本发明专利技术属于抗体制剂领域，更具体地，本发明专利技术公开了一种适于皮下注射的抗人PD‑1的单克隆抗体制剂。本发明专利技术提供的抗人PD‑1单克隆抗体的液体制剂包括抗人PD‑1单克隆抗体、双缓冲剂、糖和氨基酸，其在制造、储存和给药期间是稳定的，具有较低的聚集体及片段化，并且适合以高浓度(例如用于皮下施用)施用。本发明专利技术的稳定的抗人PD‑1单克隆抗体的液体制剂能够有效运用于治疗肿瘤、感染性疾病、自身免疫性疾病以及抗免疫排斥等药物的制备中。
A monoclonal antibody preparation against subcutaneous injection of human PD-1
The invention belongs to the field of antibody preparation, more specifically, the invention discloses a method for subcutaneous injection of anti PD 1 monoclonal antibody preparation. The present invention provides a liquid preparation of anti human PD 1 monoclonal antibodies including anti human PD monoclonal antibody 1, double buffer, sugars and amino acids, during its administration in manufacturing, storage and is stable, has low fragmentation and aggregation, and is suitable for high concentration (for subcutaneous administration) the application of. The liquid preparation of the invention stable anti human PD 1 monoclonal antibody can be used effectively in the treatment of cancer, infectious diseases, autoimmune diseases and anti rejection drug preparation.
【技术实现步骤摘要】
一种适于皮下注射的抗人PD-1的单克隆抗体制剂
本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种抗人PD-1的单克隆抗体制剂。
技术介绍
人程序性细胞死亡受体-1(PD-1)是一种有288个氨基酸的I型膜蛋白，是已知的主要免疫检查点(ImmuneCheckpoint)之一(Blanketal,2005,CancerImmunotherapy,54:307-314)。PD-1表达在已经激活的T淋巴细胞，它与配体PD-L1(程序性死亡受体-配体1，programmedcelldeath-Ligand1)和PD-L2(程序性死亡受体-配体2，programmedcelldeath-Ligand2)结合可以抑制T淋巴细胞的活性及相关的体内细胞免疫反应。PD-L2主要表达在巨噬细胞和树突状细胞，而PD-L1则广泛表达于B、T淋巴细胞及外周细胞如微血管上皮细胞，肺、肝、心等组织细胞中。大量研究表明，PD-1和PD-L1的相互作用不但是维持体内免疫系统平衡所必须，也是导致PD-L1表达阳性肿瘤细胞规避免疫监视的主要机制和原因。通过阻断癌细胞对PD-1/PD-L1信号通路的负调控，激活免疫系统，能够促进T细胞相关的肿瘤特异性细胞免疫反应，从而打开了一扇新的肿瘤治疗方法的大门--肿瘤免疫疗法。PD-1(由基因Pdcd1编码)为与CD28和CTLA-4有关的免疫球蛋白超家族成员。研究成果显示，当PD-1与其配体(PD-L1和/或PD-L2)结合时会负调节抗原受体信号转导。目前已弄清鼠PD-1结构以及小鼠PD-1与人PD-L1的共结晶结构(Zhang，X.等，Immunity20：337-347(2004)；Lin等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA105：3011-6(2008))。PD-1及类似的家族成员为I型跨膜糖蛋白，其含有负责配体结合的Ig可变型(V-型)结构域和负责结合信号转导分子的胞质尾区。PD-1胞质尾区含有两个基于酪氨酸的信号转导模体ITIM(免疫受体酪氨酸抑制作用模体)和ITSM(免疫受体酪氨酸转换作用模体)。PD-1在肿瘤的免疫逃避机制中起到了重要的作用。肿瘤免疫疗法，即利用人体自身的免疫系统抵御癌症，是一种突破性的肿瘤治疗方法，但是肿瘤微环境可保护肿瘤细胞免受有效的免疫破坏，因此如何打破肿瘤微环境成为抗肿瘤研究的重点。现有研究成果已确定了PD-1在肿瘤微环境中的作用：PD-L1在许多小鼠和人肿瘤中表达(并在大多数PD-L1阴性肿瘤细胞系中可由IFNγ诱导)，并被推定为介导肿瘤免疫逃避的重要靶点(IwaiY.等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.99：12293-12297(2002)；StromeS.E.等，CancerRes.，63：6501-6505(2003)。通过免疫组织化学评估活组织检查，已经在人的很多原发性肿瘤中发现PD-1(在肿瘤浸润淋巴细胞上)和/或PD-L1在肿瘤细胞上的表达。这样的组织包括肺癌、肝癌、卵巢癌、宫颈癌、皮肤癌、结肠癌、神经胶质瘤、膀胱癌、乳腺癌、肾癌、食道癌、胃癌、口腔鳞状细胞癌、尿道上皮细胞癌和胰腺癌以及头颈肿瘤等。