一种益生菌饲料添加剂制造技术

本发明专利技术涉及饲料添加剂及其加工技术领域，特别涉及一种益生菌饲料添加剂，本申请的是由自主分离而得的植物乳杆菌、皱褶假丝酵母菌、嗜酒假丝酵母菌和格氏乳球菌与水牛乳为发酵底物混合发酵制得，本申请制备工艺简单，能广泛适用于奶水牛、猪、鸡、牛、羊等畜牧家禽养殖。能显著改善动物肠道微生物菌群，提高免疫力，可减少抗生素类药物的使用，消除药物残留，应用于生产，能缩短饲养周期，节省饲料，从而提高养殖收入。

Probiotics feed additive

The invention relates to the field of feed additive and its processing technology, in particular to a probiotic feed additive, this application is by self separation by Lactobacillus plantarum, Candida rugosa, alcoholic Candida and Lactococcus and water milk as the fermentation substrate mixed fermentation system, the application of simple preparation process, can be widely for buffalo, pig, chicken, milk cows, sheep and other livestock and poultry. Can significantly improve the animal intestinal microflora, improve immunity, and can reduce the use of antibiotics, eliminate drug residues, used in production, can shorten the breeding cycle, saving feed, thereby increasing farming income.

【技术实现步骤摘要】
一种益生菌饲料添加剂
本专利技术涉及饲料添加剂及其加工
，特别涉及一种益生菌饲料添加剂。
技术介绍
益生菌被联合国粮农组织和世界卫生组织定义为一种具有生物活性的微生物，益生菌的种类繁多，大体上可以分成乳杆菌、双歧杆菌和革兰氏阳性球菌三大类。大量研究证实益生菌具有改预防和改善腹泻、促进肠道消化系统健康、增强免疫力、降低血清胆固醇、预防生殖系统感染等俱多作用。近年来，大量使用抗生素作为饲料添加剂带来的弊端越来越明显，且造成的药物残留给人类和动物均带来了很大的影响。随着抗生素陆续被许多国家明令禁止使用，益生菌作为抗生素的替代品将会得到更好的发展。微生物饲料添加剂是一种取代或平衡动物生态系统中一种或多种菌系的微生物制品。其作为饲料进入畜禽体内后，能迅速繁殖，促进畜禽肠道中形成乳酸菌的优势菌群，维持其肠道的微生态平衡，能有效促进畜禽的生长，降低饲料的消耗。目前，国内有很多关于益生菌应用在动物饲料上的报道：例如，中国专利CN106906145A公布的《一种用于发酵青贮饲料的益生菌剂及生产方法》该方法利用益生菌对青贮饲料进行发酵，达到减少动物消化系统疾病的目的，但是，发酵饲料仍存在制作工艺复杂、不方便储存、携带等问题，而且该方法也没有针对产奶水牛的身体特性进行研究，因此，生产一种工艺简单、方便携带、储存的饲料添加剂，以增加各微生物之间的协同作用，提高养殖效益，针对本地水牛奶身体情况提高水牛奶的饲养效率。
技术实现思路
鉴于上述内容，有必要提供一种工艺简单、方便携带、储存的饲料添加剂，以增加各微生物之间的协同作用，提高养殖效益，针对本地水牛奶身体情况提高水牛奶的饲养效率。为达到上述目的，本专利技术所采用的技术方案是：一种益生菌饲料添加剂，所述添加剂由每克活菌数为2.6×108CFU/g～9.3×108CFU/g的益生菌发酵制得，所述益生菌由格氏乳球菌、植物乳杆菌、皱褶假丝酵母菌、嗜酒假丝酵母菌组成。进一步的，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)Y12，保藏编号为CCTCCNO:M2016469；所述皱褶假丝酵母菌为皱褶假丝酵母(Candidarugosa)Y7，保藏编号为CCTCCM2016468；所述嗜酒假丝酵母菌为嗜酒假丝酵母(Candidaethanolica)Y1，保藏编号为CCTCCM2016467；均从生鲜水牛乳中分离而得。