多西他赛脂质体复合物及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种多西他赛脂质体复合物及其制备方法。所述复合物包括多西他赛、脂质材料、缓冲液等。所述脂质体复合物包括一种或多种脂类材料，且具有高的活性多西他赛与脂类的比率。本发明专利技术可以提高多西他赛脂质体复合物的包封率，具有稳定性好、靶向性高、毒副作用小等特点。本发明专利技术涉及的制备方法简单，可操作性强，容易实现工业化生产。

【技术实现步骤摘要】
多西他赛脂质体复合物及其制备方法多西他赛—是一种用于癌症系统治疗中比较有效的抗癌剂。这种化疗药物对试验动物和人体肿瘤模型的治疗非常有效，如转移性乳腺癌、非小细胞癌以及卵巢癌。多西他赛等紫杉醇类药物对胃癌、胰腺癌、黑色素瘤以及头颈部癌等也有一定疗效。像其他癌症化疗剂一样，典型地，如紫杉醇、多西他赛等紫杉醇类化合物具有严重毒性。紫杉醇类化合物的主要不足是过敏性休克、骨髓抑制、神经毒性，肌肉、关节痛等。减少紫杉醇类化合物毒性的试验，包括联合化疗(WenS等人,2016Anti-CancerDrugs)、合成类似物,免疫疗法和脂质体包埋(RenG等人，11/3/2016,DrugDeliv.)。相对于游离形式的剂型，脂质体内包埋的紫杉醇类药物的抗肿瘤剂，在保持抗肿瘤活性的同时，具有较低毒性。但是，由于生物活性剂的水溶解度低，在水中几乎不溶，以及低亲油性，导致生物活性剂/脂类的比率低，所以难以在脂质体或者脂类络合物中有效地包载多西他赛。包含多西他赛的脂质体和脂类复合物还存在另一个问题——化合物的稳定性。特别是在储存过程中的脂质体中生物活性剂效力的持久性和生物活性剂的保持力为公认问题(Freise等人，1982；Gondal等人，1993；Potkul等人，1991AmJObstetGynecol.164(2):652-658；Steerenberg等人，1988；Sweiss等人，1993)。专利技术概述本专利技术描述的是一种新型的由脂类包埋的多西他赛脂质体复合物及其制备方法。本专利技术描述的方法是形成这种新型多西他赛脂质体复合物的新方法。除了其他以外，本专利技术提供一种包括脂质体或脂类复合物和多西他赛的组合物，所述脂质体包含一种或者多种脂类，其中多西他赛与脂类的重量比率为1:250-1:20,或者1:175-1:30，或者1:100-1:40。一种或者多种脂类可以包括，例如55-100mol％DPPC和0-45mol％胆固醇，又例如55-90mol％DPPC和10-30mol％胆固醇.同时本专利技术还提供一种多西他赛脂质体复合物的制备方法，包括以下步骤：(a)多西他赛及脂类材料溶解在包括无水乙醇的有机溶剂中；(b)将(a)混合溶液注入到含水介质中混合；(c)在第一温度下使二者形成混合物；和(d)随后在比第一温度低的第二温度下形成进一步混合物。其中步骤(c)和(d)对提高多西他赛的包封率是有效的。一般是通过加热来实现步骤(c)，而一般是通过冷却来实现步骤(d)。在作为选择的实施例中，循环从冷却步骤开始，转换到加热步骤，重复这样两个步骤。所述方法包括继续使步骤(c)和(d)重复二或三或者更多个循环。可以通过将多西他赛和脂材溶解在包括无水乙醇的有机溶剂中形成多西他赛脂类溶液。在所有步骤(c)和(d)完成以后，多西他赛脂质体复合物的制备方法可以进一步包括：(e)通过穿过具有分子重量定点选择能力的膜来进行过滤，去除未包封的多西他赛，保留需要的脂质体或者脂类复合物。本专利技术进一步提供了按照本专利技术方法制备的多西他赛脂质体复合物和本专利技术组合物的药剂配方。所述配方包括药学上可接受的载体或稀释剂,适于对病人进行吸入或注射的给药方式。附图说明图1显示根据本专利技术的多西他赛脂质体复合物在肺癌细胞中的抗癌活性。
技术实现思路
本专利技术包括一种新型的脂类络合物的多西他赛脂质体复合物，其多西他赛与脂类比率非常高。本专利技术中多西他赛与脂类的重量比率是在1:15到1:70之间。最优选地，多西他赛与脂类的重量比率是在1:20到1:60之间。多西他赛脂质体复合物的制备方法包括将多西他赛与脂类溶液混合以及使其混合物在两种单独的温度下进行一个或者多个循环。可以通过这个方法形成多西他赛脂质体复合物。本专利技术描述的肺部给药吸入型多西他赛脂质体复合物的制备方法如下：将多西他赛和脂材溶于乙醇、甲醇等与水互溶的有机溶剂中并在搅拌下注入预热至脂材相变温度以上的生理盐水、等渗葡萄糖或PBS溶液得到脂质体溶液；采用超滤、透析或过Sephadex柱等方法除去游离多西他赛,得到多西他赛脂质体溶液。如常规试验能够决定的，在某些情况下，方法中采用的合适温度可以随方法中采用的脂类混合物而变化。制备的多西他赛脂质体复合物具有高的药物与脂材比率。配方可以适用于吸入或者注射。为了公开目的，采用以下技术术语：“溶液输灌”是包括在少量、优选微量的工艺相容溶剂中溶解药物以及一种或者多种脂类来形成药物脂类悬浮液或者溶液(优选溶液)，然后将溶液注射到含水介质中的方法。