由此可见，阻断PD-1/PD-L1的相互作用可以提高肿瘤特异性T细胞的免疫活性，有助于免疫系统清除肿瘤细胞，因此PD-1成为开发肿瘤免疫治疗药物的热门靶点。通常，蛋白质具有非常短的半寿期，并且在暴露于各种因素(如不适宜温度、水-气界面、高压、物理/机械应力、有机溶剂和微生物污染)之后经历变性(如聚集、解离和吸附在容器表面)。因此，变性蛋白失去内在的理化性质和生理活性。蛋白质的变性通常是不可逆的，因此蛋白质一旦变性，它们的天然性质可能不会恢复到初始状态。在生物制药行业中，使用重组DNA技术制备的蛋白质在水性制剂中的长期储存通常是一项困难的任务。为了克服水性制剂中的蛋白质的稳定性问题，通过冻干(冷冻干燥)制备了更加稳定的治疗性蛋白产品。冻干产品通常伴随有用于复原的无菌水性介质。在复原之后，这些制剂典型地具有短的有效贮存寿命，即使在低温(例如，5℃)下保存时也是如此。由于冻干制剂存在来自复原程序的不便和错误的可能性，液体药物制剂是制备稳定、安全、有效的治疗用抗体药物的主要选择。然而，蛋白质治疗液体制剂长期存在的问题是聚集问题，其中蛋白质分子以物理方式粘在一起，导致形成可溶性高分子量聚集体等，在施用后可能在患者中引起不期望的免疫反应。因此，有必要提供一种在冷藏下具有增强的稳定性并且在正常室温下具有至少中等的稳定性的抗人PD-1单克隆抗体的液体制剂以在制造、储存和给药期间保护抗体药物免于降解反应，从而避免来自复原程序的不便和错误的可能性。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种稳定抗人PD-1单克隆抗体的制剂，其在制造、储存和给药期间是稳定的，并且适合以高浓度(例如用于皮下施用)施用。因此，本专利技术的第一个目的在于提供一种稳定抗人PD-1的单克隆抗体的液体制剂。本专利技术的第二个目的在于提供所述抗人PD-1单克隆抗体的液体制剂在制备药物中的应用。为了实现上述目的，本专利技术采取了如下技术方案：本专利技术的第一个方面在于提供一种抗人PD-1的单克隆抗体的液体制剂，包括抗人PD-1单克隆抗体、双缓冲剂、糖和氨基酸。其中，所述的缓冲剂选自缓冲剂可选自组氨酸、磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris等或其盐。优选的，所述的缓冲剂为磷酸盐缓冲剂和柠檬酸盐缓冲剂缓冲剂。其中，所述的糖选自单糖、二糖、多糖、糖衍生物，优选蔗糖、海藻糖、甘露醇或其组合。优选的，所述的糖为甘露醇。其中，所述的氨基酸选自赖氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、精氨酸或其组合。优选的，所述的氨基酸为精氨酸。进一步的，所述的抗人PD-1的单克隆抗体的液体制剂还包括表面活性剂，可选自：非离子表面活性剂(如聚氧乙烯、烷基酚聚氧乙烯醚、多元醇、失水山梨醇酯、蔗糖酯、烷基醇酰胺型等)、阴离子表面活性剂(如硬脂酸、十二烷基苯磺酸钠等)、阳离子表面活性剂(如胺盐、季铵盐、杂环型等)、两性离子表面活性剂(如卵磷脂、氨基酸、甜菜碱型等)，优选吐温20。进一步的，所述的抗人PD-1的单克隆抗体的液体制剂包括以下组分：(a)25-150mg/ml的抗人PD-1单克隆抗体，(b)10-50mM的磷酸盐缓冲剂，(c)10-50mM的柠檬酸盐缓冲剂，(d)50-300mM的甘露醇，(e)1-50mM精氨酸，(f)0.1-10mg/ml的吐温20，和其中所述制剂的pH为5.0-6.0。更进一步的，所述的抗人PD-1的单克隆抗体的液体制剂包括以下组分：(a)100mg/ml的抗人PD-1单克隆抗体，(b)10mM的磷酸盐缓冲剂，(c)10mM的柠檬酸盐缓冲剂，(d)250mM的甘露糖醇，(e)20mM的精氨酸，(f)8mg/ml的吐温20，和其中所述制剂的pH为5.5。进一步的，所述的抗人PD-1的单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：2所示，其轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：4所示。进一步的，所述的抗人PD-1的单克隆抗体的液体制剂适合进行单次皮下注射。本专利技术的第二个方面在于所述的抗人PD-1的单克隆抗体的液体制剂的应用，用于制备治疗肿瘤、感染性疾病、自身免疫性疾病以及抗免疫排斥本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种抗人PD‑1的单克隆抗体的制剂，其特征在于，所述制剂包括抗人PD‑1单克隆抗体、双缓冲剂、糖和氨基酸。
【技术特征摘要】
1.一种抗人PD-1的单克隆抗体的制剂，其特征在于，所述制剂包括抗人PD-1单克隆抗体、双缓冲剂、糖和氨基酸。2.如权利要求1所述的制剂，其特征在于，所述缓冲剂可选自组氨酸、磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris或其盐的组合。3.如权利要求2所述的制剂，其特征在于，所述缓冲剂为由磷酸盐缓冲剂和柠檬酸盐缓冲剂组成的双缓冲剂。4.如权利要求1所述的制剂，其特征在于，所述糖选自蔗糖、海藻糖、甘露醇或其组合。5.如权利要求4所述的制剂，其特征在于，所述的糖为甘露醇。6.如权利要求1所述的制剂，其特征在于，所述氨基酸选自赖氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、精氨酸或其组合。7.如权利要求1-6任一所述的制剂，其特征在于，还包括表面活性剂。8.如权利要求7所述的制剂，其特征在于，包括以下组分：(a)25-150...
【专利技术属性】
技术研发人员：李彩辉，李丽君，胡湘丽，耿妍，
申请(专利权)人：上海抗体药物国家工程研究中心有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。