进一步的，所述方法包括如下步骤：(1)将格氏乳球菌、植物乳杆菌、皱褶假丝酵母菌和嗜酒假丝酵母菌分别接种在MRS斜面培养基上进行培养，培养温度为37℃，培养时间为24h-48h，分别得到格氏乳球菌斜面培养菌、植物乳杆菌斜面培养菌、皱褶假丝酵母菌斜面培养菌和嗜酒假丝酵母菌斜面培养菌；(2)将步骤(1)的格格氏乳球菌斜面培养菌、植物乳杆菌斜面培养菌、皱褶假丝酵母菌斜面培养菌和嗜酒假丝酵母菌斜面培养菌分别转接到装有灭菌好的MRS肉汤培养基试管中进行摇床培养，培养温度为37℃，培养时间为24h，分别得到格氏乳球菌种子液、植物乳杆菌种子液、皱褶假丝酵母菌种子液和嗜酒假丝酵母菌种子液；(3)将步骤(2)的格氏乳球菌种子液、植物乳杆菌种子液、皱褶假丝酵母菌种子液和嗜酒假丝酵母菌种子液按1：2:2:2的质量比进行混合得到混合种子液，然后按照混合种子液和发酵液的质量比为2:25的接种量接种到装有发酵底物的发酵罐中，发酵温度为37℃，发酵时间为24h，得到扩大后的种子菌液；(4)将步骤(3)扩大后的种子菌液按种子菌液和发酵液的质量比为1-2:10的接种量接种到装有发酵底物的发酵罐中，发酵温度为37℃，发酵时间为24h，发酵的pH为3.2-4.8，冷却到室温得到混合菌种发酵液；(5)将步骤(4)的混合菌种发酵液用转速为3000-8000rpm离心机进行离心，离心时间为15-20min，离心去掉上清液，得到半固体菌泥，将菌泥放在冰箱中冷冻4h后放入真空冷冻干燥机中进行干燥，然后取出进行粉碎、装袋得到益生菌饲料添加剂。进一步的，所述步骤(1)的MRS斜面培养基成分为：蛋白胨10.0g/L，牛肉粉8.0g/L，酵母粉4.0g/L，葡萄糖20.0g/L，磷酸氢二钾2.0g/L，柠檬酸氢二铵2.0g/L，乙酸钠5.0g/L，硫酸镁0.2g/L，硫酸锰0.04g/L，琼脂14g/L，吐温-801g/L，余量为蒸馏水。进一步的，所述步骤(2)的MRS肉汤培养基成分为：蛋白胨10.0g/L，肉膏10.0g/L，酵母浸粉5.0g/L，葡萄糖20.0g/L，磷酸氢二钾2.0g/L，柠檬酸氢二铵2.0g/L，乙酸钠5.0g/L，硫酸镁0.58g/L，硫酸锰0.25g/L，半胱氨酸0.5g/L，吐温-801.0g/L，余量为蒸馏水，pH值为6.2-6.4。进一步的，所述步骤(3)、(4)发酵底物的质量百分数为：水牛乳25％～41％，蔗糖5％～10％，酵母浸粉0.02％～0.14％、琼脂5％～8％、碳酸钙0.07％～1％、蒸馏水40％～60％。进一步的，所述步骤(4)的混合菌种发酵液中植物乳杆菌含活菌数为2.6×108～5.3×108CFU/g，格氏乳球菌含活菌数为3.1×108～3.8×108CFU/g。进一步的，所述益生菌饲料添加剂应用于奶水牛养殖。本申请的益生菌饲料添加剂中微生物菌种来源如下：1、本申请的植物乳杆菌为植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)Y12：上述植物乳杆菌为植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)Y12自水牛乳中分离而得，水牛乳取自广西水牛研究所种水牛场，采用MRS培养基平板涂布法、斜面划线法分离而得，16SrDNA菌种鉴定由生工生物工程(上海)公司完成。细菌生理生化实验利用法国梅里埃公司的API20A试剂条完成。菌种适合生长温度为37～39℃，于2016年9月8日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO:M2016469。2、本申请的皱褶假丝酵母(Candidarugosa)Y7：上述皱褶假丝酵母(Candidarugosa)Y7从水牛乳中分离而得，水牛乳取自广西水牛研究所种水牛场，采用MRS培养基平板涂布法、斜面划线法分离而得，16SrDNA菌种鉴定由生工生物工程(上海)公司完成。细菌生理生化实验利用法国梅里埃公司的API50CH试剂条完成。菌种适合生长温度为30～35℃，于2016年9月8日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO:M2016468。3、本申请的嗜酒假丝酵母(Candidaethanolica)Y1：上述嗜酒假丝酵母(Candidaethanolica)Y1从水牛乳中分离而得，水牛乳取自广西水牛研究所种水牛场，采用MRS培养基平板涂布法、斜面划线法分离而得，16SrDNA菌种鉴定由生工生物工程(上海)公司完成。细菌生理生化实验利用法国梅里埃公司的API50CH试剂条完成。菌种适合生长温度为30～35℃，于2016年9月8日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO:M20164674、本申请的格氏乳球菌：上述格氏乳球菌通过市售得到，从中国典型培养物保藏中心购买。本专利技术具有如下有益效果：1、本专利技术饲料添加剂所使用的益生菌是从本地水牛奶的新鲜乳液中分离、纯化本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种益生菌饲料添加剂，其特征在于，所述添加剂由每克活菌数为2.6×10

