙醇，其用量是药材重量的6-10倍体积。5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤2)：所用大孔树脂为D101型，除杂乙醇浓度为20％-30％，所得合并液为50％-75％洗脱部分。6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤3)中：乙酸乙酯的用量是药液的体积比为1:1～3：1；正丁醇的用量是药液的体积比为1:1～3：1。7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)中：所述梯度洗脱，洗脱方式为氯仿-甲醇体积比为10:1，9:1，8:2，7:3，6:4，5:5，4:6，3:7，2:8。8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(6)中：II6的纯化过程为：以甲醇-水为流动相，梯度洗脱条件如下：0到10分钟，甲醇-水为流动相中，甲醇体积浓度为60％，水的浓度为40％；10到20分钟，甲醇的浓度匀速变为70％，水的浓度为30％；20到30分钟，甲醇的浓度匀速变为80％，水的浓度为20％，根据化合物的保留时间不同，共收集到两个主要馏分，经过分别浓缩馏分，回收溶剂，得式1化合物或式2化合物；II7...

【专利技术属性】
技术研发人员：余伯阳，李永伟，戚进，寇俊萍，周水平，李瑞明，罗学军，王瑞静，
申请(专利权)人：天士力制药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12