典型地，能够在含水工艺，例如透析中洗净工艺相容的溶剂。无水乙醇为优选溶剂。“乙醇输灌”，一种溶液输灌类型，是包括在少量、优选微量的乙醇中溶解药物以及一种或者多种脂类来形成药物脂类溶液，然后将溶液注射到含水介质中的方法。“少量”溶液是在输灌过程中与形成脂质体或者脂类络合物相容的数量。“疏水基质负载系统”是有上述溶液输灌方法生产的脂类/溶液混合物。用于本专利技术的脂类可以是合成的、半合成的或者天然存在的脂类，包括磷脂、维生素E、固醇、脂肪酸、糖脂、阴离子脂、阳离子脂。所述磷脂能够包括卵磷脂(EPC)、磷脂酰甘油(EPG)、磷脂酰肌醇(EPI)、磷脂酰丝氨酸(EPS)、磷脂酰乙醇胺(EPE)、和磷脂酸(EPA)：大豆相应物，大豆卵磷脂(SPC)：SPG、SPS、SPI、SPE和SPA：氢化的卵和大豆相应物(例如HEPC、HSPC)，硬脂酸(sterically)修正的卵磷脂乙醇胺，胆固醇衍生物，类胡萝卜素，其他通过脂键结构成的卵磷脂，该酯由在2和3位上含有12-26个碳原子链的甘油和在1位上含有不同个包含胆碱、甘油、肌糖、丝氨酸、乙醇胺的主要基团的甘油组成，以及相应的卵磷脂酸。这些脂肪酸链可以是饱和或者不饱和的，磷脂可以由不同长度和饱和度的脂肪酸构成。特别地，配方的组合物可以包括DPPC，自然存在的肺表面活性剂的主要成分。其他的例子包括肉豆蔻酰磷脂酰胆碱(DMPC)和二肉豆蔻酰磷脂酰甘油(DMPG)和二棕榈酸磷脂酰胆碱(DPPC)和二棕榈酸磷脂酰甘油(DPPG)和二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)和二硬脂酰磷脂酰甘油(DSPG)，二油酰磷脂酰-胆碱(PSPC)和棕榈酰硬脂酰甘油(PSPG)，三酰甘油，seranide、二酰甘油，鞘氨醇，鞘磷脂和如单-油酰-磷脂乙醇胺(MOPE)的单酰磷脂。试验结果明显地显示出在脂质体囊形成过程中对多西他赛进行包封。结果进一步显示出，由于多西他赛浓度比溶解极限高很多，所以多西他赛的物理状态为固态或者与脂质材料结合。结果进一步显示出过程中不需要冷冻混合物，但是冷却到冰冻温度之上的温度可以产生更好的效果。结果进一步显示出3-4个冷却和加热循环的包埋效果和6个循环的包埋效果类似，其说明3-4个循环的温度处理足以实现优选级别的包载。结果进一步显示了在提高多西他赛包封率的同时，可以将这个工艺放大。因此，本专利技术进一步提供用来供应适于整个给药为200mLS或更多、或者800LS或更多(适当的少量增加)的方法。所有其他的条件都相同的情况下，可以相信生产较大体积通常比小规模易达到增加的效果。如果这样的体积适于给药时，能够减少体积来使其适于存储。结果进一步显示了，由于最小限度的泄漏，通过本专利技术方法制备的多西他赛脂质体复合物能够保本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多西他赛脂质体复合物，包括脂质体或脂类络合物和包埋在其中的多西他赛，所述脂质体或脂类络合物包含一种或多种脂类材料，其中多西他赛与脂类的重量比率为1:250‑1:20；优选1:175‑1:30；更优选1:100‑1:40。

【技术特征摘要】
1.一种多西他赛脂质体复合物，包括脂质体或脂类络合物和包埋在其中的多西他赛，所述脂质体或脂类络合物包含一种或多种脂类材料，其中多西他赛与脂类的重量比率为1:250-1:20；优选1:175-1:30；更优选1:100-1:40。2.根据权利要求1所述的组合物，其中一种或多种脂类包括蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油等。3.根据权利要求1所述的组合物，其中脂类包括：维生素E、胆固醇和胆固醇衍生物等。4.根据权利要求2所述的组合物，其中一种或多种脂类包括二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)。5.根据权利要求3所述的组合物，其中一种或多种脂类包括胆固醇。6.根据权利要求2所述的组合物，其中一种或多种脂类包括55-100摩尔％DPPC和0-45摩尔％胆固醇，或者55-90摩尔％DPPC和10-30摩尔％胆固醇。7.一种制备多西他赛脂质体复合物的方法，包括以下主要步骤：(a)多西他赛及脂类材料溶解于一种或多种包括无水乙醇的有机溶剂中；(b)将疏水基质负载系统与含水介质相结合；(c)在第一温度下使二者形成混合物；和(d)随后在比第一温度低的第二温度下形成进一步混合物。其中步骤(c)和(d)对提高多西他赛的包封率是有效的。8.根据权利要求7所述的方法，进一步包括继...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁纯，刘海滨，林世源，梁璐，
申请(专利权)人：广州英特基因科技有限公司，佛山英特医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44