【技术特征摘要】
1.一种益生菌饲料添加剂，其特征在于，所述添加剂由每克活菌数为2.6×108CFU/g～9.3×108CFU/g的益生菌发酵制得，所述益生菌由格氏乳球菌、植物乳杆菌、皱褶假丝酵母菌、嗜酒假丝酵母菌组成。2.根据权利要求1所述一种益生菌饲料添加剂，其特征在于，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)Y12，保藏编号为CCTCCNO:M2016469；所述皱褶假丝酵母菌为皱褶假丝酵母(Candidarugosa)Y7，保藏编号为CCTCCM2016468；所述嗜酒假丝酵母菌为嗜酒假丝酵母(Candidaethanolica)Y1，保藏编号为CCTCCM2016467；均从生鲜水牛乳中分离而得。3.用于制备权利要求1-2益生菌饲料添加剂的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)将格氏乳球菌、植物乳杆菌、皱褶假丝酵母菌和嗜酒假丝酵母菌分别接种在MRS斜面培养基上进行培养，培养温度为37℃，培养时间为24h-48h，分别得到格氏乳球菌斜面培养菌、植物乳杆菌斜面培养菌、皱褶假丝酵母菌斜面培养菌和嗜酒假丝酵母菌斜面培养菌；(2)将步骤(1)的格格氏乳球菌斜面培养菌、植物乳杆菌斜面培养菌、皱褶假丝酵母菌斜面培养菌和嗜酒假丝酵母菌斜面培养菌分别转接到装有灭菌好的MRS肉汤培养基试管中进行摇床培养，培养温度为37℃，培养时间为24h，分别得到格氏乳球菌种子液、植物乳杆菌种子液、皱褶假丝酵母菌种子液和嗜酒假丝酵母菌种子液；(3)将步骤(2)的格氏乳球菌种子液、植物乳杆菌种子液、皱褶假丝酵母菌种子液和嗜酒假丝酵母菌种子液按1：2:2:2的质量比进行混合得到混合种子液，然后按照混合种子液和发酵液的质量比为2:25的接种量接种到装有发酵底物的发酵罐中，发酵温度为37℃，发酵时间为24h，得到扩大后的种子菌液；(4)将步骤(3)扩大后的种子菌液按种子菌液和发酵液的质量比为...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨承剑，谢芳，梁贤威，李孟伟，梁辛，李丽莉，郭艳霞，彭开屏，
申请(专利权)人：广西壮族自治区水牛研究所，
类型：发明
国别省市：广西,45